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产品细节图:
储存条件
“DNase I（DNase I 冻干粉溶解于专用保存液）”，储存于-20℃；
其他试剂室温（15-25℃）保存。
产品简介
动物组织总RNA提取试剂盒提供了快速简单且有效的方法，可从各种动物组织中提取总RNA。本试剂盒采用离心管柱的方式，配合使用我司独特的硫氰酸胍裂解液，使组织裂解及均质化，并加入乙醇使RNA选择性的与管柱膜结合，于操作过程中加入DNase Ⅰ以去除残留的基因组DNA，经过多次“洗涤及离心”的步骤去除污染杂质，再以无核酸酶水回收结合在管柱膜上的RNA。若RNA小于200nt,如5sRNA、tRNA和microRNA,无法在此系统中被有效地回收。提取的总RNA纯度高，基本没有DNA和蛋白质污染，可用于PCR、芯片分析、Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆等多种下游实验。
预防RNase污染，应注意以下几方面
1.经常更换新手套，因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。
2.使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3.RNA在裂解液RL中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10 min，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4.配制溶液应使用无RNase的水（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)，高压灭菌）。
使用前注意事项
1.裂解液 RL：使用前请添加 300ul 巯基乙醇，添加过巯基乙醇的裂解液 4℃保存。
2.漂洗液 PW：使用前请添加 64ml 无水乙醇。
3.为确保 RNA 的品质及产量，应尽量收取新鲜的动物组织进行 RNA 提取，或将组织立即以液氮冷冻，储存于-70℃，组织亦可保存在 RANstore 样本保存液（目录号：TR38）中。样本保存在 RNAstore 试剂中，可于37℃存放 1 天、4℃存放 1 个月、-20℃永久保存，所提取的 RNA 品质与储存在液氮中相同。
操作步骤
1.匀浆处理：
每 10-20 mg 组织加 300 μl 裂解液 RL（使用前请先检查是否已加入 β-巯基乙醇），用研磨杵将组织彻底研磨（如组织较难彻底研磨，可选用电动或玻璃匀浆器）；随后向匀浆液 中加入 590 μl RNase-Free ddH2O 和10 μl Proteinase K，混匀后 56℃处理 10-20 min。
注意：组织量一定不要超过 20 mg，否则将导致 RNA 得率和质量下降。
2.将裂解混合液转移至过滤柱 CS1(过滤柱 CS1 放入收集管中)，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2min，收集滤液。
3.向滤液加入 0.5 倍上清体积的无水乙醇，均匀（此时可能会出现沉淀）。
4.将所得“裂解液/乙醇混合液”（含沉淀），移取至吸附柱 CR1 中（吸附柱 CR1 放入收集管中），12,000 rpm(~13,400×g )离心 30-60 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
注意：将溶液和沉淀转移至吸附柱 CR1 时，如果体积大于吸附柱容量，可以分次完成。
5.向吸附柱 CR1 中加入 500ul 溶液 RW，12,000 rpm (~13,400×g )离心离心 1 min，丢弃滤液，将吸附柱CR1 放回收集管中。
6.DNase Ⅰ降解。
每一纯化反应，请将 80 ul DNase 消化液与 10ul DNaseⅠ预先混合在新的离心管(轻弹或翻转离心管以混合均匀，请勿震荡)，将 90 ul “DNaseⅠ工作液”加入至吸附柱的膜中心，于室温（25~28℃）孵育15 分钟。
注意：如同时操作多组样本，请使用前现配新鲜的 DNaseⅠ工作液,请勿预先配制保存 DNaseⅠ工作液。
7.向吸附柱 CR1 中加入 500μl 溶液 RW，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
8.向吸附柱 CR1 中加入 600μl 漂洗液 PW（使用前请先检查是否已加入乙醇），12,000 rpm(~13,400×g) 离心 1 min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱 CR1 放回收集管中。
9.重复操作步骤 8。
10.12,000 rpm(~13,400×g)离心 3 min，将吸附柱 CR1 置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。
注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，离心后将吸附柱 CR1 在室温放置片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续的 RT 等实验。
11.将吸附柱 CR1 转入一个新的 RNase-Free 离心管中，加入 30-100 μl 无酶双蒸水至吸附柱的膜中心，室温静置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 1 min，得到 RNA 溶液。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于 30 μl，体积过小影响回收效率；RNA 溶液请于-70℃保存。
暂时没有说明书
1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
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