4×SDS-PAGE单色蛋白Loading buffer(含巯基还原剂）-100ml

SDS-PAGE Loading buffer,4×(with β-Mercaptoethanol)

【保存条件】 

建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期 1 年 

【概述】 

4×SDS-PAGE 单色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在 SDS-PAGE 运行期间防止 pH 值变化。一些蛋白质对在 Tris 缓冲液中电泳期间温度波动引起 的 pH 变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在 SDS-PAGE 电泳之前的样品加热过程中 以及电泳过程中蛋白质降解。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS 还 可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。β-巯基乙醇可以断开 半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。 

溴酚蓝作为指示剂，用于追踪电泳进度。 

【使用建议】 

1. 室温解冻 4×SDS-PAGE 单色蛋白上样缓冲液。 

2. 请按每 30μl 蛋白样品加入 10μl 上样缓冲液的比例(4 倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度 过高，可用双蒸水稀释。 

3. 混匀后，100℃水浴加热 5-10 分钟，使蛋白变性。 

4. 冷却至室温后，10000-14000rpm 离心 2-5 分钟，取上清直接上样电泳即可。

【注意事项】 

1. β-巯基乙醇对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护。 

2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 

3. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右， 胶浓度为 12时，约在 20kd 左右，胶浓度为 15%时，大概在 10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。 

4. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH 值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液 可能会呈现深棕色，不影响产品使用。