产品货号:E-EL-M0725c
中文名:小鼠白介素11(IL-11)酶联免疫吸附测定试剂盒
别称:IL11, AGIF, IL-11, interleukin 11
该试剂盒用于体外定量检测Mouse 血清,血浆或其他生物体液中IL-11浓度
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-11抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠IL-11会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IL-11抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠IL-11抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-11结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IL-11浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IL-11的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 3.5h |
反应性 | Mouse |
检测方法 | Colormetric |
检测范围 | 15.63—1000 pg/mL |
灵敏度 | 9.38 pg/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清,血浆或其他生物体液 |
可检测样本中的小鼠IL-11,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
板内,板间变异系数均<10%。
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
1000 |
2.446 2.452 |
2.449 | 2.368 |
500 |
1.659 1.709 |
1.684 | 1.603 |
250 |
0.937 0.926 |
0.932 | 0.851 |
125 |
0.477 0.489 |
0.483 | 0.402 |
62.5 |
0.254 0.24 |
0.247 | 0.166 |
31.25 |
0.195 0.169 |
0.182 | 0.101 |
15.63 |
0.126 0.14 |
0.133 | 0.052 |
0 |
0.073 0.089 |
0.081 | -- |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) |
46.21 | 133.72 | 482.97 | 43.29 | 121.11 | 460.50 |
Standard deviation |
3.18 | 7.85 | 17.19 | 2.94 | 5.84 | 22.84 |
C V (%) | 6.88 | 5.87 | 3.56 | 6.79 | 4.82 | 4.96 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 86-99 | 91 |
EDTA plasma (n=8) | 96-106 | 101 |
Cell culture media (n=8) | 96-108 | 101 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 85-96 | 84-95 | 87-99 |
Average (%) | 91 | 90 | 94 | |
1:4 | Range (%) | 91-105 | 85-98 | 87-97 |
Average (%) | 96 | 91 | 92 | |
1:8 | Range (%) | 92-103 | 83-96 | 83-97 |
Average (%) | 98 | 88 | 90 | |
1:16 | Range (%) | 91-105 | 87-100 | 86-99 |
Average (%) | 97 | 92 | 91 |
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|---|
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟 |
|
2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟 |
|
3. 弃掉板内液体,洗板3次 |
|
4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 |
|
5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右 |
|
6. 每孔加入50μL终止液 |
|
7. 立即在450nm波长下读数,处理数据 |
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