中文名:小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒
别称:CCL2, GDCF-2, HC11, HSMCR30, MCAF, MCP1, SCYA2, SMC-CF
该试剂盒用于体外定量检测Mouse 血清,血浆或其他生物体液中MCP-1浓度
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠MCP-1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠MCP-1会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠MCP-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠MCP-1抗体与结合在包被抗体上的小鼠MCP-1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,MCP-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中MCP-1的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 3.5h |
反应性 | Mouse |
检测方法 | Colormetric |
检测范围 | 31.25—2000 pg/mL |
灵敏度 | 18.75 pg/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清,血浆或其他生物体液 |
可检测样本中的小鼠MCP-1,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
板内,板间变异系数均<10%。
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
2000 |
2.484 2.439 |
2.462 | 2.403 |
1000 |
1.658 1.699 |
1.679 | 1.62 |
500 |
0.973 0.978 |
0.976 | 0.917 |
250 |
0.486 0.478 |
0.482 | 0.423 |
125 |
0.261 0.271 |
0.266 | 0.207 |
62.5 |
0.17 0.174 |
0.172 | 0.113 |
31.25 |
0.12 0.115 |
0.118 | 0.059 |
0 |
0.055 0.062 |
0.059 | -- |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) |
94.05 | 210.98 | 994.91 | 88.91 | 244.77 | 840.43 |
Standard deviation |
5.14 | 10.06 | 47.86 | 4.82 | 12.09 | 45.97 |
C V (%) | 5.47 | 4.77 | 4.81 | 5.42 | 4.94 | 5.47 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 94-104 | 100 |
EDTA plasma (n=8) | 87-99 | 92 |
Cell culture media (n=8) | 90-100 | 96 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 82-98 | 84-98 | 83-97 |
Average (%) | 90 | 92 | 90 | |
1:4 | Range (%) | 84-96 | 91-101 | 93-102 |
Average (%) | 92 | 98 | 98 | |
1:8 | Range (%) | 92-107 | 94-104 | 86-96 |
Average (%) | 100 | 98 | 91 | |
1:16 | Range (%) | 93-108 | 84-94 | 95-102 |
Average (%) | 101 | 90 | 98 |
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|---|
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
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