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普通DNA产物纯化试剂盒

产品细节图:

  • 普通DNA产物纯化试剂盒

普通DNA产物纯化试剂盒

品牌:genefist | 货号:GF204-03
  • 所属大类 : 试剂
  • 所属小类 : 常用生化试剂
  • 品牌 : genefist
  • 规格 : 200次
  • 原价 : ¥688.00
  • 促销价 : ¥688.00
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    储存条件
    该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存18个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀。

    产品简介
    本试剂盒采用独特的离心吸附柱纯化酶切、PCR等反应溶液中的DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,回收100 bp-20 kb DNA片段,回收率可达80%以上。每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为10 μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
    如果回收前DNA量为1-5ug,建议选用GF203超薄DNA产物纯化kit,推荐洗脱液体积20-50ul。

    产品特点
    快速:整个操作过程只需十几分钟,节省时间。
    多样:可以回收单链、双链DNA片段以及环状质粒DNA。
    高效:独特的离心柱和精心配制的缓冲液,可大量回收到高纯度目的DNA。

    注意事项
    1.本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有 DNA 片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择胶回收试剂盒。
    2.回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。
    3.对于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以适当的增加吸附和洗脱的时间。

    操作步骤
    使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签;所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
    1.完成 PCR 扩增或其他酶切反应操作后,移取反应混合液(含有预纯化的 DNA)至干净的离心管。

    2.加入 3 倍体积的溶液 PB 至反应混合液中(如 50ul 反应混合液加入 150ul 的结合液),震荡混合均匀。

    3.将吸附柱放入收集管中,移取上一步混合液至吸附柱,室温放置 2 min,以 12,000 rpm(~13,400×g )离心 1 分钟,丢弃收集管中的悬液,将吸附柱 CB2 放回收集管中。
    注意:若样本体积超过 700ul,可分次加入并重复此步骤。

    4.向吸附柱 CB2 加入 700ul 的漂洗液,静置 1 分钟以平衡管柱膜,于 12,000 rpm(~13,400×g )离心 1 分钟,丢弃悬液,将吸附柱 CB2 放回收集管中。

    5.重复操作步骤 4。
    6.将吸附柱 CB2 放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g )离心 2 分钟,将吸附柱开盖置于室温放置数分钟,以去除、晾干残余的漂洗液。
    注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR 等)实验。

    7.将吸附柱CB2置于一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加30-100洗脱缓冲液TB,室温放置2 min。12,000 rpm (~13,400×g )离心 2 min 收集 DNA 溶液。
    注意:洗脱体积不应小于 30 μl。洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有较大影响,若后续做测序,需使用 ddH2O做洗脱液,并保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内,pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率;为了提高 DNA 的回收量,可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中,室温放置 2 min,12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min,将 DNA溶液收集到离心管。
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    作者:Jianhong Zhou ,Lingzhou Zhao 影响因子:4.259
    期刊:《Scientific Reports 6, Article number: 29069 (2016)》 PMID:27353337

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