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产品细节图:
储存条件
“裂解液RS” 和 “DNase I”，储存于-20℃；其他试剂室温（15-25℃）保存。
产品简介
本试剂盒所含“裂解液 RS”，采用我司独特的“SDS/抗氧化”的方式，可适用于广泛的植物组织，包含草本植物与本本植物的叶片、具高粘性的多糖多酚类及种子胚乳的植物样本；此提取方案，增加了额外步骤去除多酚和多糖，RNA 的提取总量更高。提取的总 RNA 纯度高，基本没有基因组、蛋白和其它杂质的污染，可用于 PCR、Blot、分子克隆等多种下游实验。
预防RNase污染，应注意以下几方面
1.经常更换新手套，因为皮肤带有细菌，可能导致RNase污染;使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
2.RNA在裂解液RL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4h，塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10min，然后用水清洗再灭菌，即可去除RNase。
3.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。
使用前注意事项
1.裂解液 RS：使用前请于 50℃水浴将裂解液完全回溶，并添加 450ul 巯基乙醇；添加过巯基乙醇的裂解液 RS 继续保存于-20℃（建议将添加过巯基乙醇的裂解液 RS 于无酶管分装成小量，再保存于-20℃）。
2.溶液 BC：使用前请添加 30ml 无水乙醇。
3.漂洗液 PW：使用前请添加 64ml 无水乙醇。
4.为确保 RNA 的品质及产量，应尽量收取新鲜的动物组织进行 RNA 提取，或将组织立即以液氮冷冻，储存于-70℃，组织亦可保存在 RANstore 样本保存液（目录号：TR38）中。
5.凤梨和兰花推荐采用“裂解液 RL”（kit 产品目录 TR02）
操作步骤
1.匀浆处理：50-100 mg 植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入 450 μl 裂解液 RS（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），立即涡旋剧烈震荡混匀，并于 56℃孵育 5-10 分钟，每隔一段时间可翻转混合离心管。
注意：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的 RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。
2.加入 150ul 的溶液 GP 至裂解液中，混合均匀，于冰上孵育 5 分钟，12,000rpm(~13,400×g)离心 5 min。
注意：溶液会呈现雾状，为界面活性剂、蛋白质、多糖及二次代谢物的沉淀物。
3.移取上清液至过滤柱 CS1 上(过滤柱 CS1 放在收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min。
4.小心吸取收集管中的上清至新的 RNase-Free 离心管中，吸头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
5.向溶液中加入 1.5 倍体积的溶液 BC（已添加无水乙醇）,以震荡或移液器吸吐混合均匀。
注意：加入溶液 BC 后会形成丝状沉淀物，不影响 RNA 提取。
6.移取混合液（连同沉淀物一起）至吸附柱 CR1（吸附柱 CR1 放在收集管中），12,000 rpm(~13,400×g) 离心1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
注意：如果混合液体积大于吸附柱容量，可以分次完成。
7.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000rpm(~13,400×g)离心 1min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
8.DNase Ⅰ降解。
每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育 15 分钟。
注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。
9.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CR1 放回收集管中。
10.向吸附柱 CR1 中加入 600 μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
11.重复操作步骤 10。
12.12,000rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附柱中残余的乙醇。
注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。
13.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。
注意：洗脱液体积不应少于 30μl，体积过小影响回收效率。为了增加产量，可将步骤 13 得到的 RNA 溶液再加入吸附柱 CR1，放置2min，12,000rpm(~13,400×g)离心 1min，得到 RNA 溶液。RNA 溶液-70℃中保存。
附录：从高度黏稠性的富含多酚及多糖成分的样本中提取 RNA
樟科植物样本，在裂解后粘稠度高、移取困难，可直接于过滤柱中进行裂解，以减少移液器吸取的步骤。
1.将过滤柱 CS1 于冰上预冷，秤取不超过 30mg 的样本组织，于液氮中迅速研磨，并将研磨的样本直接转移至预冷的过滤柱 CS1 里（过滤柱 CS1 放在收集管中）。
2.加入 600ul 裂解液 RS(已添加巯基乙醇)至过滤柱，于 60℃金属浴孵育 10 分钟。
3.12,000 rpm(~13,400×g)离心 5 min，将收集管中的滤液移取至新的 1.5ml 离心管，请避免吸取到沉淀物。
注意：有些样本可能会堵塞过滤柱，可再次离心，或将管柱中剩余的裂解液移至新的过滤柱 CS1 再次离心。
4.加入 1/3 倍体积的溶液 GP 至滤液中，混合均匀，于冰上孵育 5 分钟，12,000 rpm(~13,400×g)离心离心 5min，将上清液小心转移至新的 1.5ml 离心管，不要触碰或移取固体沉淀。转至上面“操作步骤 5”。
暂时没有说明书
1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
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