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植物基因组DNA提取试剂盒

产品细节图:

  • 植物基因组DNA提取试剂盒

植物基因组DNA提取试剂盒

品牌:genefist | 货号:GF368
  • 所属大类 : 试剂
  • 所属小类 : 常用生化试剂
  • 品牌 : genefist
  • 规格 : 50次
  • 原价 : ¥544.00
  • 促销价 : ¥544.00
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    储存条件
    该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存18个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。

    产品简介及特点
    本试剂盒采用特异性结合 DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲系统,能从多种植物组织中分离纯化高质量基因组 DNA,独特的沉淀溶液可以沉淀去除多糖多酚植物样本中的蛋白质、多糖以及酚类等杂质。提取的基因组 DNA 纯度高,质量稳定可靠。
    使用本试剂盒纯化的基因组 DNA 适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交、芯片检测、高通量测序等实验。
    简便快捷:1 h内即可获得高纯度的基因组DNA。
    适用广泛:适用于多种植物组织,包括多糖多酚植物。
    安全无毒:无需酚/氯仿等有毒有机试剂。
    超纯高效:高效获得高纯度的DNA,可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。

    注意事项
    1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量也下降。
    2.若溶液 GS1 或溶液 BC 中有沉淀,可在 37℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。

    事前准备:
    1.溶液 GS2 制备:加入 2ml 无菌水到 0.46g 溶液 GS2 浓缩液粉末中,旋涡 1 分钟,50℃孵育至完全溶解,得溶液 GS2。
    制备好的溶液 GS2 长期保存需要储存在 4℃。
    2.向溶液 BC 中加入 30ml 无水乙醇,混匀,室温保存。
    3.向漂洗液 PW 中加入 64ml 无水乙醇,混匀,室温保存。
    4.在研磨组织之前解冻溶液 GS2;将水浴或金属浴预热至 65℃。

    操作步骤
    使用前请先在溶液BC和漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
    1.取植物新鲜组织约 100 mg 或干重组织约 30 mg,加入液氮充分碾磨。
    注意:使用超过推荐量的样品可能堵塞吸附柱,降低回收率和质量。

    2.立即将研磨好的粉末迅速转移至 1.5 ml 微量离心管中,并添加 360μ 溶液 GS1、40μl 制备好的溶液 GS2和 25μl RNaseA 溶液,迅速涡旋混匀。
    注意:不要预先混合这些溶液。
    注意:为了获得最佳产量,彻底研磨组织,不充分研磨的组织中的 DNA 可能无法被试剂接触到;为了得到完整的 DNA,新鲜组织应在液氮中迅速冷冻并存储在-80℃中。

    3.将离心管放在 65℃水浴 20 min,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。

    4.加入 130 μl 溶液 GP,涡旋振荡 1 min,混匀后将离心管置于冰上静置 5min,然后 12,000 rpm (~13,400×g )离心 5 min。

    5.转移上清至过滤柱 CS1 中(过滤柱 CS1 放在收集管中),12,000 rpm (~13,400×g)离心 1 min ,转移滤液至新的离心管中。

    6.向滤液中加入 1.5 倍体积的“溶液 BC(已添加无水乙醇)”,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,但不影响后续 DNA 的纯化。
    例如:对于 500ul 滤液,加入 750ul 溶液 BC(已添加无水乙醇)

    7.将上一步所得溶液和絮状沉淀“分次”转移到吸附柱 CG1 中(吸附柱 CG1 放在收集管中),12,000 rpm(~13,400×g ) 离心 1 min,倒掉废液,将吸附柱 CG1 放入收集管中。

    8.向吸附柱 CG1 中加入 700μl 漂洗液 PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13,400×g)离心 1 min,丢弃废液,将吸附柱 CG1 放入收集管中。
    9.重复操作步骤 8。

    10.将吸附柱 CG1 放回收集管中,12,000 rpm (~13,400×g)离心 2 min,弃收集管,然后将吸附柱 CG1 转移到新的离心管中,室温晾干 5-10 min。
    注意:乙醇残留会抑制后续的酶反应,所以晾干时要确保乙醇挥发干净,但也不要干燥太长时间,以免难以洗脱 DNA。

    11.在吸附柱 CG1 中加入 50-200μl 洗脱缓冲液 TB,室温放置 3-5 min,12,000rpm(~13,400×g)离心 2 min,将溶液收集到离心管中。
    注意:洗脱缓冲液体积不应少于 50μl,体积过小影响回收效率。洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。若用 ddH2O 做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内,pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率;且 DNA 产物应保存在-20℃,以防 DNA 降解。
    为增加基因组 DNA 的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱 CG1 中,室温放置 2 min,12,000 rpm (~13,400×g )离心 2 min。
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