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产品细节图:
Human sIL-6R(Soluble Interleukin 6 Receptor) ELISA Kit
产品货号:E-EL-H2518c
中文名:人可溶性白介素6受体(sIL-6R)酶联免疫吸附测定试剂盒
别称:IL6R, CD126, IL-6R-1, IL-6RA, IL6Q, IL6RA, IL6RQ, gp80, Interleukin-6 receptor, interleukin 6 receptor
用途
该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中sIL-6R浓度
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人sIL-6R抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人sIL-6R会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人sIL-6R抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人sIL-6R抗体与结合在包被抗体上的人sIL-6R结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，sIL-6R浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中sIL-6R的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 4.5h |
| 反应性 | Human |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 15.63—1000 pg/mL |
| 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清，血浆或其他生物体液 |
特异性
可检测样本中的人sIL-6R，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 1000 |
2.417 2.469 |
2.443 | 2.384 |
| 500 |
1.695 1.741 |
1.718 | 1.659 |
| 250 |
0.974 0.939 |
0.957 | 0.898 |
| 125 |
0.435 0.455 |
0.445 | 0.386 |
| 62.5 |
0.268 0.246 |
0.257 | 0.198 |
| 31.25 |
0.175 0.149 |
0.162 | 0.103 |
| 15.63 |
0.106 0.118 |
0.112 | 0.053 |
| 0 |
0.049 0.069 |
0.059 | -- |
|
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
|
Mean (pg/mL) |
54.13 | 124.28 | 477.02 | 56.05 | 115.03 | 491.14 |
|
Standard deviation |
3.26 | 5.44 | 22.94 | 3.75 | 5.22 | 21.71 |
| C V (%) | 6.02 | 4.38 | 4.81 | 6.69 | 4.54 | 4.42 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 83-95 | 90 |
| EDTA plasma (n=8) | 87-97 | 92 |
| Cell culture media (n=8) | 83-95 | 90 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 87-99 | 98-111 | 96-110 |
| Average (%) | 93 | 105 | 103 | |
| 1:4 | Range (%) | 86-100 | 101-116 | 98-111 |
| Average (%) | 92 | 107 | 104 | |
| 1:8 | Range (%) | 84-97 | 97-108 | 94-111 |
| Average (%) | 89 | 102 | 102 | |
| 1:16 | Range (%) | 83-92 | 100-117 | 92-107 |
| Average (%) | 88 | 108 | 100 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃，可存放6个月 |
| 冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
| 产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
| 质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明：所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
- 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
- 2. 高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
- 3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
- 4. 吸水纸
操作步骤
|
1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本，37℃孵育90分钟 |
|
2. 弃掉板内液体后，立即加入100μL生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟 |
|
3. 弃掉板内液体，洗板3次 |
|
4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液，37℃孵育30分钟，弃掉板内液体，洗板5次 |
|
5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分钟左右 |
|
6. 每孔加入50μL终止液 |
|
7. 立即在450nm波长下读数，处理数据 |
暂时没有说明书
1.《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
作者：Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子：4.259
期刊：《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID：27353337
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