中文名:人补体成分3a(C3a)酶联免疫吸附测定试剂盒
别称:C3a-desArg, ASP
该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中C3a浓度
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人C3a抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人C3a会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人C3a抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人C3a抗体与结合在包被抗体上的人C3a结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,C3a浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中C3a的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 3.5h |
反应性 | Human |
检测方法 | Colormetric |
检测范围 | 0.31—20 ng/mL |
灵敏度 | 0.19 ng/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清,血浆或其他生物体液 |
可检测样本中的人C3a,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
板内,板间变异系数均<10%。
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
20 |
2.278 2.332 |
2.305 | 2.249 |
10 |
1.466 1.524 |
1.495 | 1.439 |
5 |
0.924 0.888 |
0.906 | 0.85 |
2.5 |
0.418 0.452 |
0.435 | 0.379 |
1.25 |
0.251 0.229 |
0.24 | 0.184 |
0.63 |
0.153 0.149 |
0.151 | 0.095 |
0.31 |
0.103 0.107 |
0.105 | 0.049 |
0 |
0.053 0.059 |
0.056 | -- |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (ng/mL) |
1.01 | 2.09 | 8.39 | 0.94 | 2.22 | 7.83 |
Standard deviation |
0.07 | 0.09 | 0.30 | 0.05 | 0.13 | 0.24 |
C V (%) | 6.93 | 4.31 | 3.58 | 5.32 | 5.86 | 3.07 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 84-97 | 90 |
EDTA plasma (n=8) | 91-102 | 97 |
Cell culture media (n=8) | 87-98 | 93 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 89-107 | 91-107 | 87-103 |
Average (%) | 97 | 98 | 95 | |
1:4 | Range (%) | 93-105 | 81-94 | 85-97 |
Average (%) | 99 | 87 | 90 | |
1:8 | Range (%) | 91-103 | 82-92 | 86-97 |
Average (%) | 97 | 87 | 92 | |
1:16 | Range (%) | 89-106 | 85-96 | 84-96 |
Average (%) | 97 | 91 | 91 |
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|---|
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
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