【保存条件】 室温运输;2-8°C保存18个月;-20°C保存36个月【概述】 Cell Store 系列细胞冻存液可稳定长期储存细胞。凭借其独特的配方,可在冻融程序后 实现稳定的冷冻保存和高存活率,是存储任何细胞类型(包括敏感细胞系)的值得信赖的解 决方案。 本品可以用于常规细胞/肿瘤细胞/干细胞等细胞冻存,-80℃可长期保存(>5 年),细 胞存活率在 90-98%,无需程序降温。【产品特点】 无 DMSO 即用型细胞冻存液 直接冻存于-80℃冰箱,长期保存(>5 年),无需程序性降温 无血清及其它蛋白质成份 细胞存活率高于传统 DMSO 血清方法 【使用建议(仅供参考)】细胞冻存步骤 1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。 2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。3. 通过离心(3-5 分钟,1,000~2,000rpm)收集培养细胞沉淀,彻底去除离心管中上清液。 4. 加入适量 CellStore 无血清细胞冻存液于离心管中(每 1 ml 冻存液可用于 5×10 5-1×10 7细 胞),轻柔混匀细胞制成细胞混合液。 5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管 1ml 或 1.5ml,标识细胞系 名称、细胞浓度、传代日期和其他重要信息。 6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。 7. 若需转移至液氮中长期保存,需先放入-80℃冻存至少 24 小时后方可移至液氮罐中保存。 重要提示:最佳方案可能会随细胞类型而变化。冻存细胞复苏步骤 1. 从冰箱或液氮中取出冻存的细胞,立即置于 37℃水浴中快速解冻。 2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入 1ml 细胞培养基于冷冻管中与细胞混合, 再将其中的混合液移至含有约 5ml 该细胞培养基的离心管中,1,000~2,000rpm 离心 3-5 分钟 收集细胞沉淀,移弃上清液(操作时小心,切勿将细胞沉淀移去) 3. 使用适当体积的完全细胞培养基轻轻悬浮细胞,后转入至细胞培养平板或培养瓶。 4. 使用显微镜观察后,可根据各自研究所需的方案继续进一步的培养。【注意事项】 1. 本品仅用于科研用途,不得用于临床或诊断相关研究 2. 对于敏感型复杂细胞系,建议在使用前对所冻存的胞进行至少为期 1 周的该产品试验性 细胞冷冻保存培养,确认性能后再进行正式冻存 3. 请注意冻存过程中的无菌操作。
Cell Store无血清细胞冻存液使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-8721Cell Store Cell Freezing Media100ml/500ml 使用说明书1份【保存条件】室温运输,2-8°C保存18个月,-20°C保存36个月【概述】Cell Store系列细胞冻存液可稳定长期储存细胞。凭借其独特的配方,可在冻融程序后实现稳定的冷冻保存和高存活率,是存储任何细胞类型(包括敏感细胞系)的值得信赖的解决方案。本品可以用于常规细胞/肿瘤细胞/干细胞等细胞冻存,-80℃可长期保存(>5年),细胞存活率在90-98%,无程序降温。【产品特点】l 即用型细胞冻存液l 直接冻存于-80℃冰箱,长期保存(>5年),无程序性降温l 无血清及其它蛋白质成份l 细胞存活率高于传统DMSO血清方法【使用建议(仅供参考)】细胞冻存步骤1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所冻存细胞数。1. 通过离心(3-5分钟,1,000~2,000rpm)收集培养细胞沉淀,彻底去除离心管中上清液。2. 加入适量CellStore无血清细胞冻存液于离心管中(每1 ml冻存液可用于5×105-1×107细胞),轻柔混细胞制成细胞混合液。3. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml,标识细胞系名称、细胞浓度、传代日期和其他重要信息。4. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。5. 若转移至液氮中长期保存,先放入-80℃冻存至少24小时后方可移至液氮罐中保存。重要提示:佳方案可能会随细胞类型而变化。冻存细胞复苏步骤1. 从冰箱或液氮中取出冻存的细胞,立即置于37℃水浴中快速解冻。2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入1ml 细胞培养基于冷冻管中与细胞混合, 再将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中,1,000~2,000rpm离心3-5分钟收集细胞沉淀,移弃上清液(操作时小心,切勿将细胞沉淀移去)3. 使用适当体积的完全细胞培养基轻轻悬浮细胞,后转入至细胞培养平板或培养瓶。4. 使用显微镜观察后,可根据各自研究所的方案继续进步的培养。【注意事项】1. 本品仅用于科研用途,不得用于临床或诊断相关研究2. 对于敏感型复杂细胞系,建议在使用前对所冻存的胞进行至少为期1周的该产品试验性细胞冷冻保存培养,确认性能后再进行正式冻存3. 请注意冻存过程中的无菌操作。
【操作方法】1. 对于贴壁细胞(以下均以6孔板为例,其它培养皿或培养板请根据相应面积换算):a.将细胞培养于培养皿或培养板内,通常在铺板后1-2天内长到70-90%。 b. 在转染前1-2小时,吸去细胞培养液,更换为新鲜的不含抗生素的完全培养液2ml。c. 取2-4μg待转染的质粒DNA (质粒总体积不宜超过20μl,若有多种质粒请混匀),以质量体积比1:3加入转染试剂6~12μl(如2μg待转染的质粒DNA加入转染试剂6μl)。d.混匀后,室温孵育3-5分钟。e. 把DNA-转染试剂混合物中加入500μl opti-MEM(若无opti-MEM可使用无血清无双抗的DMEM或1640,具体根据转染细胞使用的培养基),充分混匀后静置10-15分钟。 f.后均匀滴加到整个6孔板内(加入前吸出原培养板中500μl培养基),并置于含5%二氧化碳的37ºC细胞培养箱内培养。 g. 在转染后4-6小时左右换液,更换为2ml新鲜的完全培养液,继续培养。h.通常在转染约24-48小时后就可以检测到转染基因的表达。2. 对于悬浮细胞: a. 离心收集悬浮细胞,用PBS洗涤一次。 b. 按照上面的步骤c)、d)、e)制备DNA-转染试剂-optiMEM混合物。c. 每106个细胞的沉淀,用500微升DNA-转染试剂-optiMEM混合物重新悬浮,室温放置15-20分钟。 d. 在一个6孔板孔内加入1.5ml完全培养液,然后加入来自上一步的细胞-500微升DNA-转染试剂-optiMEM混合物,混匀。e. 在含5%二氧化碳的37ºC细胞培养箱内培养。 f. 根据实验要求和转染试剂对于不同细胞的毒性不同,在4-6小时后离心收集细胞,用PBS洗一次,然后用2毫升完全培养 液重新悬浮细胞,继续培养。 g. 通常在转染约24-48小时后就可以检测到转染基因的表达。
功能与使用方法与life品牌的Trizol LS相似 【保存条件】2-8℃长期保存【操作方法】I. 样本处理1. 组织样本处理:用匀浆器或其他类似设备匀化组织样本机械破坏装置,每 500μL 最多使用 50 mg 组织NewZOL LS。 对于 DNA 含量高的组织(例如脾脏),建议使用 25 mg 组织/ 500μL 试剂。 2. 贴壁细胞样本处理:除去细胞培养基,通过向培养皿(直径 3.5 cm,10 cm2)中加入至少 1 mL NewZOLLS 并通过反复吸移来确保完全裂解。(根据培养皿面积而不是细胞数计算试剂量。试剂量不足将导致分离的 RNA 受到 DNA 污染。残留的匀浆可以在-20 至-80°C 下保存至少一年,以备后用。) 3. 悬浮细胞样本处理:沉淀细胞,并通过添加 NewZOL LS 直接裂解。 每 5×106个细胞至少加入 500μLNewZOL LS,移液器吹打数次裂解细胞。(添加 NewZOL LS 之前请勿洗涤细胞,细胞洗涤可能会导致 RNA降解。) 4. 液体样本处理:每 200μL 液体样品中加入 500μL NewZOL LS 进行均质化和裂解。对于小于 200μL 的样品体积,请添加 500μLNewZOL LS 并加水至最终体积为 700μL。 5. 富含脂质样本处理:如上所述均质化富含脂质的样品。将样品以 12,000×g 离心 5 分钟。 离心后,样品顶部会出现一层脂肪。用移液器吸头尖端刺穿上层,然后将上清液转移到新管中。 II. RNA 提取1. 每使用 500μLNewZOL LS 的裂解液中加入 200μL 无 RNase 的水至裂解液中。剧烈摇动样品 15 秒钟。在室温下孵育 5 分钟。(对于包含 50 mg 组织/ 500μL NewZOL LS 的样品,建议在室温下孵育 15 分钟。) 2. 在室温下以12,000×g离心样品15分钟。含有DNA,蛋白质和多糖的半固体沉淀物形成在试管底部。RNA仍溶解在上清液中。 3. 将 500μL 上清液转移至新管中。 勿吸太干净防止污染,在 DNA /蛋白质沉淀上方保留一小部分上清液。(含有 DNA,蛋白质和多糖的沉淀物占匀浆-水混合物总量的约 10%。)4. 加入等体积异丙醇,上下颠倒混匀以沉淀 RNA,在室温下孵育样品 10 分钟。5. 将样品以 12,000×g 离心 10 分钟,除去并丢弃上清液。通常,在管的底部以白色沉淀的形式获得 RNA。对于脾脏样品,RNA 在试管底部形成凝胶状膜。用乙醇洗涤后,膜变得更可见。 6. 加入 500μL 75% 乙醇(无 RNase 水配制)洗涤,轻弹管底使沉淀悬浮,上下颠倒混匀。对于较大的试管,按比例添加 75% 乙醇溶液。 7. 将沉淀以 8,000×g 的速度离心 3 分钟。移液去除沉淀中的乙醇,重复乙醇洗涤步骤一次。静置 5-10 分钟待乙醇挥发,无需过份干燥成固体,干燥成固体的 RNA 沉淀不易溶解 8. 将 RNA 沉淀溶于无 RNase 的水中,在室温下涡旋 3 分钟,以实现有效溶解。将得到的 RNA 进行检测或-65℃长期保存(若需更长时间保存请添加适量 RNA Chill(ES-8520))。 【注意事项】1. RNA 酶污染注意事项:a. 提取过程用品均经过去 RNA 酶处理:玻璃制品可以 150 °C 烘烤 4 小时 ,塑料制品可浸泡于 0.5M NaOH 溶液后用清水冲洗并高压灭菌,吸头及离心管类尽量使用一次性无酶吸头及离心管 b. 佩戴手套及口罩及护目镜:皮肤上常含有细菌和霉菌,可污染 RNA 制备,且同时是 RNA 酶来源,同时 New ZOL LS 对皮肤有一定毒性,建议佩戴手套及口罩及护目镜。 c. 尽量于通风橱内提取:避免吸入提取过程中有毒物质。2. 安全性问题:a. 本品在与皮肤接触及吞咽有毒性,可导致烧伤。与皮肤接触后,应立即用洗涤剂和大量水冲洗。如感到身体不适,应立即就医
【保存条件】常温运输,2-8°C保存12个月【产品特点】l快速高效:5~10 min快速完成封闭;只结合封闭转印膜而不结合蛋白,因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,与传统的脱脂奶粉和BSA封闭相比信噪比更高;l性能可靠:无蛋白配方,与抗体无交叉反应;l应用范围广:无磷酸化蛋白,无生物素,尤其适合磷酸化特异抗体及生物素检测系统;l增强抗体效果:使用本封闭液后,所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度,可大大节省抗体使用量。【概述】本品专为快速高效封闭Western Blot转印膜而设计,采用无蛋白配方,避免抗体与封闭剂的非特异结合,可最大程度地降低背景。同时,本封闭剂无内源的磷酸化蛋白及生物素,对磷酸化特异抗体及生物素检测也不会产生干扰。本封闭剂不与蛋白产生非特异性结合,因而只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,大大提高了抗体检测灵敏度。实验表明本封闭剂对许多抗体都有不同程度的信号增强作用。然而这种信号增强作用因抗体而异,对某一特定抗体,并不一定具有确定的信号增强作用。【使用建议】1.完成转膜后,将转印膜放入到杂交孵育盒中,根据膜的大小适量体积的快速封闭液,需完全浸没覆盖膜,对于7.5×8cm的膜推荐使用量5-10ml;2.置于摇床轻轻摇动,室温封闭约10min;注意:使用本品通常封闭5~15min均可;经多种抗体的测试封闭10min的效果显著优于常规的BSA封闭1 h。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30~60 min。如有特殊需要,也可4°C封闭过夜。3.封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。【注意事项】1.注意: 没有任何一种封闭剂能适合所有抗原和抗体检测系统。如出现本试剂不适合的抗体,请替换使用其它种类的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等;2.本品仅用于科研用途,不得用于临床或诊断相关研究;3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
【保存条件】室温保存,一年有效【概述】甘油又名丙三醇,是一种无色、无臭、味甘的粘稠液体。 分子式:C3H8O3,分子量:92.094,CAS号:56-81-5。本产品纯度高于99%,经无菌处理,使用时应稀释至工作浓度。【注意事项】1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 本品为有毒化合物,避免与皮肤和眼睛接触,请小心操作。3. 溶液为无菌溶液,使用时应尽量避免污染。
Lysis dilution buffer(150 mM NaCl/5 mM EDTA)500ml
TripleSelect无动物源常温胰酶 【保存条件】 室温保存12个月, 2–8°C或–20°C保存24个月【概述】 TripleSelect与胰蛋白酶一样,可裂解赖氨酸和精氨酸C-末端上的肽键。但是,TripleSelect无与伦比的纯度提高了特异性,其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中存在的多种酶的裂解作用造成的损害。【产品特点】 对细胞作用温和:纯度提高了特异性,其原因在于只有一种酶发挥作用。这减少了胰蛋白酶和其他提取物中由于多种酶切割造成的损害。在室温下保持稳定:在室温或4°C下可保持稳定12-24个月,因此易于储存和处理、方便快捷。无动物来源蛋白:与常用猪胰蛋白酶不同,本试剂不含动物来源成分。无需终止,易于使用:无需使用胰蛋白酶抑制剂(如FBS)终止消化,PBS或DMEM等稀释后自动失活。【使用建议】 1.使用前将TripleSelect和完整的生长培养基恢复至室温。2.将待消化细胞培养器皿中培养去除。3.使用DPBS(无钙镁)清洗细胞,清洗完去除DPBS液体。4.加入相应体积的TripleSelect消化液(如25cm2瓶中加入1-2ml TripleSelect消化液,75cm2瓶中加入5ml TripleSelect消化液)5.37°C孵育至细胞变圆脱落(镜下观察),可轻拍培养瓶/皿。6.加入5ml完全培养基至培养瓶/皿(体积根据不同面积培养瓶/皿),可轻轻吹打使细胞更好分离。7.将含细胞的液体移入15ml无菌离心管中。以200-500g转速离心5-10分钟使细胞沉淀。8.去除上清后,加入含血清的完全培养液使细胞沉淀重新悬浮,即可用于后续实验【注意事项】 1. 注意无菌操作,尽量避免污染。2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。