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RNAEx ZOL总RNA提取试剂100ml（同Thermo的Trizol）
基本售价：520.00元
RNAEx ZOL Reagent 货号：EK-5301中文名称：RNAEx ZOL RNA提取试剂（同Thermo的Trizol）规格：200ML应用：RNA提取运输条件：常温运输 【保存条件】 4ºC 避光保存一年 【概述】 RNAEx ZOL Reagent 是即用型细胞和组织总 RNA 提取试剂，该试剂是一步法苯酚和异硫氰酸胍解决方案。该试剂可保持样品 RNA 的完整性，同时破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分享成水相和有机相。RNA 存于水相，通过异丙醇沉淀回收。 此方法可完美应用于少量人类、动物、植物或细菌来源的组织和细胞，允许大量样本同时处理。整个过程可在一小时内完成，同时可避免蛋白质和 DNA 污染。 【操作方法】 1. 样品处理： a. 组织：将组织在液氮中研磨，磨碎后及时于每 50-100mg 组织中加入 1ml RNAEx ZOL Reagent，样品体积不应超过 RNAEx ZOL Reagent 体积的 10%（或使用匀浆仪器）。 b. 单层细胞：直接在培养皿中裂解细胞，如35mm直径的培养皿中加入1ml RNAEx ZOL Reagent，使用吸头吹匀促进细胞裂解。RNAEx ZOL Reagent 的试剂量基于培养的表面积而不是细胞数量（每 1cm2加入 1ml RNAEx ZOL Reagent）, RNAEx ZOL Reagent试剂量不足可能会导致分离出的 RNA 有 DNA 污染。 c. 悬浮细胞：先低速离心沉淀细胞，弃培养液后加入 RNAEx ZOL Reagen（t 1ml RNAExZOL Reagent 加入至 5×106动物、植物、酵母或细菌细胞中）。加入 RNAEx ZOL Reagent 前避免洗涤细胞，这容易导致 mRNA 降解。一些酵母和细菌细胞的裂解可能需要使用均质器。 可选：一些样品可能需要额外的分享步骤，这些样品蛋白质、脂肪、多糖或细胞外基质含量高，如肌肉、脂肪组织、以及部分植物块茎。在根据上述方式处理后，于2-8°C，12000g 离心 10 分钟，移除沉淀不溶物，RNA 存于上清中。 2. 相分离 a. 将加完 RNAEx ZOL Reagent 后的样品在室温（15-30°C）静置 5 分钟，以利于样品核蛋白体完全分离 b. 按每 1ml RNAEx ZOL Reagent 加入 0.2ml 氯仿（自备），小心盖好样品管后，剧烈震荡 15 秒，后置于室温（15-30°C）静置 2-3 分钟。 c. 2-8°C，10000g 离心 15 分钟。离心后，混合物分离为下层（酚-氯仿相）、中间相以及上层无色水相。RNA 存在于上层无色水相中，体积约为最初加入 RNAEx ZOL Reagent 体积的 60%左右。 RNA 分离提取步骤： 1. RNA 沉淀 a. 将上述水相转移到一个新的管中，并保存有机相（若希望分离 DNA 或蛋白质）。混合异丙醇从水相中沉淀 RNA，每 1ml 用于初始裂解的 RNAEx ZOL Reagent 使用 0.5ml 异丙醇，室温（15-30°C）静置 10 分钟。 b. 2-8°C，10000g 离心 10 分钟。离心前看不出 RNA 沉淀，离心后在管侧和管底会出现胶状沉淀即为 RNA 沉淀。 2. RNA 洗涤 a. 弃上清。用 75%乙醇洗涤 RNA 沉淀一次，每毫升用于初始裂解的 RNAEx ZOL Reagent 试剂使用至少 1ml 75%乙醇，涡旋混匀后于 2-8°C，不超过 7500g 离心 5 分钟，弃上清 3. 溶解 RNA a. 在上述过程结束后，简单干燥 RNA 沉淀（空气干燥或真空干燥 5-10 分钟，不要真空离心离心干燥 RNA）。重要的是不要让 RNA 沉淀过于干燥，这将大大降低其溶解度。加入 25-200μl 无 RNase 水或 0.5% SDS，用吸头吹打几次至溶解，于 50-60°C 放置 10 分钟使 RNA 彻底溶解（注：若后续进行酶学实验，请勿使用 0.5% SDS 溶液溶 解）。溶解后置于-80°C 保存。 DNA 分离提取步骤： 1. DNA 沉淀 a. 样品加入氯仿分层后，移去上层水相提取 RNA，吸取中间层和有机层的 DNA 用乙醇沉淀。每使用 1ml RNAEx ZOL Reagent 加入 0.3ml 无水乙醇混匀，室温静置 2-3 分钟，2-8°C 不超过 2000g 离心 5 分钟以沉淀 DNA。 2. DNA 洗涤 a. 移去苯酚-乙醇上清液（如需要，保存上清用于蛋白质分离，操作见下）。用 0.1M 的柠檬酸钠溶液（溶于 10%乙醇的柠檬酸钠溶液）清洗沉淀的 DNA。每毫升用于初始的 RNAEx ZOL Reagent 试剂添加 1ml 溶液。每次清洗时，室温静置 30 分钟 DNA沉淀（间歇混匀），2-8°C 2000g 离心 5 分钟，弃上清。重复一次。 b. 用 75%乙醇再洗一遍 DNA 沉淀，每使用 1ml RNAEx ZOL Reagent 加入 1.5-2ml 75%乙醇，室温放置 10-20 分钟（间歇混匀），2-8°C 2000g 离心 5 分钟，弃上清。 c. 室温放置晾干 DNA 5-15 分钟，用 8mM NaOH 溶解 DNA。从 50-70mg 组织或 107细胞中分离的 DNA 溶于 300-600μl 8mM 的 NaOH 溶液中，浓度常为 0.2-0.3μg/μl。 注：提取的 DNA 沉淀不易溶于水和 Tris 缓冲液中，建议用弱碱溶解，8mM NaOH 的 pH值为 9，NaOH 溶液溶解后可用 TE、HEPES 调节 PH。从某些样品（尤其是组织）中提取的 DNA 中可能包含一些胶状不溶物可用>12000g 离心 10 分钟除去。 蛋白质分离操作步骤： 1. 蛋白质沉淀 a. 苯酚-乙醇上清液（每 1ml RNAEx ZOL Reagent 试剂上清体积约 0.8ml）中加入异丙醇可沉淀出蛋白质。每毫升用于初始裂解 RNAEx ZOL Reagent 试剂中添加 1.5ml 异丙醇，室温静置 10 分钟，然后 2-8°C 12000g 离心 10 分钟以沉淀蛋白质，弃上清。 2. 蛋白质洗涤 a. 用 0.3M 盐酸胍溶液（溶于 95%乙醇）洗涤蛋白质沉淀 3 次。每毫升每毫升用于初始裂解 RNAEx ZOL Reagent 试剂中添加 2ml 0.3M 盐酸胍溶液。每次洗涤中，室温静置 20 分钟，2-8°C 7500g 离心 5 分钟，弃上清，重复 3 次。最后清洗后，加入 2ml 无水乙醇，漩涡混匀蛋白沉淀，室温静置 20 分钟，然后 2-8°C 7500g 离心 5 分钟以沉淀蛋白质，弃上清。 3. 蛋白质溶解 a. 干空干燥蛋白质沉淀 5-10 分钟，用 1% SDS 溶解蛋白质，反复吹打，50°C 温浴至完全溶解，不溶物 2-8°C 10000g 离心 10 分钟去除。分离得到的蛋白质样品可用于WesternBlot 或者-20°C 保存（长期保存建议-80°C） 1. RNA 酶污染注意事项： a. 提取过程用品均经过去 RNA 酶处理：玻璃制品可以 150 °C 烘烤 4 小时 ，塑料制品可浸泡于 0.5M NaOH 溶液后用清水冲洗并高压灭菌，吸头及离心管类尽量使用一次性无酶吸头及离心管 b. 佩戴手套及口罩及护目镜：皮肤上常含有细菌和霉菌，可污染 RNA 制备，且同时是RNA 酶来源，同时 RNAEx ZOL Reagent 对皮肤有一定毒性，建议佩戴手套及口罩及护目镜。 c. 尽量于通风橱内提取：避免吸入提取过程中有毒物质。 2. 安全性问题： a. 本品在与皮肤接触及吞咽有毒性，可导致烧伤。与皮肤接触后，应立即用洗涤剂和大量水冲洗。如感到身体不适，应立即就医 3. 存储性问题： a. 实验已证明 RNAEx ZOL Reagent 室温下可稳定保存 12 个月，不过依然建议储存于2-8°C 以保证最佳性能，尽量避光保存。
RNA提取辅助试剂100ml（氯仿替代物）
基本售价：450.00元
RNA提取辅助试剂100ml（氯仿替代物）,可有效避免氯防购买不到的烦恼可以代替氯仿使用，并且毒性较小。在单步 TRI 试剂方法中使用可以减少 DNA 污染 RNA 的可能性，本品不会对分离的 RNA 的质量或数量产生不利影响。 【操作方法】1. 请按每使用 1ml TRI 试剂（Trizol 试剂或 RNAEx ZOL 总 RNA 提取试剂）加入 200μl 比例来使用（等同RNA 提取中氯仿的使用）。 【注意事项】1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，以免污染。2. RNAEx ZOL 总 RNA 提取试剂（货号：EK-5301）可在 ECOTOP 各平台咨询购买。3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作
无DNA/RNA酶水(无菌)500ML
基本售价：140.00元
DNase/RNase-free water（DEPC treated,Sterile）【保存条件】 室温保存，有效期 1 年 【概述】 无酶无菌水是超纯水经 DEPC 处理后，再高压灭菌而得到的不含 DNA 酶或 RNA 酶的 无菌水。经检测无核酸酶和蛋白酶活性，可用于 cDNA 合成、体外转录、RNA 提取等对核 酸酶敏感的分子生物学试验和相关产品的稀释或溶解。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
伊文思蓝染色液（0.5%）
基本售价：130.00元
Evans Blue Stain Solution 0.5% 【保存条件】 室温保存，有效期 1 年 【概述】 伊文思蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝，分子式 C34H24N6Na4O14S4，分子量为 960.80，CAS号为 314-13-6。伊文思蓝属于一种常用的偶氮染料制剂，因其分子量大小和血浆白蛋白相近，而且在血液中和血浆白蛋白有很高的亲和力，因此在神经科学研究中常被用于示踪观察血脑屏障(BBB)的完整性，也用于细胞染色区分活细胞、死细胞，亦可测定血容量。 伊文思蓝和台盼蓝都是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。伊文思蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量，其中 0.5%为最常用的浓度。活细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色，因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞和活细胞，但无法区分死亡和坏死。 【使用建议】 (一)血脑屏障通透性 1. 取处理后的实验动物(以小鼠为例)，静脉注射 Evans Blue Stain Solution(0.5%)数秒至 1 分钟，小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5～1h 后处死小鼠，取目的脑组织。 2. 脑组织置于 1.5ml 离心管中，加入 1ml PBS， 迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆，离心。 3. 取上清，加入等量三氯乙酸，4℃孵育 18～24h。该步骤亦可采用如下操作: 取上清，按上清:丙酮=3:7 比例加入丙酮，室温孵育 24h。 4. 1000g 离心 20～30 min 或 2000g 离心 15min。5. 取上述溶液 1～2ml，用分光光度计测 620 nm 处吸光值(OD 值)。同时测定已知不同梯度的标准依文思蓝的 OD 值，绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测待测样品的依文思蓝含量。 (二)活细胞染色 1、取 100μl 重悬细胞到常规 1.5ml 或 0.5ml 离心管内，加入 100μl 伊文思蓝染液轻轻混匀，染色 3min(染色时间可适当延长，但不宜超过 10min)。 2、吸取少量经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数 500 个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下: 细胞存活率＝(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100% 【注意事项】 1. 伊文思蓝对人体有轻微毒性，请小心防护。 2. 细胞染色时，注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。 3. 血脑屏障通透性实验中，伊文思蓝染色液注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。 4. 最好采用低温冷冻离心机进行离心。 5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
GoldView II型核酸染色剂(10000×)1ml
基本售价：160.00元
GoldView II Nuclear Staining Dyes(10000×)【保存条件】 4℃长期保存，短期室温保存 【概述】 GoldViewⅡ是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测 DNA 时，可与核酸结合后能产生很强的荧光信号。 【操作方法】 1. 琼脂糖凝胶中添加 GoldViewⅡ： 根据需要配制适当浓度(例如 1-3%)的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后，适当冷却但又不会使琼脂糖凝固时，按照每 100ml 胶液加入 10µl GoldViewⅡ (比例 10000:1)。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。适当量的 DNA 或 RNA 在该胶中电泳后，用约 500nm 波长蓝光激发或相应的凝胶成像系统检测(也可以使用常规的紫外灯或紫外凝胶成像检测系统)，就可以观察到明亮的核酸条带。 2. 电泳完毕后对琼脂糖凝胶染色： 按照每 100ml 的 100mM NaCl 溶液或水中加入 10µl GoldViewⅡ，配制成染色工作液。把电泳完毕的琼脂糖凝胶放到适当的容器中，加入适量上述配制好的 GoldViewⅡ染色工作液，确保至少盖住凝胶。在摇床上缓慢摇动(30-50rpm)染色 20-30 分钟。染色的时间根据胶的厚度而定，胶厚则染色时间需要长一些，胶薄则染色时间可以短一些。染色完毕后，在紫外灯下即可观察核酸条带。 【注意事项】 1. GoldViewⅡ不属于有毒有害物质，并通过了环境安全相关测试，相关废弃物无需特殊处理，可参考常规化学试剂进行处理。 2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。 3. GoldViewⅡ相对 EB 毒性较小，但为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
氯化钠溶液(5mol/L,无菌)
基本售价：90.00元
产品中文名称：氯化钠溶液(5mol/L,无菌)产品英文名称：Sodium Chloride Solution, 5mol/L，Sterilize运输条件：常温运输
氯化钾溶液(3mol/L)100ml
基本售价：65.00元
产品中文名称：氯化钾溶液(3mol/L)产品英文名称：Potassium Chloride Solution, 3mol/L运输条件：常温运输
氯化钙溶液(2.5mol/L,无菌)
基本售价：140.00元
Calcium Chloride Solution, 2.5mol/L, Sterilize产品中文名称：氯化钙溶液(2.5mol/L,无菌)产品英文名称：Calcium Chloride Solution, 2.5mol/L, Sterilize运输条件：常温运输
免疫染色通透液(Saponin)
基本售价：50.00元
Immunostaining Permeabilization Buffer with Saponin【保存条件】 4℃避光保存，有效期 6 个月，更长保存时间可选择-20℃分装保存。 【概述】 10%(W/V)过硫酸铵溶液常用于 PAGE 胶的配制。其在室温下不稳定，不建议长期放置于室温。-20℃分装保存可最大限度保证后续产品使用效果。 【注意事项】 1. PAGE 胶凝聚的速度与温度及光照关系密切，可通过适当调节 APS 的用量，控制在不同的环境下凝胶凝聚的速度。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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