IP/Co-IP Cell Lysis Buffer【保存条件】 4ºC 保存 【操作方法】 裂解贴壁细胞的方法(裂解前可加入相应蛋白酶/磷酸酶抑制剂): 1. 小心地从细胞中去除培养基。 用冰冷的 PBS 清洗一次。 2. 将冰冷 IP 细胞裂解缓冲液添加到细胞板中(6 孔板中每孔加入 200-400μl),并在冰上孵 育 5 分钟,中途不间断混匀。 3. 将裂解液转移至微量离心管中,以约 13,000×g 的速度离心 10 分钟,以在 4°C 下沉淀细 胞碎片。 4. 将上清液转移到新的试管中,以测定蛋白浓度并进行进一步分析。 裂解悬浮细胞的方法(裂解前可加入相应蛋白酶/磷酸酶抑制剂): 1. 将细胞悬液以 1,000×g 离心 5 分钟以沉淀细胞,丢弃上清液。 2. 用冰冷的 PBS 洗涤细胞一次,以 1,000×g 离心 5 分钟以沉淀细胞。 3. 将冰冷的 IP 细胞裂解缓冲液添加到细胞沉淀中。每 50 mg 湿细胞沉淀(10:1 v / w)使 用 500μl 裂解缓冲液。 4. 在冰上孵育裂解物 5 分钟。通过在 4°C 下以〜13,000×g 离心 10 分钟去除细胞碎片。 5. 将上清液转移到新的试管中,以测定蛋白浓度并进行进一步分析。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
PMSF Solution(100mM)【保存条件】 -20℃避光密封存储,有效期 1 年 【概述】 PMSF 是丝氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶抑制剂,常做为蛋白酶抑制剂使用。在纯化过程 中,为了防止细菌本身的蛋白酶降解待纯化的目的蛋白,通常在破碎菌体,上柱的过程中会 加 PMSF。PMSF 可抑制多种蛋白酶活性,为防止蛋白降解,提高得率,一般都要加。本产 品为保证 PMSF 活性,将其溶于异丙醇中保存。 【使用建议】 1. PMSF 溶液工作浓度为 17~174μg/ml(0.1~1mM)。 2. PMSF 溶液在水溶液中不稳定,30 分钟就会降解一半,必须在每一个分离和纯化步骤中 加入新鲜的 PMSF,样品处理超过 1h 应补加一次。 【注意事项】 1. PMSF-20℃保存可能会有结晶析出,这是正常的,等到温度稍高混匀就可以了。 2. PMSF 严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一 定要注意防护,手套和口罩。 3.一旦眼睛或皮肤接触了 PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被 PMSF 污染的衣物应予丢弃。 4.PMSF 在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。
PMSF Solution(100mM)【保存条件】 -20℃避光密封存储,有效期 1 年 【概述】 PMSF 是丝氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶抑制剂,常做为蛋白酶抑制剂使用。在纯化过程中,为了防止细菌本身的蛋白酶降解待纯化的目的蛋白,通常在破碎菌体,上柱的过程中会加 PMSF。PMSF 可抑制多种蛋白酶活性,为防止蛋白降解,提高得率,一般都要加。本产品为保证 PMSF 活性,将其溶于异丙醇中保存。 【使用建议】 1. PMSF 溶液工作浓度为 17~174μg/ml(0.1~1mM)。 2. PMSF 溶液在水溶液中不稳定,30 分钟就会降解一半,必须在每一个分离和纯化步骤中加入新鲜的 PMSF,样品处理超过 1h 应补加一次。 【注意事项】 1. PMSF-20℃保存可能会有结晶析出,这是正常的,等到温度稍高混匀就可以了。 2. PMSF 严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一定要注意防护,手套和口罩。 3.一旦眼睛或皮肤接触了 PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被 PMSF 污染的衣物应予丢弃。 4.PMSF 在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。
5% SDS solution【保存条件】 室温保存,有效期 1 年 【概述】 SDS 即 Sodium dodecyl sulfate,中文名为十二烷基磺酸钠,也称十二烷基硫酸钠。常用 生化试剂,用途广泛,可以用于 SDS-PAGE、细菌碱裂解等。5% SDS 溶液为 100ml 溶液中 含有 5g SDS,该溶液用水配制。 【注意事项】 1. 本产品对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体 内。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
pH Buffer Solution(pH 10.01)【保存条件】 室温保存,有效期 1 年,4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的,并达到规定的准确度,其 pH 值有良好的复现性和稳定性, 具有较大的缓冲容量,较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位 和斜率校准,其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 10.01 校准液是特指在 25℃下,pH=10.01。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时,pH 值会随温度不同而不同,具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下,pH 校准液对应的 pH 值:
pH Buffer Solution(pH 9.18)【保存条件】 室温保存,有效期 1 年,4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的,并达到规定的准确度,其 pH 值有良好的复现性和稳定性, 具有较大的缓冲容量,较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位 和斜率校准,其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 9.18 校准液是特指在 25℃下,pH=9.18。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时,pH 值会随温度不同而不同,具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下,pH 校准液对应的 pH 值:
pH Buffer Solution(pH 7.00)【保存条件】 室温保存,有效期 1 年,4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的,并达到规定的准确度,其 pH 值有良好的复现性和稳定性, 具有较大的缓冲容量,较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位 和斜率校准,其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 7.00 校准液是特指在 25℃下,pH=7.00。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时,pH 值会随温度不同而不同,具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下,pH 校准液对应的 pH 值:
pH Buffer Solution(pH 6.86)【保存条件】室温保存,有效期 1 年,4℃保存可延长有效期。【概述】pH 校准液的 pH 值是已知的,并达到规定的准确度,其 pH 值有良好的复现性和稳定性,具有较大的缓冲容量,较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位和斜率校准,其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 6.86 校准液是特指在 25℃下,pH=6.86。【注意事项】1. 使用过程中应该避免污染。2. 显示 pH 校准数值时,pH 值会随温度不同而不同,具体如参考附录。3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。【附录】不同温度下,pH 校准液对应的 pH 值:
pH Buffer Solution(pH 4.01)【保存条件】 室温保存,有效期 1 年,4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的,并达到规定的准确度,其 pH 值有良好的复现性和稳定性, 具有较大的缓冲容量,较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位 和斜率校准,其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 4.01 校准液是特指在 25℃下,pH=4.01。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时,pH 值会随温度不同而不同,具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下,pH 校准液对应的 pH 值:
1M Hepes (Acid Free,Sterile)【保存条件】 4℃保存,有效期 1 年 【概述】 HEPES 即羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N’-a-hydroxythylpiperazine-N’-ethanesulfanic acid )是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的 pH 范围。有效缓冲范围为 pH6.8-8.2。常用于配制蛋白提取缓冲液、细胞培养用缓冲液等。 HEPES 用于细胞培养时使用终浓度为 10-25mM, 在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的 pH 值。ECOTOP 生产的 HEPES 缓冲液均经过无菌处理,可直接用于细胞培养。4℃保存可延长产品保质期,长期不用建议低温保存。 【注意事项】 1. HEPES 溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
1M Hepes buffer(pH7.2-7.4,Sterile)【保存条件】 4℃避光保存,有效期 1 年 【概述】 HEPES 即羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N’-a-hydroxythylpiperazine-N’-ethanesulfanic acid )是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的 pH 范围。有效缓冲范围为 pH6.8-8.2。常用于配制蛋白提取缓冲液、细胞培养用缓冲液等。 HEPES 用于细胞培养时使用终浓度为 10-25mM, 在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的 pH 值。ECOTOP 生产的 HEPES 缓冲液均经过无菌处理,可直接用于细胞培养。4℃保存可延长产品保质期,长期不用建议低温保存。 【注意事项】 1. HEPES 溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
Trypan Blue Stain solution,1%【保存条件】 4℃避光储存,有效期 1 年 【概述】 台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝,是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率,是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不会被染成蓝色;而丧失活性或细胞膜不完整的 细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。 台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染 现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需 3-5 分钟,操作简单。 【使用建议】 台盼蓝染色常用浓度为 0.04%,该产品使用建议以台盼蓝染色液终浓度为 0.04%为例,如需使用其他终浓度,该使用建议仅供参考。 1. 收集细胞:用胰酶或 EDTA 消化贴壁细胞,悬浮细胞可直接收集。收集细胞时用 1000-2000rpm 离心 1 分钟,弃上清,制备单细胞悬液,并做适当稀释。 2. 台盼蓝染色:细胞悬液与 1%台盼蓝溶液以 24:1 比例混匀(终浓度 0.04%),染色 3 分 钟 (染色 3 分钟时间已经足够,但染色时间可以更长一些,但不宜超过 10 分钟)。 3. 细胞计数:吸取少量经过染色的细胞,用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。通常要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数 500 个细胞。 细胞存活率(%)=活细胞总数 /(活细胞总数+死细胞总数)×100% 【注意事项】 1. 染色时间不宜过长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。 2. 本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,可在 37℃水浴约 10 分钟以充分溶解沉 淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 台盼蓝有潜在致癌风险,请注意适当防护。 4. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 5. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Trypan Blue Stain solution,1%【保存条件】 4℃避光储存,有效期 1 年 【概述】 台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝,是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率,是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不会被染成蓝色;而丧失活性或细胞膜不完整的 细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。 台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染 现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需 3-5 分钟,操作简单。 【使用建议】 台盼蓝染色常用浓度为 0.04%,该产品使用建议以台盼蓝染色液终浓度为 0.04%为例,如需使用其他终浓度,该使用建议仅供参考。 1. 收集细胞:用胰酶或 EDTA 消化贴壁细胞,悬浮细胞可直接收集。收集细胞时用 1000-2000rpm 离心 1 分钟,弃上清,制备单细胞悬液,并做适当稀释。 2. 台盼蓝染色:细胞悬液与 1%台盼蓝溶液以 24:1 比例混匀(终浓度 0.04%),染色 3 分 钟 (染色 3 分钟时间已经足够,但染色时间可以更长一些,但不宜超过 10 分钟)。 3. 细胞计数:吸取少量经过染色的细胞,用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。通常要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数 500 个细胞。 细胞存活率(%)=活细胞总数 /(活细胞总数+死细胞总数)×100% 【注意事项】 1. 染色时间不宜过长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。 2. 本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,可在 37℃水浴约 10 分钟以充分溶解沉 淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 台盼蓝有潜在致癌风险,请注意适当防护。 4. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 5. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Triton X-100 Solution(10%)【保存条件】 室温密封阴凉干燥保存,有效期 1 年 【概述】 曲拉通 X-100 为无色或几乎无色透明粘稠液体。能溶于水、甲苯、二甲苯和乙醇,不溶 于石油醚。用于气相色谱固定液(最高使用温度 190℃,溶剂为丙酮、氯仿、二氯甲烷、甲醇) 分离分析烃类化合物、含氧化合物(醇、酯、酮)、碱性和中性。用途广泛的非离子表面活 性剂,在温和的变性条件下用于恢复膜组分。 本产品为 10%(V/V) Triton X-100 溶液,请根据需要选择合适的浓度。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 有刺激性。若吸入、摄入或者皮肤吸收,对人体有害。使用时注意防护。
Triton X-100 Solution (1%)【保存条件】 室温密封阴凉干燥保存,有效期 1 年 【概述】 曲拉通 X-100 为无色或几乎无色透明粘稠液体。能溶于水、甲苯、二甲苯和乙醇,不溶 于石油醚。用于气相色谱固定液(最高使用温度 190℃,溶剂为丙酮、氯仿、二氯甲烷、甲醇) 分离分析烃类化合物、含氧化合物(醇、酯、酮)、碱性和中性。用途广泛的非离子表面活 性剂,在温和的变性条件下用于恢复膜组分。 本产品为 1%(V/V) Triton X-100 溶液,请根据需要选择合适的浓度。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 有刺激性。若吸入、摄入或者皮肤吸收,对人体有害。使用时注意防护。
Triton X-100 Solution (0.5% )【保存条件】 室温密封阴凉干燥保存,有效期 1 年 【概述】 曲拉通 X-100 为无色或几乎无色透明粘稠液体。能溶于水、甲苯、二甲苯和乙醇,不溶于石油醚。用于气相色谱固定液(最高使用温度 190℃,溶剂为丙酮、氯仿、二氯甲烷、甲醇)分离分析烃类化合物、含氧化合物(醇、酯、酮)、碱性和中性。用途广泛的非离子表面活性剂,在温和的变性条件下用于恢复膜组分。 本产品为 0.5%(V/V) Triton X-100 溶液,请根据需要选择合适的浓度。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 有刺激性。若吸入、摄入或者皮肤吸收,对人体有害。使用时注意防护。
Deionized Water, Sterile (PCR Grade)【保存条件】 室温保存,有效期 1 年 【概述】 无菌去离子水用途广泛,可用于溶液的配制和分子生物学实验中的普通 PCR 体系构建 等方面。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
100×TE buffer(pH8.0)【保存条件】 室温保存,有效期 1 年 【概述】 TE 缓冲液是分子生物学中常用的缓冲液,尤其是 DNA、cDNA 或 RNA 的缓冲液。TE 缓冲液由 Tris 和 EDTA 组成,pH 值为 8.0,经过 DEPC 及灭菌处理。本产品用于溶解 DNA 或 RNA,同时保护其不被降解。本产品为 10×TE 缓冲液,需稀释成 1×使用。 【使用建议】 本产品为 10×TE 缓冲液,需稀释成 1×使用。如:100ml 10×TE 缓冲液加入 900ml 无菌 无酶 ddH2O 搅拌混匀成 1×TE 缓冲液工作液。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1×TE buffer(pH8.0)(RNase/DNase free)(Sterile)【保存条件】 室温保存,有效期 1 年 【概述】 TE 缓冲液是分子生物学中常用的缓冲液,尤其是 DNA、cDNA 或 RNA 的缓冲液。TE 缓冲液由 Tris 和 EDTA 组成,pH 值为 8.0,经过 DEPC 及灭菌处理,可直接用于溶解 DNA 或 RNA,同时保护其不被降解。 【注意事项】 1. 该产品经除酶处理,产品使用时应尽量避免酶污染。 2. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。