RNA Holder Stabilization Solution
【保存条件】 室温(15-30℃)保存一年
【概述】 RNA holder 是一种无毒的可直接使用的样品储存液,能迅速稳定组织,保护非冷冻细 胞 RNA 于原位。可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的 RNA。组织获取后立即浸入 RNA holder 保存液中,在室温可以保存 7 天,4℃可以保存 4 周,-20℃、-80℃标本可以长期保存, RNA 稳定存在不降解,取出后用各类方法抽提可以获得高质量的 RNA。
【操作方法】 1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需 RNA holder 用量。RNA holder 的用量应当是组 织体积的 10 倍(如 100mg 组织约用 1ml RNA holder);离心收集 2×106 细胞 RNA holder 的用量是 1ml。 2. 将 RNA holder 按需要量分装入自备保存管中; 3. 快速将较大的组织切成任何一边最大厚度不大于 0.5cm 大小,然后将组织碎块放入到 10 倍体积的 RNA holder 中保存。注:组织过厚则 RNA holder 不能有效渗入,组织中间部位的 RNA 不能受到保护。 4. 保存时先将样本浸入 RNA holder 后置 4℃冰箱过夜(使 RNA holder 完全渗入到组织中), 然后转移至-20℃冰箱(RNA holder 在-20℃仍为液态,有结晶析出为正常情况),或者过夜 取出后直接转移至-80℃,可反复冻融 20 次不影响 RNA 质量。
【注意事项】 1. 组织和细胞取材要快速,防止 RNA 降解。冰冻组织不能用 RNA holder 保存,因其不能 有效渗入冰冻组织中。 2. 保存样品的提取:组织样本从-20℃或-80℃取出后,复苏到室温后,取出组织块置于 RNA 提取液(如 Trizol)中再行提取。细胞样本复温后低速离心收集细胞,去除 RNA holder
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