从10-250ul血液及相关体液等样品中直接提取总DNA
产品介绍
本试剂盒适用于哺乳动物血液核酸提取,不含苯酚等有毒化学试剂组分,采用独特的缓冲液配方 Buffer IRB 最大限度去除血液抑制剂的影响,同时应用先进的硅胶膜吸附技术,操作简单、快速。得到的 DNA 比传统试剂盒纯度更高,可直接用于酶切、转化、测序及 PCR 等分子生物学实验。
存储条件
本产品除 Proteinase K 溶液和 RNase 溶液外,可在室温(15~25℃)保存 12 个月。低温下 Buffer BL 或 Buffer IRB 可能会有沉淀形成,使用时需 55℃水浴让沉淀完全溶解。Proteinase K 溶液和 RNase A 溶液冰袋运输,收到产品后请分装保存于-20℃。
需要额外准备的材料
□ 无水乙醇(96%-100%) □ 无菌 1.5/2ml 离心管 开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 ● Buffer BL 和 Buffer IRB 是如有混浊现象,可在 55℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。 ● 基因组提取所有步骤都在室温(15-25°C)下进行。
开始前试剂准备
□ 按瓶子标签所示,Buffer BL 及 Buffer IRB 中加入适量的无水乙醇稀释,于室温密封保存。
DNA 浓度及纯度检测
回收得到的 DNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测纯度与浓度。 DNA 应在 OD260 处有显著吸收峰,OD260 值为 1 相当于大约 50μg/ml 双链 DNA、40μg/ml 单链 DNA。 OD260/OD280 比值应为 1.7-2.0,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用 ddH2O,比值会略低,因 为 pH 值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
应用领域
该方案适合于从约 10μl-1ml 人类的抗凝血液、血清、血浆、尿液、或其它体液样品中直接提取总 DNA。 该方案直接对样品进行裂解消化,获得的 DNA 包括了基因组 DNA(如淋巴细胞、线粒体 DNA、游离的 DNA(>100bp)、以及病毒 DNA(如乙肝)等;
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