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超薄DNA产物纯化试剂盒
产品细节图:
超薄DNA产物纯化试剂盒
品牌:genefist | 货号:GF203
所属大类
: 试剂
所属小类
: 常用生化试剂
品牌
: genefist
规格
: 50次
原价
: ¥240.00
促销价
:
¥240.00
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储存条件
该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存18个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。
产品简介
本试剂盒采用独特的离心吸附柱纯化酶切、PCR等反应溶液中的DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,回收100 bp-10 kb DNA片段,回收率可达80%以上,可用最少20ul的洗脱液进行洗脱,每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为5 μg,特别适用于较少样品量的回收。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
产品特点
快速:整个操作过程只需十几分钟,节省时间。
多样:可以回收单链、双链DNA片段以及环状质粒DNA。
高效:独特的离心柱和精心配制的缓冲液,可大量回收到高纯度目的DNA。
注意事项
1.本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有 DNA 片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择胶回收试剂盒。
2.回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。
3.对于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以适当的增加吸附和洗脱的时间。
操作步骤
使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签;所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1.完成 PCR 扩增或其他酶切反应操作后,移取反应混合液(含有预纯化的 DNA)至干净的离心管。
2.加入 3 倍体积的溶液 PB 至反应混合液中(如 50ul 反应混合液加入 150ul 的结合液),震荡混合均匀。
3.将吸附柱放入收集管中,移取上一步混合液至吸附柱,室温放置 2 min,以 12,000 rpm(~13,400×g )离心 1 分钟,丢弃收集管中的悬液,将吸附柱 CB3 放回收集管中。
注意:若样本体积超过 700ul,可分次加入并重复此步骤。
4.向吸附柱 CB3 加入 700ul 的漂洗液 PW,静置 1 分钟以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )离心 1
分钟,丢弃悬液,将吸附柱 CB3 放回收集管中。
5.重复操作步骤 4。
6.将吸附柱 CB3 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )离心 2 分钟,将吸附柱开盖置于室温放置数分钟,
以去除、晾干残余的漂洗液。
注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR 等)实验。
7.将吸附柱 CB3 置于一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加 20-50ul 洗脱缓冲液 TB,室温放置 2
min。12,000 rpm (~13,400×g )离心 2 min 收集 DNA 溶液。
注意:洗脱体积最低不应小于 20 μl,体积过少会影响回收的效率。洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有较大
影响,若后续做测序,需使用 ddH2O 做洗脱液,并保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内,pH 值低于 7.0 会降低
洗脱效率;且 DNA 产物应保存在-20℃,以防止 DNA 降解。为了提高 DNA 的回收量,可将离心得到的溶
液重新加回离心吸附柱中,再次离心管。
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1.
《Multifunction Sr, Co and F co-doped microporous coating on titanium of antibacterial, angiogenic and osteogenic activities》
作者:Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子:4.259
期刊:《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID:
27353337
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