产品货号:E-EL-H0107c
中文名:人白介素23(IL-23)酶联免疫吸附测定试剂盒
别称:IL-23A, IL23P19, P19, SGRF
该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中IL-23浓度
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IL-23抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人IL-23会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-23抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人IL-23抗体与结合在包被抗体上的人IL-23结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IL-23浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IL-23的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 3.5h |
反应性 | Human |
检测方法 | Colormetric |
检测范围 | 39.06—2500 pg/mL |
灵敏度 | 23.44 pg/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清,血浆或其他生物体液 |
可检测样本中的人IL-23,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
板内,板间变异系数均<10%。
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
2500 |
2.147 2.189 |
2.168 | 2.115 |
1250 |
1.485 1.519 |
1.502 | 1.449 |
625 |
0.83 0.792 |
0.811 | 0.758 |
312.5 |
0.364 0.374 |
0.369 | 0.316 |
156.25 |
0.23 0.202 |
0.216 | 0.163 |
78.13 |
0.148 0.132 |
0.14 | 0.085 |
39.06 |
0.093 0.105 |
0.099 | 0.046 |
0 |
0.045 0.061 |
0.053 | -- |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) |
136.57 | 343.26 | 1072.26 | 129.52 | 356.17 | 1144.30 |
Standard deviation |
7.20 | 15.55 | 35.49 | 8.48 | 20.02 | 54.47 |
C V (%) | 5.27 | 4.53 | 3.31 | 6.55 | 5.62 | 4.76 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 88-100 | 94 |
EDTA plasma (n=8) | 94-105 | 99 |
Cell culture media (n=8) | 87-100 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 92-107 | 95-109 | 85-99 |
Average (%) | 99 | 102 | 91 | |
1:4 | Range (%) | 93-104 | 84-96 | 86-102 |
Average (%) | 98 | 90 | 93 | |
1:8 | Range (%) | 91-106 | 83-94 | 87-99 |
Average (%) | 99 | 89 | 94 | |
1:16 | Range (%) | 88-103 | 84-94 | 80-92 |
Average (%) | 95 | 89 | 87 |
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|---|
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟 |
|
2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟 |
|
3. 弃掉板内液体,洗板3次 |
|
4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 |
|
5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右 |
|
6. 每孔加入50μL终止液 |
|
7. 立即在450nm波长下读数,处理数据 |
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