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NCM/新赛美 快速重组无缝克隆试剂盒
基本售价：299.00元
产品介绍 EasyFusion Assembly Master Mix 是一种快速、简单且高效的定向同源重组克隆试剂盒，可将目的片段一个或多个 （PCR 产物）定向克隆到任意载体的任意位置。该技术不依赖于 T4 连接酶、不受载体和目的片段的酶切位点限制， 仅需 15-30 分钟实现高效无缝连接。 操作步骤1.线性化载体准备 可以通过以下两种方法获得线性化载体，最终载体的浓度需>10 ng/μl。(高浓度的载体有利于提高效率)。（1）选择合适的酶切位点线性化载体。（单酶切或双酶切均可， 5´端突出、3´端突出或平末端均适用）（2）以载体为模板，设计引物，通过 PCR 的方式扩增出需要的线性化载体 2.扩增插入片段引物设计 通常通过 PCR 获得目的片段，引物设计要保证目的片段两端有至少 15bp-20bp 序列与线性化载体的两端一致的 同源序列。PCR 每条引物长度至少在 35-40bp 之间，包括 5´ 端和 3´端与线性载体同源的 15bp-20bp（不包括酶 切位点）以及目的片段特异性序列 20-25bp。（1）单个片段的引物设计：引物包含目的基因特异性序列和重叠序列 插入片段正向扩增引物设计方式为： 5´-上游载体末端 15-20bp 同源序列+目的基因特异性正向扩增引物序列(20-25bp)-3´ 插入片段反向扩增引物设计方式为： 5´-下游载体末端 15-20bp 同源序列+目的基因特异性正向扩增引物序列(20-25bp)-3´ 设计引物时，可以参考以下实例（以 pUC19 线性化载体为例）：3.PCR 扩增插入片段推荐使用高保真聚合酶进行 PCR 扩增插入片段，以减少扩增突变的产生，选择聚合酶时无需考虑末端有无 A 加尾 发生（重组过程中将会被去除，在最终载体中不会出现）。PCR 扩增结束后，对目的 PCR 产物进行纯化：若是扩增模 板与克隆载体抗性不同，且 PCR 产物条带电泳单一，产物可以无需纯化直接用于重组反应，或者对 PCR 产物进行脱盐 等简单纯化；否则，需要进行琼脂糖凝胶电泳回收特异性的目的 PCR 片段。 4.重组反应进行 取出 EasyFusion Assembly Master mix, 置于冰浴中，配制下图应体系（如果不慎将液体粘在管壁，可通过短暂离心沉降）注意：10 ul 反应体系中，载体和各插入片段建议量在 20-50ng 之间，载体与各插入片段的最佳摩尔比为 1:2-1:3 轻轻混匀反应体系，50℃反应 15-30 分钟（对于多片段重组或大片段重组，建议反应时间 30 分钟，可延长反应时 间至 1 小时）；待反应结束后，将离心管置于冰上冷却数秒，之后将重组产物保存于-20℃或用于转化。 5. 反应产物转化、涂板及克隆鉴定 建议所使用的感受态细胞效率要达到> 5X 107 cfu/ug。转化步骤按照不同菌种的要求进行或者按标准转化操作 进行即可。菌落长出之后，建议采用菌落 PCR 进行阳性克隆鉴定，或者对样品进行测序确保正确。保存条件及组成成分 -20℃保存及冰袋运输 组成成分：2X EasyFusion Assembly Master Mix , 125ul; Linearized pUC19 Vector (10ng/ul),5ul;Control Insert（0.5kb, 20ng/ul),5ul注意事项 1. 线性化载体或目的片段的纯化的品质及浓度等较差会显著降低克隆阳性率及克隆数。2. 重组质粒大小的增加（>12kb），克隆效率会显著降低，选择稳定性更好的感受态及转化效率更高效的感受态细胞。3. 菌落较少时，建议适当增加重组反应产物的体积量，或者提高转化产物量等。4. 随着重组片段数目的增加，克隆效率降低，建议增加引物重叠序列长度或适当延长反应时间。
NCM/新赛美 细胞/组织总RNA快速提取试剂盒
基本售价：499.00元
产品介绍本试剂盒可以快速从细胞、细菌和动物组织中提取总RNA。本产品中裂解液(RLT Lysis Bufer)可以快速裂解细胞和灭活RNA酶，通过DNA清除/RNA吸附通用柱吸附技术，去除基因组DNA残留，同时在乙醇辅助结合条件下，高效地结合在吸附柱的硅胶膜上，再经过多次的洗涤离心后，去除细胞代谢物和蛋白质等杂质，获得纯净的总RNA。纯化的RNA可用于RT-PCR，NorthernBlotPoly(A)+筛选等多种实验。产品亮点安全性高:无需使用苯酚，氯仿等试剂，无需乙醇沉淀使用范围广:对细胞、细菌、动物组织提取均适用操作简单快速:全程室温操作，10-20分钟可完成纯化步骤提取纯度高:经多次柱吸附和洗涤，基因组DNA和蛋白质污染低首次使用前，在漂洗液 RWB Wash Buffer 中加入标签指定量的无水乙醇（5 preps/50 preps分别加入 4.8 ml/48 ml 无水乙醇），充分混匀后使用，并做好标记。*注意观察各溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季低温环境时），可 37℃温浴复溶至溶液澄清，避免影响使用效果。运输和保存方式常温运输，室温避光保存，有效期 12 个月。2-4°C 可保存更长时间
NCM/新赛美 总RNA提取试剂
基本售价：399.00元
产品介绍TRnaZol Reagent 适用于快速、直接从多种组织和细胞中提取总 RNA 的一种广谱型试剂。TRnaZol Reagent 内含优化的异硫氰酸胍、酸性酚等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶，最大 限度地裂解样品且同时保证 RNA 的完整性。加入 RNA Extraction Buffer 离心后，溶液会分成三层：上 层无色水相、中间层和下层红色有机相，其中 RNA 分布在上清无色水相中。本试剂操作快速方便，颜 色分明，提取的总 RNA 完整性好，纯度高，无蛋白和 DNA 的污染，可用于各种分子生物学实验，如RT-PCR、Real-time PCR、Dot Blot、Northern 等。 产品特色✔ 安全性高：使用 RNA Extraction Buffer 替代氯仿✔ 使用范围广：对人、动物、植物和细菌组织提取均适用✔ 颜色分明：溶液呈粉红色，便于分离水相和有机相✔ 提取纯度高：DNA 和蛋白质污染最低，可用于多种下游实验 产品介绍TRnaZol Reagent 适用于快速、直接从多种组织和细胞中提取总 RNA 的一种广谱型试剂。TRnaZol Reagent 内含优化的异硫氰酸胍、酸性酚等物质，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的核酸酶，最大 限度地裂解样品且同时保证 RNA 的完整性。加入 RNA Extraction Buffer 离心后，溶液会分成三层：上 层无色水相、中间层和下层红色有机相，其中 RNA 分布在上清无色水相中。本试剂操作快速方便，颜 色分明，提取的总 RNA 完整性好，纯度高，无蛋白和 DNA 的污染，可用于各种分子生物学实验，如RT-PCR、Real-time PCR、Dot Blot、Northern 等。 产品特色✔ 安全性高：使用 RNA Extraction Buffer 替代氯仿✔ 使用范围广：对人、动物、植物和细菌组织提取均适用✔ 颜色分明：溶液呈粉红色，便于分离水相和有机相✔ 提取纯度高：DNA 和蛋白质污染最低，可用于多种下游实验 组成成分及保存条件
NCM/新赛美 组织RNA保存液
基本售价：360.00元
产品介绍 RNAfollow（组织 RNA 保存液）是一种液体的，安全无毒的组织保存制剂，其可迅速渗 入到组织内，稳定和保护细胞的 RNA 于原位，通过高效抑制 RNase 的活性而保持 RNA 的完 整性。组织样品在RNAfollow 中保存，不会引起 RNA 的降解，可不用立即处理样品或将样品 冷冻在液氮。保存在该试剂中的样品，可在室温保存 1 周，或-20℃/-80℃长期保存，且反复 冻融不会显著影响 RNA 的品质和数量。 产品特色 样品无需液氮处理和冷冻保存 即时 RNase (核糖核酸酶)灭活 最大限度减少研磨和冷冻 长期保存且可反复冻融 用途广，可保存、运输和邮寄等 与大多数 RNA 分离操作兼容，结果更准确 操作步骤 1. 需先估量加入 RNAfollow 中的组织重量，根据加入至少 10 倍体积组织的量来确定加入 RNAfollow 的使用量，如：组织 100mg 需加入 1ml RNAfollow。 2. 动植物组织：切割获得组织样品，对于过大的组织需剪切成任何一边的最大厚度不超过 0.5cm，完全侵入到 RNAfollow 保存液中。 培养的细胞、细菌和真菌等：离心收集细胞，弃去上清，将细胞等用 PBS 清洗一次，再 用少量的 PBS 重悬，然后加入 2 倍体积的 RNAfollow 溶液保存。 注：RNAfollow 只能用于新鲜组织，在浸入 RNAfollow 之前不能冷冻组织。组织样品体 积尽量小，对于过大组织样品要简单切碎，最大厚度不可超过 0.5cm。 3. 在 RNAfollow 中的样品组织保存时间：在 37℃可保存 2 天；在室温（25℃）可保存一周 时间；4℃可至少保存 1 个月；对于-20℃或-80℃长期保存，先将样本在 4℃条件下过 夜渗透，再移入到-20℃或-80℃长期保存。 注：RNAfollow 不会溶解或破坏组织样品的结构，可反复冻融至少 20 次以上，不会显 著影响 RNA 的完整性。若需长途运输，在运输过程中需确保组织完全浸入在 RNAfollow中。 4. 保存在 RNAfollow 中样品的 RNA 提取：RNAfollow 溶液可与多数的 RNA 提取方法兼容， 如常见的 TRIzol 或柱式 RNA 提取试剂盒。 组织：用灭菌镊子将组织从 RNAfollow 中取出，移入到 RNA 提取试剂中（如 TRIzol），迅 速地将其匀浆，按照新鲜组织提取 RNA 的方法进行 RNA 的提取。 细胞：从保存在 RNAfollow 中的细胞中提取 RNA，可通过离心，去除 RNAfollow 溶液， 再加入 RNA 提取试剂。或者，直接向细胞和 RNAfollow 混合液中加入 RNA 提取试剂， 裂解细胞，提取 RNA。 保存条件 室温保存，运输，二年有效；低温贮存可能会产生沉淀或析出晶体，需37℃完全 溶解后再用。 注意事项 1. RNAfollow 溶液只能保存新鲜组织样品，不能用于冷冻样品的保存。 2. 组织样本任何一边的最大厚度不能大于 0.5 cm, 然后将组织块放入到 10 倍体积的 RNAfollow 中保存，要完全浸入到 RNAfollow 中。 3. 离心沉淀细胞，去除 RNAfollow，需至少 5000g 以上的离心力。 4. 植物叶片不适合用该试剂保存，因表面的腊表皮使 RNAfollow 很难完全渗入。5. 全血、血浆或血清中的 RNA 不可保存在 RNAfollow 中，因为它们蛋白含量过高，与 RNAfollow 混合后易形成不溶的沉淀。对于全血中白细胞的保存，要将白细胞从红细胞 和血清中分离出来，并按组织培养细胞一样处理后，白细胞便能有效地保存在 RNAfollow 中。
NCM/新赛美 蛋白上样缓冲液（还原性）
基本售价：250.00元
产品介绍 新赛美生物生产的 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(NCM SDS-PAGE Loading Buffer，5X)，是经 过改良的以溴酚蓝为染料，5 倍浓缩的蛋白上样缓冲液（还原性）。本上样缓冲液含有稳定 性更好，还原效果更优，没有难闻的气味的 TCEP 作为还原剂，代替传统的 DTT 或 2-ME。TCEP 是一种非常有效的硫醇类还原剂，广泛用作蛋白质化学及蛋白质组学研究中二硫键的定量还 原剂。用于常规的 SDS-PAGE 蛋白样品的上样。 产品特色 即用型：随取随用，使用时无需配制. 还原剂：TCEP 稳定性更高，还原效果更佳 无难闻气味：还原剂 TCEP 无难闻气味，替代了传统的 DTT 或 2-ME 操作步骤1. 在室温或不超过 37℃的水浴中溶解 SDS-PAGE 上样缓冲液(5X)，水浴溶解后立即室 温存放，尽量避免长时间置于水浴中。 2. 按照每 4 微升蛋白样品加入 1 微升蛋白上样缓冲液(5X)的比例，混合蛋白样品和蛋 白上样缓冲液(5X)。 3. 100℃或沸水浴加热 10 分钟，以充分变性蛋白。 4. 冷却到室温后，直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。 5. 通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。保存条件 -20 ℃保存，冰袋运输，至少 1 年有效；
NCM/新赛美 BCA蛋白定量试剂盒
基本售价：299.00元
产品介绍BCA（Bicin-choninic Acid）蛋白定量法是目前广泛应用的蛋白定量方法之一，可实现对蛋白 质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。该定量的原理是在碱性介质中，蛋白质可将 Cu2+还原成 Cu1+的反应，然后使用含有 BCA 的独特试剂，利用比色法检测 Cu1+，形成一种在 562nm 处有强 吸收值的紫色复合物。通过与标准品曲线对比，获得带测定蛋白的浓度，具有高灵敏度和高选 择性的特点。 产品特色1. 不受蛋白质种类的影响，在 0.02-2mg/ml 浓度范围内蛋白质浓度与吸光值成线性关系 2. 对表面活性剂的干扰影响小 3. 蛋白浓度测定简单、显色速度快和稳定性好 操作步骤1.稀释 BSA 标准品：用与待测蛋白样品一致的稀释液按下表稀释 BSA 标准品。
NCM/新赛美 蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液-500ml
基本售价：399.00元
产品介绍 NCM Western Blot Stripping Buffer（蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液）是新赛美生物生产的用于去除结合在印迹膜（PVDF膜或NC膜）上的一抗和二抗的洗涤液。该产品作用温和，不含有毒有味的巯基乙醇，在不影响目的蛋白的情况下，可使同一张印迹膜进行多次抗体检测。省去反复电泳和转膜等步骤，节省样品及时间，加快Western Blot检测实验。 产品特色 Ø 独有的配方，去除抗体效力强 Ø 对蛋白作用温和，不影响目的蛋白 Ø 不含有巯基乙醇，无毒无味，室温条件下使用保存 Ø 适用PVDF膜和NC膜，加速抗体检测 操作步骤 1. 将曝光结束的蛋白印迹膜充分浸入适当体积的NCM Western BlotStripping Buffer（蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液）中，抗体剥离液要充分覆盖膜的表面，在脱色摇床上，室温中速震荡孵育10分钟，弃去剥离液。 2. （可选）重复步骤1。（对于信号正常或较弱的印迹膜也可以不必重复步骤1，如果是内参等表达量高的蛋白，可以重复步骤1三次，以保证彻底去除了抗体。） 3. 每用镊子取出印迹膜，加入洗涤缓冲液TBST或PBST，在脱色摇床上中速震荡洗涤3次，每次5分钟。 4. (可选)通过显色曝光等方法检测抗体是否去除，如检测到信号，需重复步骤1，确保抗体被除尽。 5. 对印迹膜重新进行封闭，进入下一轮Western Blot 实验。 保存条件 室温保存，运输，一年有效 注意事项 1. 建议先检查表达量低的蛋白，再用NCM Western Blot Stripping Buffer处理印迹膜后，检测表达量高的蛋白； 2. 本品适用于NC膜和PVDF膜，推荐使用PVDF膜，效果更佳； 3. 为了安全和健康，请穿实验服，戴手套操作
NCM/新赛美 蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液-200ml
基本售价：199.00元
产品介绍 NCM Western Blot Stripping Buffer（蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液）是新赛美生物生产的用于去除结合在印迹膜（PVDF膜或NC膜）上的一抗和二抗的洗涤液。该产品作用温和，不含有毒有味的巯基乙醇，在不影响目的蛋白的情况下，可使同一张印迹膜进行多次抗体检测。省去反复电泳和转膜等步骤，节省样品及时间，加快Western Blot检测实验。 产品特色 Ø 独有的配方，去除抗体效力强 Ø 对蛋白作用温和，不影响目的蛋白 Ø 不含有巯基乙醇，无毒无味，室温条件下使用保存 Ø 适用PVDF膜和NC膜，加速抗体检测 操作步骤 1. 将曝光结束的蛋白印迹膜充分浸入适当体积的NCM Western BlotStripping Buffer（蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液）中，抗体剥离液要充分覆盖膜的表面，在脱色摇床上，室温中速震荡孵育10分钟，弃去剥离液。 2. （可选）重复步骤1。（对于信号正常或较弱的印迹膜也可以不必重复步骤1，如果是内参等表达量高的蛋白，可以重复步骤1三次，以保证彻底去除了抗体。） 3. 每用镊子取出印迹膜，加入洗涤缓冲液TBST或PBST，在脱色摇床上中速震荡洗涤3次，每次5分钟。 4. (可选)通过显色曝光等方法检测抗体是否去除，如检测到信号，需重复步骤1，确保抗体被除尽。 5. 对印迹膜重新进行封闭，进入下一轮Western Blot 实验。 保存条件 室温保存，运输，一年有效 注意事项 1. 建议先检查表达量低的蛋白，再用NCM Western Blot Stripping Buffer处理印迹膜后，检测表达量高的蛋白； 2. 本品适用于NC膜和PVDF膜，推荐使用PVDF膜，效果更佳； 3. 为了安全和健康，请穿实验服，戴手套操作
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