IP/Co-IP细胞裂解液-500ml

IP/Co-IP Cell Lysis Buffer

【保存条件】 

4ºC 保存 

【操作方法】 

裂解贴壁细胞的方法（裂解前可加入相应蛋白酶/磷酸酶抑制剂）： 

1. 小心地从细胞中去除培养基。 用冰冷的 PBS 清洗一次。 

2. 将冰冷 IP 细胞裂解缓冲液添加到细胞板中（6 孔板中每孔加入 200-400μl），并在冰上孵 育 5 分钟，中途不间断混匀。 

3. 将裂解液转移至微量离心管中，以约 13,000×g 的速度离心 10 分钟，以在 4°C 下沉淀细 胞碎片。 

4. 将上清液转移到新的试管中，以测定蛋白浓度并进行进一步分析。 

裂解悬浮细胞的方法（裂解前可加入相应蛋白酶/磷酸酶抑制剂）： 

1. 将细胞悬液以 1,000×g 离心 5 分钟以沉淀细胞，丢弃上清液。 

2. 用冰冷的 PBS 洗涤细胞一次，以 1,000×g 离心 5 分钟以沉淀细胞。 

3. 将冰冷的 IP 细胞裂解缓冲液添加到细胞沉淀中。每 50 mg 湿细胞沉淀（10：1 v / w）使 用 500μl 裂解缓冲液。 

4. 在冰上孵育裂解物 5 分钟。通过在 4°C 下以〜13,000×g 离心 10 分钟去除细胞碎片。 

5. 将上清液转移到新的试管中，以测定蛋白浓度并进行进一步分析。 

【注意事项】 

1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。