【保存条件】
4℃避光储存,有效期 1 年
【概述】
台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝,是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率,是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不会被染成蓝色;而丧失活性或细胞膜不完整的 细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。
台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染 现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需 3-5 分钟,操作简单。
【使用建议】
台盼蓝染色常用浓度为 0.04%,该产品使用建议以台盼蓝染色液终浓度为 0.04%为例,如需使用其他终浓度,该使用建议仅供参考。
1. 收集细胞:用胰酶或 EDTA 消化贴壁细胞,悬浮细胞可直接收集。收集细胞时用 1000-2000rpm 离心 1 分钟,弃上清,制备单细胞悬液,并做适当稀释。
2. 台盼蓝染色:细胞悬液与 1%台盼蓝溶液以 24:1 比例混匀(终浓度 0.04%),染色 3 分 钟 (染色 3 分钟时间已经足够,但染色时间可以更长一些,但不宜超过 10 分钟)。
3. 细胞计数:吸取少量经过染色的细胞,用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。通常要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数 500 个细胞。
细胞存活率(%)=活细胞总数 /(活细胞总数+死细胞总数)×100%
【注意事项】
1. 染色时间不宜过长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。
2. 本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,可在 37℃水浴约 10 分钟以充分溶解沉 淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。
3. 台盼蓝有潜在致癌风险,请注意适当防护。
4. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。
5. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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