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通用型抗体稀释液
基本售价：790.00元
产品介绍：通用型抗体稀释液是一种即用型的，适合于稀释所有免疫抗体测定（Immunofluorescence, IHC, ELISA, WB）实验中的抗体。该试剂可用于一抗或二抗的稀释和配制，在4℃保存和使用不少于六个月。稀释液中加入了多种抗体结合反应增强剂及稳定剂，能够增加抗体的溶解度和稳定性，增强免疫反应，降低非特异的背景颜色，提高实验的特异性和灵敏度。可反复使用，节约宝贵的抗体。试剂中不含有动物源的蛋白、磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂，适合于所有类型抗体稀释，包括HRP，AP标记的抗体。产品特色：1.即用型稀释液，无需配制2.稀释后的抗体可以使用长达6个月3.适用所有实验的抗体稀释（IF、IHC、ELISA、WB）4.含抗体结合反应增强剂、稳定剂，效果更佳5.不含 BSA、脱脂奶粉等动物源蛋白6.不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂 运输和保存条件：常温运输，4℃存储，有效期两年。使用说明：1.根据抗体使用说明书，直接用本品对一抗或二抗进行适当倍数的稀释。2.保存在抗体稀释液中的抗体可回收于4℃保存，可反复使用多次，长达6 个月以上，直至不能达到理想结果后丢弃。注意事项：1.使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发或与空气的物质发生化学反应，并放回4℃保存。2.在进行抗体免疫反应前可以使用Genefist的无蛋白封闭液（货号GF1813）进行封闭，能进一步提高条带的清晰度，减少显色后的高背景和杂带的产生 。3.本品不含叠氮钠或硫柳汞类防腐剂，但含安全性更高的防腐剂，还需小心操作避免皮肤直接接触。4. 本试剂只能用于科研实验，请勿用于临床诊断和其它用途。
通用型抗体稀释液
基本售价：170.00元
产品介绍：通用型抗体稀释液是一种即用型的，适合于稀释所有免疫抗体测定（Immunofluorescence, IHC, ELISA, WB）实验中的抗体。该试剂可用于一抗或二抗的稀释和配制，在4℃保存和使用不少于六个月。稀释液中加入了多种抗体结合反应增强剂及稳定剂，能够增加抗体的溶解度和稳定性，增强免疫反应，降低非特异的背景颜色，提高实验的特异性和灵敏度。可反复使用，节约宝贵的抗体。试剂中不含有动物源的蛋白、磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂，适合于所有类型抗体稀释，包括HRP，AP标记的抗体。产品特色：1.即用型稀释液，无需配制2.稀释后的抗体可以使用长达6个月3.适用所有实验的抗体稀释（IF、IHC、ELISA、WB）4.含抗体结合反应增强剂、稳定剂，效果更佳5.不含 BSA、脱脂奶粉等动物源蛋白6.不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂 运输和保存条件：常温运输，4℃存储，有效期两年。使用说明：1.根据抗体使用说明书，直接用本品对一抗或二抗进行适当倍数的稀释。2.保存在抗体稀释液中的抗体可回收于4℃保存，可反复使用多次，长达6 个月以上，直至不能达到理想结果后丢弃。注意事项：1.使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发或与空气的物质发生化学反应，并放回4℃保存。2.在进行抗体免疫反应前可以使用Genefist的无蛋白封闭液（货号GF1813）进行封闭，能进一步提高条带的清晰度，减少显色后的高背景和杂带的产生 。3.本品不含叠氮钠或硫柳汞类防腐剂，但含安全性更高的防腐剂，还需小心操作避免皮肤直接接触。4. 本试剂只能用于科研实验，请勿用于临床诊断和其它用途。
5X蛋白上样缓冲液（还原型）
基本售价：50.00元
产品简介： SDS-PAGE 上样缓冲液(SDS-PAGE Loading Buffer, 5X)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5 倍浓缩的蛋白上样缓冲液，用于 SDS-PAGE 时蛋白样品的上样操作。本产品不含传统的 β-巯基乙醇或 DTT，采用 TCEP作为还原剂，稳定性更好、还原效果更高，并且无难闻气味！由于含有变性剂，本产品不适用于非变性胶的电泳。 保存条件： -20℃保存，至少两年有效。 使用说明： 1、 在 37℃水浴中溶解蛋白上样缓冲液。 注意： Loading buffer 里含有大量甘油，有助于样品沉淀至加样孔底部，低温下试剂组分在甘油里容易析出，使用前一定要确保蛋白上样缓冲液充分溶解。 2、 按照每 4ul 蛋白样品加入 1ul 上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和上样缓冲液。 3、 100℃或沸水浴加热 5-10 分钟，以充分变性蛋白。 注意：如果起始时细胞或组织的用量较大，基因组 DNA 含量较高，煮沸 5-10 分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体，此时需要延长煮沸时间，或者加入适量稀释成 1X 的蛋白上样缓冲液再煮 3-5 分钟。充分煮沸可以使结合在基因组 DNA 上的蛋白充分释放，同时会导致基因组 DNA 的部分断裂，从而使粘稠感消失，这样就不会影响后续的上样操作。 4、 冷却到室温后，离心取上清上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内，开始电泳。 5、 通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近，即可停止电泳。 注意事项： 由于含有变性剂，本品不适用于非变性胶的电泳 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(5X)必须完全溶解后再使用。 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5X蛋白上样缓冲液（还原型）
基本售价：200.00元
产品简介： SDS-PAGE 上样缓冲液(SDS-PAGE Loading Buffer, 5X)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5 倍浓缩的蛋白上样缓冲液，用于 SDS-PAGE 时蛋白样品的上样操作。本产品不含传统的 β-巯基乙醇或 DTT，采用 TCEP作为还原剂，稳定性更好、还原效果更高，并且无难闻气味！由于含有变性剂，本产品不适用于非变性胶的电泳。 保存条件： -20℃保存，至少两年有效。 使用说明： 1、 在 37℃水浴中溶解蛋白上样缓冲液。 注意： Loading buffer 里含有大量甘油，有助于样品沉淀至加样孔底部，低温下试剂组分在甘油里容易析出，使用前一定要确保蛋白上样缓冲液充分溶解。 2、 按照每 4ul 蛋白样品加入 1ul 上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和上样缓冲液。 3、 100℃或沸水浴加热 5-10 分钟，以充分变性蛋白。 注意：如果起始时细胞或组织的用量较大，基因组 DNA 含量较高，煮沸 5-10 分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体，此时需要延长煮沸时间，或者加入适量稀释成 1X 的蛋白上样缓冲液再煮 3-5 分钟。充分煮沸可以使结合在基因组 DNA 上的蛋白充分释放，同时会导致基因组 DNA 的部分断裂，从而使粘稠感消失，这样就不会影响后续的上样操作。 4、 冷却到室温后，离心取上清上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内，开始电泳。 5、 通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近，即可停止电泳。 注意事项： 由于含有变性剂，本品不适用于非变性胶的电泳 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(5X)必须完全溶解后再使用。 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
RNAstore样本保存液
基本售价：1296.00元
储存条件 室温（15-25℃）可稳定保存1年以上。低温贮存可能会产生沉淀或晶体析出，用之前需37℃完全溶解沉淀。 产品介绍 RNAstore是一种液态的、无毒的组织保存试剂。它能迅速渗入组织细胞中，通过抑制RNase活性从而保护非冷冻细胞RNA于原位，使其更适合于组织基因表达谱的分析。获得组织块后，迅速浸泡在RNAstore中保存，而不会引起RNA的降解，这样可以不必马上处理样本，也不必将样本冷冻在液氮之中。RNAstore可广泛应用于多种脊椎动物样本。包括脑、心、肾、脾、肝、肺和胸腺。 推荐不同组织样品的RNAstore使用量： 注意事项 1.RNAstore只能用于新鲜组织，在浸入RNAstore之前不能冷冻组织。 2.要求组织样本任何一边的最大厚度不能大于0.5 cm, 然后将组织块放入到10倍体积的RNAstore中保存。如果组织样品厚度过大，RNAstore渗入组织样本中的速度将会减慢造成RNA降解。所以如果厚度超过0.5 cm需简单切碎组织后再在RNAstore中贮存。 操作步骤 1.切割组织前估计加入RNAstore中的组织重量，并根据加入至少10倍体积组织的量确定RNAstore的使用量（举例：组织100 mg需1 ml RNAstore） 2.切割组织后放入RNAstore中。如果组织样本过大需剪切成任何一边的最大厚度不能大于0.5 cm。 注意：为完全有效的保护组织样本，该组织样本应完全浸没入RNAstore中并且组织样本的任何一边的最大厚度不应超过0.5 cm。 3.贮存于RNAstore中的样品组织4℃可至少保存1个月、室温1周和37℃ 1天。对于-20℃或-80℃长期保存，先将样本在4℃条件下过夜渗透，然后将组织从RNAstore中取出后放入-20℃或-80℃长期保存。样本可随后在室温下解冻及再冻存，其RNA的质和量都不会受影响。 注意：建议组织样品在RNAstore中低温保存 (4℃可至少保存1个月，-20℃或-80℃长期保存)，不建议37℃或室温保存。冻存于-20℃或-80℃的组织可反复冻融至少20次不影响RNA提取。保存于RNAstore中的组织如果需要长途运输，运输过程中需要确保组织完全浸入RNAstore中。 4.从RNAstore中取出样品就可以用RNA提取的试剂盒 (Trizol,RNAprepPure, RNAsimple)直接提取RNA。 其它应用 1.该试剂不适合于保存植物叶片，其表面的腊表皮使RNAstore很难完全渗入组织中。 2.对于组织培养细胞的操作，先沉淀细胞，用PBS洗一次，再用少量的PBS悬浮细胞，后加2倍体积的RNAstore保存。后续RNA的提取可以采用直接离心去除RNAstore后进行RNA提取，也可以不用去除RNAstore直接加入RNA提取裂解液进行直接提取。 离心法：因为RNAstore的介质浓度比典型的细胞培养介质的浓度高，因此用通常沉淀活细胞的离心力无法沉淀RNAstore中的细胞。离心沉淀细胞，去除RNAstore。（HeLa细胞大约需要3000×g，但其他细胞可能不能容忍这个速度，或者他们需要更大的离心力。） 直接提取法：通过向细胞混合物中加入10倍体积的RNA提取试剂来完成。 3.对于细菌的操作，先离心收集细菌，用PBS洗一次，再用少量的PBS悬浮细胞，加入2倍体积的RNAstore保存。后续RNA的提取参照组织细胞的提取步骤。大肠杆菌保存在RNAstore中4℃条件下1个月仍很完整，产生不降解的RNA。 4.对于全血中白细胞的保存，需将白细胞从红细胞和血清中分离出来，并按组织培养细胞一样处理后，白细胞便能有效地保存在RNAstore中。不要将全血、血浆或血清中的RNA保存在RNAstore中，因为它们蛋白含量过高，与RNAstore混合后易形成不溶的沉淀。
RNAstore样本保存液
基本售价：288.00元
储存条件 室温（15-25℃）可稳定保存1年以上。低温贮存可能会产生沉淀或晶体析出，用之前需37℃完全溶解沉淀。 产品介绍 RNAstore是一种液态的、无毒的组织保存试剂。它能迅速渗入组织细胞中，通过抑制RNase活性从而保护非冷冻细胞RNA于原位，使其更适合于组织基因表达谱的分析。获得组织块后，迅速浸泡在RNAstore中保存，而不会引起RNA的降解，这样可以不必马上处理样本，也不必将样本冷冻在液氮之中。RNAstore可广泛应用于多种脊椎动物样本。包括脑、心、肾、脾、肝、肺和胸腺。 推荐不同组织样品的RNAstore使用量： 注意事项 1.RNAstore只能用于新鲜组织，在浸入RNAstore之前不能冷冻组织。 2.要求组织样本任何一边的最大厚度不能大于0.5 cm, 然后将组织块放入到10倍体积的RNAstore中保存。如果组织样品厚度过大，RNAstore渗入组织样本中的速度将会减慢造成RNA降解。所以如果厚度超过0.5 cm需简单切碎组织后再在RNAstore中贮存。 操作步骤 1.切割组织前估计加入RNAstore中的组织重量，并根据加入至少10倍体积组织的量确定RNAstore的使用量（举例：组织100 mg需1 ml RNAstore） 2.切割组织后放入RNAstore中。如果组织样本过大需剪切成任何一边的最大厚度不能大于0.5 cm。 注意：为完全有效的保护组织样本，该组织样本应完全浸没入RNAstore中并且组织样本的任何一边的最大厚度不应超过0.5 cm。 3.贮存于RNAstore中的样品组织4℃可至少保存1个月、室温1周和37℃ 1天。对于-20℃或-80℃长期保存，先将样本在4℃条件下过夜渗透，然后将组织从RNAstore中取出后放入-20℃或-80℃长期保存。样本可随后在室温下解冻及再冻存，其RNA的质和量都不会受影响。 注意：建议组织样品在RNAstore中低温保存 (4℃可至少保存1个月，-20℃或-80℃长期保存)，不建议37℃或室温保存。冻存于-20℃或-80℃的组织可反复冻融至少20次不影响RNA提取。保存于RNAstore中的组织如果需要长途运输，运输过程中需要确保组织完全浸入RNAstore中。 4.从RNAstore中取出样品就可以用RNA提取的试剂盒 (Trizol,RNAprepPure, RNAsimple)直接提取RNA。 其它应用 1.该试剂不适合于保存植物叶片，其表面的腊表皮使RNAstore很难完全渗入组织中。 2.对于组织培养细胞的操作，先沉淀细胞，用PBS洗一次，再用少量的PBS悬浮细胞，后加2倍体积的RNAstore保存。后续RNA的提取可以采用直接离心去除RNAstore后进行RNA提取，也可以不用去除RNAstore直接加入RNA提取裂解液进行直接提取。 离心法：因为RNAstore的介质浓度比典型的细胞培养介质的浓度高，因此用通常沉淀活细胞的离心力无法沉淀RNAstore中的细胞。离心沉淀细胞，去除RNAstore。（HeLa细胞大约需要3000×g，但其他细胞可能不能容忍这个速度，或者他们需要更大的离心力。） 直接提取法：通过向细胞混合物中加入10倍体积的RNA提取试剂来完成。 3.对于细菌的操作，先离心收集细菌，用PBS洗一次，再用少量的PBS悬浮细胞，加入2倍体积的RNAstore保存。后续RNA的提取参照组织细胞的提取步骤。大肠杆菌保存在RNAstore中4℃条件下1个月仍很完整，产生不降解的RNA。 4.对于全血中白细胞的保存，需将白细胞从红细胞和血清中分离出来，并按组织培养细胞一样处理后，白细胞便能有效地保存在RNAstore中。不要将全血、血浆或血清中的RNA保存在RNAstore中，因为它们蛋白含量过高，与RNAstore混合后易形成不溶的沉淀。
多糖多酚植物总RNA提取试剂盒
基本售价：1184.00元
储存条件 “裂解液RS” 和 “DNase I”，储存于-20℃；其他试剂室温（15-25℃）保存。 产品简介 本试剂盒所含“裂解液 RS”，采用我司独特的“SDS/抗氧化”的方式，可适用于广泛的植物组织，包含草本植物与本本植物的叶片、具高粘性的多糖多酚类及种子胚乳的植物样本；此提取方案，增加了额外步骤去除多酚和多糖，RNA 的提取总量更高。提取的总 RNA 纯度高，基本没有基因组、蛋白和其它杂质的污染，可用于 PCR、Blot、分子克隆等多种下游实验。 预防RNase污染，应注意以下几方面 1.经常更换新手套，因为皮肤带有细菌，可能导致RNase污染;使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。 2.RNA在裂解液RL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4h，塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10min，然后用水清洗再灭菌，即可去除RNase。 3.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。 使用前注意事项 1.裂解液 RS：使用前请于 50℃水浴将裂解液完全回溶，并添加 450ul 巯基乙醇；添加过巯基乙醇的裂解液 RS 继续保存于-20℃（建议将添加过巯基乙醇的裂解液 RS 于无酶管分装成小量，再保存于-20℃）。 2.溶液 BC：使用前请添加 30ml 无水乙醇。 3.漂洗液 PW：使用前请添加 64ml 无水乙醇。 4.为确保 RNA 的品质及产量，应尽量收取新鲜的动物组织进行 RNA 提取，或将组织立即以液氮冷冻，储存于-70℃，组织亦可保存在 RANstore 样本保存液（目录号：TR38）中。 5.凤梨和兰花推荐采用“裂解液 RL”（kit 产品目录 TR02） 操作步骤 1.匀浆处理：50-100 mg 植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入 450 μl 裂解液 RS（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），立即涡旋剧烈震荡混匀，并于 56℃孵育 5-10 分钟，每隔一段时间可翻转混合离心管。 注意：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的 RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。 2.加入 150ul 的溶液 GP 至裂解液中，混合均匀，于冰上孵育 5 分钟，12,000rpm(~13,400×g)离心 5 min。 注意：溶液会呈现雾状，为界面活性剂、蛋白质、多糖及二次代谢物的沉淀物。 3.移取上清液至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min。 4.小心吸取收集管中的上清至新的 RNase-Free 离心管中，吸头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。 5.向溶液中加入 1.5 倍体积的溶液 BC（已添加无水乙醇）,以震荡或移液器吸吐混合均匀。 注意：加入溶液 BC 后会形成丝状沉淀物，不影响 RNA 提取。 6.移取混合液（连同沉淀物一起）至吸附柱 CR1（吸附柱 CR1 放在收集管中），12,000 rpm(~13,400×g) 离心1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 注意：如果混合液体积大于吸附柱容量，可以分次完成。 7.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000rpm(~13,400×g)离心 1min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 8.DNase Ⅰ降解。 每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育 15 分钟。 注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。 9.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CR1 放回收集管中。 10.向吸附柱 CR1 中加入 600 μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 11.重复操作步骤 10。 12.12,000rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附柱中残余的乙醇。 注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。 13.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。 注意：洗脱液体积不应少于 30μl，体积过小影响回收效率。为了增加产量，可将步骤 13 得到的 RNA 溶液再加入吸附柱 CR1，放置2min，12,000rpm(~13,400×g)离心 1min，得到 RNA 溶液。RNA 溶液-70℃中保存。 附录：从高度黏稠性的富含多酚及多糖成分的样本中提取 RNA 樟科植物样本，在裂解后粘稠度高、移取困难，可直接于过滤柱中进行裂解，以减少移液器吸取的步骤。 1.将过滤柱 CS1 于冰上预冷，秤取不超过 30mg 的样本组织，于液氮中迅速研磨，并将研磨的样本直接转移至预冷的过滤柱 CS1 里（过滤柱 CS1 放在收集管中）。 2.加入 600ul 裂解液 RS(已添加巯基乙醇)至过滤柱，于 60℃金属浴孵育 10 分钟。 3.12,000 rpm(~13,400×g)离心 5 min，将收集管中的滤液移取至新的 1.5ml 离心管，请避免吸取到沉淀物。 注意：有些样本可能会堵塞过滤柱，可再次离心，或将管柱中剩余的裂解液移至新的过滤柱 CS1 再次离心。 4.加入 1/3 倍体积的溶液 GP 至滤液中，混合均匀，于冰上孵育 5 分钟，12,000 rpm(~13,400×g)离心离心 5min，将上清液小心转移至新的 1.5ml 离心管，不要触碰或移取固体沉淀。转至上面“操作步骤 5”。
植物总RNA提取试剂盒Ⅱ
基本售价：1024.00元
储存条件 DNase I（DNase I 冻干粉溶解于专用保存液），储存于-20℃；其他试剂室温（15-25℃）保存。 产品简介 由于植物的细胞结构和代谢活性在物种、组织类型和发育阶段之间可能存在显著差异，因此没有一种通用的裂解溶液或独特的方法可以同样适用于所有植物样品。 GF432 试剂盒所含“裂解液 RL”，是依据硫氰酸胍的原理，可用于许多植物组织，此裂解液操作简单快速，提取量稳定，可同时处理大量不同样品。本试剂盒提取的总 RNA 纯度高，基本没有基因组、蛋白和其它杂质的污染，可用于 PCR、Blot、分子克隆等多种下游实验。对于富含淀粉、多酚和次级代谢物（如一些木本植物、胚乳、块茎以及丝状真菌的菌丝体）的植物组织，因为“裂解液 RL”加入后，会使样本变粘稠甚至凝固，建议选用另一裂解方案（产品目录号：TR02 或者GF441）。 预防RNase污染，应注意以下几方面 1.经常更换新手套，因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。 2.使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。 3.RNA在裂解液RL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10 min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。 4.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。 使用前注意事项 1.裂解液 RL：使用前请添加 300ul 巯基乙醇，添加过巯基乙醇的裂解液 4℃保存。 2.漂洗液 PW：使用前请添加 64ml 无水乙醇。 3.为确保 RNA 的品质及产量，应尽量收取新鲜的动物组织进行 RNA 提取，或将组织立即以液氮冷冻，储存于-70℃，组织亦可保存在 RANstore 样本保存液（目录号：TR38）中。 操作步骤 本试剂盒不适用于富含淀粉、酚类和次级代谢物的植物组织（例如一些木本植物，胚乳或丝状真菌的菌丝体），因为“裂解液 RL”在加入至样本粉末后，会变固态或非常粘稠,此类植物组织请使用另一裂解方案（产品目录号：TR02）。 1.匀浆处理 50-100 mg 植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入 450 μl RL（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），涡旋剧烈震荡混匀，并于 56℃孵育 3 分钟。 注意 1：在 56℃孵育 1-3 min 将有助于植物组织裂解，但是对于某些富含淀粉的样品，请不要加热处理，防止因淀粉引起的样品膨胀现象。 注意 2：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的 RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。 2.将所有溶液转移至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2-5 min，小心吸取收集管中的上清至 RNase-Free 的离心管中，吸头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。 注意：由于裂解液较粘稠，所以将溶液转移至过滤柱时，可以剪去部分吸头末端。 3.缓慢加入 0.5 倍上清体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀），转至“RNA 提取”步骤。 4.将所得“裂解液/乙醇混合液”（含沉淀），移取至吸附柱 CR1 中（吸附柱 CR1 放入收集管中），12,000 rpm(~13,400×g )离心 30-60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 注意：将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR1 时，如果体积大于吸附柱容量，可以分次完成。 5.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000 rpm (~13,400×g )离心离心 1 min，丢弃滤液,将吸附柱CR1 放回收集管中。 6.DNase Ⅰ降解。 每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。 注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。 7.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 8.向吸附柱 CR1 中加入 600μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 9.重复操作步骤 8。 10.12,000 rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。 注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。 11.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。 注意：洗脱缓冲液体积不应少于 30 μl，体积过小影响回收效率；RNA 溶液请于-70℃保存。
血液总RNA提取试剂盒
基本售价：1104.00元
储存条件DNase I（DNase I 冻干粉溶解于专用保存液），储存于-20℃；其他试剂室温（15-25℃）保存。产品简介本试剂盒可从新鲜全血中有效提取总RNA，可处理不同物种以及多种抗凝剂全血样品。吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料，专一吸附RNA，配合我司高效的缓冲液体系，可有效去除杂质蛋白。提取的RNA可用于PCR、芯片分析、Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆等多种下游实验。本试剂盒不适用于冻存的全血。预防RNase污染，应注意以下几方面1.经常更换新手套，因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。2.使用无RNase的塑料制品、玻璃器皿和枪头，避免交叉污染。3.RNA 在裂解液 RLH 中时不会被 RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含 RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在 150℃烘烤 4 h，塑料器皿可在 0.5 M NaOH 中浸泡 10 min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除 RNase。4.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。使用前注意事项1.裂解液 RL：使用前请添加 300ul 巯基乙醇，添加过巯基乙醇的裂解液 4℃保存。2.漂洗液 PW：使用前请添加 64ml 无水乙醇。3.人类的血液或体液可能有潜在的感染性，所以如果对人类的全血进行处理，请注意做好防护措施。4.本试剂盒最多能处理1.5 ml健康的人类全血(健康人的全血中白细胞含量为：最多4000- 7000个白细胞/μl血液)，如果血液中白细胞的含量较高，可按比例减少血液的用量，本试剂盒最多可处理的白细胞数量为：1×107 。5.在白细胞裂解后，该说明书中的所有步骤需在室温(15-25℃)进行，操作速度越快越好。6.细胞溶解物(在裂解液RLH中)可以存放在-70℃，待使用时，将其置于37℃孵育10 min，以保证所有的盐都溶解，然后进行操作步骤第7步。7.本试剂盒不适用于冻存的全血。操作步骤1.红细胞裂解液的稀释：根据处理血液样品的体积选取适当体积的 10×红细胞裂解液(例如待处理的血液样品体积为 200 μl，则取 140 μl 10×红细胞裂解液)，用无酶双蒸水稀释成 1×红细胞裂解液。2.向 1 体积人类全血中加 5 倍体积 1×RBC 裂解液 (需自备合适的干净管子)。注意：为获得最佳的混匀效果，血液和 1×红细胞裂解液的混合液体积不应超过管子体积的 3/4。如果血液中的白细胞含量较高，可按比例减小血液的使用体积，第 5 步中的 1×红细胞裂解液的使用体积也要进行相应调整。3.冰上孵育 10-15 min，在孵育过程中涡旋振荡混匀 2-3 次。注意：在孵育过程中溶液将变成半透明状态，表明红细胞裂解。如果必要的话，孵育时间可延长至 20 min。4.4℃ 2,100 rpm (~400×g) 离心 10 min，将上清完全去除。注意：离心后白细胞可能会形成小球，确保完全去除上清，痕量红细胞的存在，会使白细胞小球呈现红色，而该现象会在随后的漂洗步骤中消失。5.向白细胞沉淀中加入 1×红细胞裂解液(加入 1×红细胞裂解液的体积是第 1 步中全血用量的 2 倍)，重悬细胞。6.4℃，2,100 rpm (~400×g) 离心 10 min，将上清完全去除。注意：如果上清去除不完全将会影响裂解及随后的 RNA 与膜的结合，导致最后 RNA 产率降低。7.向白细胞沉淀中加入裂解液 RLH (使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇)，具体加量按照下表进行，涡旋或使用移液器混匀。注：如果血液不是健康人的全血，需要根据血液中白细胞的数量来确定所需裂解液 RLH 的体积，此时细胞应完全裂解，块状细胞沉淀消失8.将溶液转移至过滤柱 CS1 中 (过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm (~13,400×g) 离心 2 min，弃去过滤柱 CS1，收集滤液。 注意：为避免气溶胶的形成，请将移液器调整到≥750µl 以保证一次性将所有溶液转移到过滤柱上，如果细胞太多，将会出现裂解液粘稠的现象，造成难以吸取的情况。 9.向滤液中加入 1 倍体积 70%乙醇(通常为 350 μl 或 600 μl)，混匀(此时可能会出现沉淀)，得到的溶液和沉淀一起转入吸附柱 CR2 中(吸附柱 CR2 放入收集管中)，12,000 rpm (~13,400×g) 离心 30-60sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR2 放回收集管中。 注意：配制 70%乙醇时请使用 RNase-Free ddH2O，如果滤液体积有所损失，请相应减少 70%乙醇用量。将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR2 时，体积大于吸附柱容量，可以分两次完成。 10.将所得“裂解液/乙醇混合液”（含沉淀），移取至吸附柱 CR2 中（吸附柱 CR2 放入收集管中），12,000 rpm(~13,400×g )离心 30-60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR2 放回收集管中。 注意：将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR2 时，如果体积大于吸附柱容量，可以分次完成。 11.向吸附柱 CR2 加入 500ul 溶液 RW，12,000 rpm (~13,400×g )离心离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR2放回收集管中。 12.DNase Ⅰ降解。 每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。 注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。 13.向吸附柱 CR2 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR2 放回收集管中。 14.向吸附柱 CR2 中加入 600μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR2 放回收集管中。 15.重复操作步骤 14。 16.12,000 rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR2 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。 注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR2 在室温放置片刻，以充分晾干。 如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。 17.将吸附柱 CR2 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。 注意：洗脱缓冲液体积不应少于 30 μl，体积过小影响回收效率；RNA 溶液请于-70℃保存。
动物组织总RNA提取试剂盒
基本售价：1104.00元
储存条件 “DNase I（DNase I 冻干粉溶解于专用保存液）”，储存于-20℃； 其他试剂室温（15-25℃）保存。 产品简介 动物组织总RNA提取试剂盒提供了快速简单且有效的方法，可从各种动物组织中提取总RNA。本试剂盒采用离心管柱的方式，配合使用我司独特的硫氰酸胍裂解液，使组织裂解及均质化，并加入乙醇使RNA选择性的与管柱膜结合，于操作过程中加入DNase Ⅰ以去除残留的基因组DNA，经过多次“洗涤及离心”的步骤去除污染杂质，再以无核酸酶水回收结合在管柱膜上的RNA。若RNA小于200nt,如5sRNA、tRNA和microRNA,无法在此系统中被有效地回收。提取的总RNA纯度高，基本没有DNA和蛋白质污染，可用于PCR、芯片分析、Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆等多种下游实验。 预防RNase污染，应注意以下几方面 1.经常更换新手套，因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。 2.使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。 3.RNA在裂解液RL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10 min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。 4.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。 使用前注意事项 1.裂解液 RL：使用前请添加 300ul 巯基乙醇，添加过巯基乙醇的裂解液 4℃保存。 2.漂洗液 PW：使用前请添加 64ml 无水乙醇。 3.为确保 RNA 的品质及产量，应尽量收取新鲜的动物组织进行 RNA 提取，或将组织立即以液氮冷冻，储存于-70℃，组织亦可保存在 RANstore 样本保存液（目录号：TR38）中。样本保存在 RNAstore 试剂中，可于37℃存放 1 天、4℃存放 1 个月、-20℃永久保存，所提取的 RNA 品质与储存在液氮中相同。 操作步骤 1.匀浆处理： 每 10-20 mg 组织加 300 μl 裂解液 RL（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），用研磨杵将组织彻底研磨（如组织较难彻底研磨，可选用电动或玻璃匀浆器）；随后向匀浆液 中加入 590 μl RNase-Free ddH2O 和10 μl Proteinase K，混匀后 56℃处理 10-20 min。 注意：组织量一定不要超过 20 mg，否则将导致 RNA 得率和质量下降。 2.将裂解混合液转移至过滤柱 CS1(过滤柱 CS1 放入收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2min，收集滤液。 3.向滤液加入 0.5 倍上清体积的无水乙醇，均匀（此时可能会出现沉淀）。 4.将所得“裂解液/乙醇混合液”（含沉淀），移取至吸附柱 CR1 中（吸附柱 CR1 放入收集管中），12,000 rpm(~13,400×g )离心 30-60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 注意：将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR1 时，如果体积大于吸附柱容量，可以分次完成。 5.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000 rpm (~13,400×g )离心离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱CR1 放回收集管中。 6.DNase Ⅰ降解。 每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。 注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。 7.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 8.向吸附柱 CR1 中加入 600μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 9.重复操作步骤 8。 10.12,000 rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。 注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。 11.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。 注意：洗脱缓冲液体积不应少于 30 μl，体积过小影响回收效率；RNA 溶液请于-70℃保存。
培养细胞/细菌总RNA提取试剂盒
基本售价：1024.00元
选配的试剂溶菌酶（50mg/ml）目录号：GF0203-01，客户自备，提取细菌总 RNA 时需配备储存条件DNase I（为DNase I 冻干粉溶解于专用保存液），储存于-20℃；其他试剂室温（15-25℃）保存。产品简介培养细胞/细菌总RNA提取试剂盒，提供了快速简单且有效的方法，可从培养细胞和细菌中提取总RNA。本试剂盒采用离心管柱的方式，配合使用我司独特的硫氰酸胍裂解液，使细胞或细菌裂解及均质化，并加入乙醇使RNA选择性的与管柱膜结合，于操作过程中加入DNase Ⅰ以去除残留的基因组DNA，经过多次“洗涤及离心”的步骤去除污染杂质，再以无核酸酶水回收结合在管柱膜上的RNA。若RNA小于200nt,如5sRNA、tRNA和microRNA,无法在此系统中被有效地回收。提取的总RNA纯度高，基本没有DNA和蛋白质污染，可用于PCR、芯片分析、Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆等多种下游实验。预防RNase污染，应注意以下几方面1.经常更换新手套，因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。2.使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。3.RNA在裂解液RL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10 min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。4.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。使用前注意事项1.裂解液 RL：使用前请添加 300ul 巯基乙醇，添加过巯基乙醇的裂解液 4℃保存。2.漂洗液 PW：使用前请添加 64ml 无水乙醇。3.为确保 RNA 的品质及产量，应尽量收取新鲜的动物组织进行 RNA 提取，或将组织立即以液氮冷冻，储存于-70℃，组织亦可保存在 RANstore 样本保存液（目录号：TR38）中。样本保存在 RNAstore 试剂中，可于37℃存放 1 天、4℃存放 1 个月、-20℃永久保存，所提取的 RNA 品质与储存在液氮中相同。操作步骤一、从培养细胞中提取总 RNA1.收集细胞a.悬浮细胞的收集（收集细胞数量请不要超过 1×107）：估计细胞数量，300×g 离心 5 min，将细胞收集到离心管中，仔细吸除所有培养基上清。b.单层贴壁细胞的收集（收集细胞数量请不要超过 1×107）：可直接在培养容器中裂解（容器直径不超过10 cm），或者使用胰蛋白酶处理后离心收集细胞沉淀。（在摇瓶中培养的单层贴壁细胞通常采用胰蛋白酶处理的方法。）直接裂解法：确定细胞数量，彻底吸除细胞培养基上清，立即进行第 2 步裂解步骤。胰蛋白酶处理法：确定细胞数量，吸除培养基，用 PBS 洗涤细胞，吸除 PBS，向细胞中加入含有0.10-0.25%胰蛋白酶的 PBS 处理细胞，当细胞脱离容器壁时，加入含有血清的培养基失活胰蛋白酶，将细胞溶液转移至 RNase-Free 的离心管中，300×g 离心 5 min，收集细胞沉淀，仔细吸除所有上清。注意：收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净，否则会导致裂解不完全，影响 RNA 与吸附柱的结合，造成 RNA 的产量降低;请勿使用过多的样本量，避免管柱杜塞而造成 RNA 的产量降低。2.裂解处理a.对于离心得到的细胞沉淀：轻弹离心管底部，使细胞沉淀松散，加入适量裂解液 RL（详见下表，使用3.将所有溶液转移至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2min，收集滤液。4.向滤液加入等体积 70%乙醇至裂解液中，混匀（此时可能会出现沉淀）。5.将“裂解液/乙醇混合液”（含沉淀）移取至吸附柱 CR1 中（吸附柱 CR1 放入收集管中），12,000 rpm (~13,400×g )离心 30-60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。注意：将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR1 时，如果体积大于吸附柱容量，可以分次完成。6.向吸附柱 CR1 加入 500ul 溶液 RW，12,000 rpm (~13,400×g )离心离心 1 min，丢弃滤液。7.DNase Ⅰ降解。每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。8.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。9.向吸附柱 CR1 中加入 600μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。10.重复操作步骤 9。11.12,000 rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。12.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。注意：洗脱缓冲液体积不应少于 30 μl，体积过小影响回收效率；RNA 溶液请于-70℃保存。二、从细菌中提取总 RNA1.4℃12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min 收集菌体（收集菌体的最大量不超过 1×109），仔细去除所有培养基上清，以后的所有离心步骤均在室温（20-25℃）进行。注意：如果培养基上清去除不完全，将对第二步中的细胞壁消化过程产生抑制。2.用含有溶菌酶的 100μl TE 缓冲液（客户自己配制，配制方法见下表）彻底重悬菌体，孵育时间见下表。3.加入 350μl 裂解液 RL（使用前请先检查是否已加入β-巯基乙醇），涡旋振荡混匀。 4.将裂解混合液转移至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放入收集管)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2min，收集滤液。 5.向滤液中加入 250μl 无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀）。 6.将“裂解液/乙醇混合液”（含沉淀）移取至吸附柱 CR1 中（吸附柱 CR1 放入收集管中），12,000 rpm (~13,400×g )离心 30-60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 注意：将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR1 时，如果体积大于吸附柱容量，可以分次完成。 7.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000 rpm (~13,400×g )离心离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱CR1 放回收集管中。 8.DNase Ⅰ降解。 每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。 注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。 9.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 10.向吸附柱 CR1 中加入 600μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 11.重复操作步骤 10。 12.12,000 rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。 注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。 13.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。 注意：洗脱缓冲液体积不应少于 30 μl，体积过小影响回收效率；RNA 溶液请于-70℃保存。
植物总RNA提取试剂盒
基本售价：1184.00元
储存条件 “裂解液RS” 和 “DNase I（DNase I 冻干粉溶解于专用保存液）”，储存于-20℃。其他试剂室温（15-25℃）保存。 产品简介 由于植物的细胞结构和代谢活性在物种、组织类型和发育阶段之间可能存在显著差异，因此没有一种通用的裂解溶液或独特的方法可以同样适用于所有植物样品。本试剂盒包含两种可供选择的裂解缓冲液系统：裂解缓冲液 RL（含硫氰酸胍）和裂解缓冲液 RS(含 SDS/抗氧化剂)，适用于各种植物和真菌样品。“裂解液RL”含硫氰酸胍，此提取方案适用于大部分的植物组织，操作简单快速，但它不适用于富含淀粉、多酚类及多糖类的样本，因为裂解液RL加入上述样本后，会使样本变非常粘稠甚至凝固。 “裂解液RS”，采用我司独特的“SDS/抗氧化”的方式，可适用于广泛的植物组织，包含草本植物与本本植物的叶片、具高粘性的多糖多酚类及种子胚乳的植物样本，此提取方案，增加了额外步骤去除多酚和多糖，RNA的提取总量更高。 本试剂盒提取的总 RNA 纯度高，基本没有基因组、蛋白和其它杂质的污染，可用于 PCR、Blot、分子克隆等多种下游实验。 预防RNase污染，应注意以下几方面 1.经常更换新手套，因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。 2.使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。 3.RNA在裂解液RL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10 min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。 4.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。 使用前注意事项 1.裂解液 RL：使用前请添加 300ul 巯基乙醇，添加过巯基乙醇的裂解液 4℃保存。 2.裂解液 RS：使用前请于 50℃水浴将裂解液完全回溶，并添加 450ul 巯基乙醇；添加过巯基乙醇的裂解液RS 继续保存于-20℃（建议将添加过巯基乙醇的裂解液 RS 于无酶管分装成小量，再保存于-20℃）。 3.溶液 BC：使用前请添加 30ml 无水乙醇。 4.漂洗液 PW：使用前请向添加 64ml 无水乙醇。 5.为确保 RNA 的品质及产量，应尽量收取新鲜的动物组织进行 RNA 提取，或将组织立即以液氮冷冻，储存于-70℃，组织亦可保存在 RANstore 样本保存液（目录号：TR38）中。 6.凤梨和兰花推荐采用“裂解液 RL”。 操作步骤 一、裂解液 RL 操作步骤： 1.匀浆处理 50-100 mg 植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入 450ul RL（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），涡旋剧烈震荡混匀，并于 56℃孵育 3 分钟。 注意 1：在 56℃孵育 1-3 min 将有助于植物组织裂解，但是对于某些富含淀粉的样品，请不要加热处理，防止因淀粉引起的样品膨胀现象。 注意 2：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的 RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。 2.将所有溶液转移至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2-5 min，小心吸取收集管中的上清至 RNase-Free 的离心管中，吸头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。 注意：由于裂解液较粘稠，所以将溶液转移至过滤柱时，可以剪去部分吸头末端。 3.缓慢加入 0.5 倍上清体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀），转至“RNA 提取”步骤。 4.将所得“裂解液/乙醇混合液”（含沉淀），移取至吸附柱 CR1 中（吸附柱 CR1 放入收集管中），12,000 rpm(~13,400×g )离心 30-60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 注意：将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR1 时，如果体积大于吸附柱容量，可以分次完成。 5.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000 rpm (~13,400×g )离心离心 1 min，丢弃滤液,将吸附柱CR1 放回收集管中。 6.DNase Ⅰ降解。 每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。 注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。 7.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 8.向吸附柱 CR1 中加入 600μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 9.重复操作步骤 8。 10.12,000 rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余 的乙醇。 注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。 11.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。 注意：洗脱缓冲液体积不应少于 30 μl，体积过小影响回收效率；RNA 溶液请于-70℃保存。 二、裂解液 RS 操作步骤 1.匀浆处理：50-100 mg 植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入 450 μl 裂解液 RS（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），立即涡旋剧烈震荡混匀，并于 56℃孵育 5-10 分钟，每隔一段时间可翻转混合离心管。 注意：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的 RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。 2.加入 150ul 的溶液 GP 至裂解液中，混合均匀，于冰上孵育 5 分钟，12,000rpm(~13,400×g)离心 5 min。 注意：溶液会呈现雾状，为界面活性剂、蛋白质、多糖及二次代谢物的沉淀物。 3.移取上清液至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min。 4.小心吸取收集管中的上清至新的 RNase-Free 离心管中，吸头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。 5.向溶液中加入 1.5 倍体积的溶液 BC（已添加无水乙醇）,以震荡或移液器吸吐混合均匀。 注意：加入溶液 BC 后会形成丝状沉淀物，不影响 RNA 提取。 6.移取混合液（连同沉淀物一起）至吸附柱 CR1（吸附柱 CR1 放在收集管中），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 注意：如果混合液体积大于吸附柱容量，可以分次完成。 7.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000rpm(~13,400×g)离心 1min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 8.DNase Ⅰ降解。 每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 2ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 82 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。 注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。 9.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 10.向吸附柱 CR1 中加入 600 μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。 11.重复操作步骤 10。 12.12,000rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附柱中残余的乙醇。 注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。 如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。 13.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室 温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。 注意：洗脱液体积不应少于 30μl，体积过小影响回收效率。为了增加产量，可将步骤 13 得到的 RNA 溶液再加入吸附柱 CR1，放置 2min，12,000rpm(~13,400×g)离心 1min，得到 RNA 溶液。RNA 溶液-70℃中保存。 附录：从高度黏稠性的富含多酚及多糖成分的样本中提取 RNA 樟科植物样本，在裂解后粘稠度高、移取困难，可直接于过滤柱中进行裂解，以减少移液器吸取的步骤。 1.将过滤柱 CS1 于冰上预冷，秤取不超过 30mg 的样本组织，于液氮中迅速研磨，并将研磨的样本直接转移至预冷的过滤柱 CS1 里（过滤柱 CS1 放在收集管中）。 2.加入 600ul 裂解液 RS(已添加巯基乙醇)至过滤柱，于 60℃金属浴孵育 10 分钟。 3.12,000 rpm(~13,400×g)离心 5 min，将收集管中的滤液移取至新的 1.5ml 离心管，请避免吸取到沉淀物。 注意：有些样本可能会堵塞过滤柱，可再次离心，或将管柱中剩余的裂解液移至新的过滤柱 CS1 再次离 心。 4.加入 1/3 倍体积的溶液 GP 至滤液中，混合均匀，于冰上孵育 5 分钟，12,000 rpm(~13,400×g)离心离心 5 min，将上清液小心转移至新的 1.5ml 离心管，不要触碰或移取固体沉淀。转至上面“操作步骤5”。
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