产品描述一步定向克隆试剂盒是一款简单、快速、高效的多片段DNA定向克隆产品,可以不依赖于连接酶,不受载体和目的片段的酶切位点限制,直接用同源重组的方法将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点,完成目的片段与载体相连接的基因克隆技术。该技术操作简单,PCR产物一步定向克隆,目的片段与载体无缝连接,反应时间短至10分钟,阳性率达到95%以上,让您轻松完成实验。保存条件收到后请立即低速离心保存在-20℃;此Kit可在-20℃长期保存,避免反复冻融。
产品描述一步定向克隆试剂盒是一款简单、快速、高效的多片段DNA定向克隆产品,可以不依赖于连接酶,不受载体和目的片段的酶切位点限制,直接用同源重组的方法将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点,完成目的片段与载体相连接的基因克隆技术。该技术操作简单,PCR产物一步定向克隆,目的片段与载体无缝连接,反应时间短至10分钟,阳性率达到95%以上,让您轻松完成实验。保存条件收到后请立即低速离心保存在-20℃;此Kit可在-20℃长期保存,避免反复冻融。
产品描述第一链cDNA合成预混液是以mRNA或者总RNA为模板,高效合成第一链cDNA。本产品含有反转录反应所需的全部试剂(NovoScript® II Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,Oligo(dT)18,Random N6,dNTPs)。反应时只需要加入RNA模板和水即可,操作简单,降低操作过程中的污染。制品中含有去基因组成分gDNA Purge,以RNA为模板进行cDNA第一链合成时,可以同步去除基因组DNA污染,反应结束后,75℃加热5分钟,就可以失活反转录酶,RNA酶抑制剂。合成的第一链cDNA能直接用于PCR或荧光定量PCR的模板,第二链cDNA的合成或线性RNA扩增,也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。产品特点1)本制品采用耐高温逆转录酶,大幅提高热稳定性和cDNA合成效率;2)本制品中添加的NovoScript® II Reverse Transcriptase无RNase H活性,可避免第一链cDNA合成过程中,RNA/DNA杂交模板链中RNA降解,保证cDNA合成的质量;3)本制品中Random N6和Oligo(dT)18引物比例经过优化,可均匀合成样品中的cDNA;4)本制品中含有去基因组成分,逆转录时可同步去除基因组DNA污染。保存条件-20℃。注意事项1)用DEPC处理实验用到的所有实验器材,或者购买已经证明无核酸酶的实验用具,实验过程戴手套并经常更换手套,避免RNA酶的污染。2)确保所用试剂中无RNA酶污染。3)试剂盒要严格密封保存。在逆转录过程中,所有管子要确保扣严。4)纯化过的RNA必须保证不含有盐,金属离子,乙醇和苯酚,以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。5)为保证逆转录反应的有效进行,需使用高质量的RNA模板。6)当模板含量较低或后续PCR扩增片段过长时可以适当延长逆转录时间。7)2×NovoScript® Plus 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix、gDNA Purge及2×NovoScript® Plus No RT Control含有甘油,使用前请充分混匀后并短暂离心收集至管底再进行使用。仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。
产品描述第一链cDNA合成预混液是以mRNA或者总RNA为模板,高效合成第一链cDNA。本产品含有反转录反应所需的全部试剂(NovoScript® II Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,Oligo(dT)18,Random N6,dNTPs)。反应时只需要加入RNA模板和水即可,操作简单,降低操作过程中的污染。制品中含有去基因组成分gDNA Purge,以RNA为模板进行cDNA第一链合成时,可以同步去除基因组DNA污染,反应结束后,75℃加热5分钟,就可以失活反转录酶,RNA酶抑制剂。合成的第一链cDNA能直接用于PCR或荧光定量PCR的模板,第二链cDNA的合成或线性RNA扩增,也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。产品特点1)本制品采用耐高温逆转录酶,大幅提高热稳定性和cDNA合成效率;2)本制品中添加的NovoScript® II Reverse Transcriptase无RNase H活性,可避免第一链cDNA合成过程中,RNA/DNA杂交模板链中RNA降解,保证cDNA合成的质量;3)本制品中Random N6和Oligo(dT)18引物比例经过优化,可均匀合成样品中的cDNA;4)本制品中含有去基因组成分,逆转录时可同步去除基因组DNA污染。保存条件-20℃。注意事项1)用DEPC处理实验用到的所有实验器材,或者购买已经证明无核酸酶的实验用具,实验过程戴手套并经常更换手套,避免RNA酶的污染。2)确保所用试剂中无RNA酶污染。3)试剂盒要严格密封保存。在逆转录过程中,所有管子要确保扣严。4)纯化过的RNA必须保证不含有盐,金属离子,乙醇和苯酚,以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。5)为保证逆转录反应的有效进行,需使用高质量的RNA模板。6)当模板含量较低或后续PCR扩增片段过长时可以适当延长逆转录时间。7)2×NovoScript® Plus 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix、gDNA Purge及2×NovoScript® Plus No RT Control含有甘油,使用前请充分混匀后并短暂离心收集至管底再进行使用。仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。
产品描述本制品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。预混液中已经将DNA聚合酶、精心优化的反应Buffer、dNTPs、SYBR Green I等试剂预混在一起,是一种2×浓度的预混型试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分简单方便。本制品使用新型抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶,并结合精心优化的反应Buffer,具有更高的扩增灵敏度,反应特异性和扩增效率,能够在更宽广的范围内进行准确定量。产品特点高灵敏度:Novoprotein精心配制的RealTime PCR专用2×SuperMix,具有更高的扩增灵敏度和扩增效率。高特异性:采用新型工艺制备抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶,无需热启动即可进行PCR反应,大大提高PCR扩增的特异性。快捷:PCR反应所必需试剂集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。保存条件-20℃避光储存。如需在一段时间内经常取用,可在2~8℃条件下储存3个月。避免反复多次冻融。质量控制纯度检测:所有组分经检测均无核酸内切酶残留、核酸外切酶残留、核酸残留。使用建议使用:请上下颠倒轻轻混合均匀,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,避免污染。建议反应体积为20~50μl。引物设计:一般为了增加灵敏度及扩增效率且抑制非特异性反应,扩增目标序列越短越好。建议设计成200bp以下。仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。
产品描述本制品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。预混液中已经将DNA聚合酶、精心优化的反应Buffer、dNTPs、SYBR Green I等试剂预混在一起,是一种2×浓度的预混型试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分简单方便。本制品使用新型抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶,并结合精心优化的反应Buffer,具有更高的扩增灵敏度,反应特异性和扩增效率,能够在更宽广的范围内进行准确定量。产品特点高灵敏度:Novoprotein精心配制的RealTime PCR专用2×SuperMix,具有更高的扩增灵敏度和扩增效率。高特异性:采用新型工艺制备抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶,无需热启动即可进行PCR反应,大大提高PCR扩增的特异性。快捷:PCR反应所必需试剂集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。保存条件-20℃避光储存。如需在一段时间内经常取用,可在2~8℃条件下储存3个月。避免反复多次冻融。质量控制纯度检测:所有组分经检测均无核酸内切酶残留、核酸外切酶残留、核酸残留。使用建议使用:请上下颠倒轻轻混合均匀,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,避免污染。建议反应体积为20~50μl。引物设计:一般为了增加灵敏度及扩增效率且抑制非特异性反应,扩增目标序列越短越好。建议设计成200bp以下。仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。
产品描述本制品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。预混液中已经将DNA聚合酶、精心优化的反应Buffer、dNTPs、SYBR Green I等试剂预混在一起,是一种2×浓度的预混型试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分简单方便。本制品使用新型抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶,并结合精心优化的反应Buffer,从而有效抑制低温下的非特异性扩增,提高反应特异性和扩增效率,能够在更宽广的范围内进行准确定量。产品特点高特异性:采用新型工艺制备抗体修饰的HotStart Taq DNA聚合酶,无需热启动即可进行PCR反应,大大提高PCR扩增的特异性。高效:Novoprotein精心配制的RealTime PCR专用2×SuperMix,具有更高的扩增效率和扩增灵敏度。快捷:PCR反应所必需试剂集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。保存条件-20℃避光储存。如需在一段时间内经常取用,可在2~8℃条件下储存3个月。避免反复多次冻融。质量控制纯度检测:所有组分经检测均无核酸内切酶残留、核酸外切酶残留、核酸残留。使用建议使用:请上下颠倒轻轻混合均匀,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,避免污染。建议反应体积为20~50μl。引物设计:一般为了增加灵敏度及扩增效率且抑制非特异性反应,扩增目标序列越短越好。建议设计成200bp以下。仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。
产品描述本制品是采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行快速 Real Time PCR 的 2×浓度预混型试剂,PCR 反应液的配制十分简单方便。本制品使用突变型 Taq DNA 聚合酶,结合精心优化的反应 Buffer,可有效抑制低温下的非特异性扩增,实现快速 PCR 反应,并且能够在宽广的范围内对靶基因进行准确、快速、可重复的定量检测。产品特点快速:实现快速荧光定量,相较于传统 qPCR,反应时间减少 50%左右;保存条件-20℃避光储存,避免反复冻融。使用建议使用:请上下颠倒轻轻混合均匀,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,避免污染。建议反应体积为20~50μl。仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。Novoprotein是苏州近岸蛋白质科技股份有限公司的注册商标。请访问我们的注册商标页面。其他商标是其他所有者的财产。
产品描述本制品是采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行快速 Real Time PCR 的 2×浓度预混型试剂,PCR 反应液的配制十分简单方便。本制品使用突变型 Taq DNA 聚合酶,结合精心优化的反应 Buffer,可有效抑制低温下的非特异性扩增,实现快速 PCR 反应,并且能够在宽广的范围内对靶基因进行准确、快速、可重复的定量检测。产品特点快速:实现快速荧光定量,相较于传统 qPCR,反应时间减少 50%左右;保存条件-20℃避光储存,避免反复冻融。使用建议使用:请上下颠倒轻轻混合均匀,避免起泡,并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,避免污染。建议反应体积为20~50μl。仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。Novoprotein是苏州近岸蛋白质科技股份有限公司的注册商标。请访问我们的注册商标页面。其他商标是其他所有者的财产。
产品描述Cleavage Under Target & Tagmentation (CUT&Tag®)是一种新兴的DNA-蛋白质互作研究方法。CUT&Tag® 以融合了protein A/G 的Tn5 转座酶为核心,融合蛋白通过protein A/G 与抗体结合,使得Tn5 被栓系在靶位点周围,从而在目的位点附近进行酶切反应,并同时引入二代测序所必需的接头序列,产物DNA 经过后续提取与PCR 扩增后,得到直接用于测序的文库。CUT&Tag®与传统的ChIP-Seq 技术相比较,实验不需要超声打断,也不需要传统的连接法添加测序接头,操作简单、周期短、信噪比高、重复性好、细胞用量少,为极低起始细胞量和单细胞测序研究提供了可能性。自 2019 年 CUT&Tag 技术诞生以来,经过大量的实践,发现该技术在组蛋白修饰及部分转录因子与 DNA 互作研究中可以获得高信噪比的结果,但是针对一些与 DNA 结合力较弱或者结合具有高度动态性的 DNA 结合蛋白,较难得到理想的实验结果。针对此问题,近岸蛋白开发了可对细胞进行高浓度甲醛交联的CUT&Tag实验流程。为转录因子 -DNA 互作研究提供一种新的思路,这种需要甲醛交联的CUT&Tag实验被称为fcCUT&Tag(formaldehyde crosslinking CUT&Tag)。NovoNGS® CUT&Tag® 4.0 High-Sensitivity Kit (for Illumina)试剂盒包含常规非交联细胞CUT&Tag及甲醛交联细胞fcCUT&Tag实验中所需的各种缓冲液、ConA磁珠、DNA纯化磁珠、引物等全套建库试剂,可以用于组蛋白修饰和转录因子的染色质结合状态研究。与传统的CUT&Tag试剂盒相比,该试剂盒既可以对自然状态的细胞进行蛋白质-DNA互作研究,也可以对高浓度甲醛交联的细胞进行蛋白质-DNA互作研究,一盒两用。试剂盒包含CUT&Tag® 实验中孵育抗体、转座体、构建文库的相关试剂,可以用于组蛋白修饰和转录因子的染色质结合状态研究。本试剂盒包含高活性的ChiTag® pAG-Tn5, 相较于最初版本的pA-Tn5 转座酶,pAG结构域对兔、鼠等多种来源抗体具有广谱的强亲和性,在实验抗体的选择上具有更大的空间。针对CUT&Tag®打断产物DNA 提取过程中小片段丢失的问题,本试剂盒提供优化的Tagment DNA Extract Beads, 相较于常规的片段分选磁珠可以完整的回收CUT&Tag® 产物中的小片段DNA, 大大简化了酚氯仿-乙醇沉淀法的繁琐操作。此外,本试剂盒还提供了阳性抗体H3K4me3(兔抗)以及相应的二抗(羊抗兔IgG) ,用于阳性对照实验(仅B 包装提供阳性抗体)。图1: DNA-Target Protein-Antibody-ChiTag®结合示意图 图2: CUT&Tag 实验流程简图 产品用途DNA-蛋白质互作研究。在常见的哺乳动物细胞上用于替代传统的ChIP-Seq 技术,特别适用于细胞数量较少的样本,也可应用于经过处理的植物和酵母样本上。保存条件详见说明书仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。
产品描述Cleavage Under Target & Tagmentation (CUT&Tag®)是一种新兴的DNA-蛋白质互作研究方法。CUT&Tag® 以融合了protein A/G 的Tn5 转座酶为核心,融合蛋白通过protein A/G 与抗体结合,使得Tn5 被栓系在靶位点周围,从而在目的位点附近进行酶切反应,并同时引入二代测序所必需的接头序列,产物DNA 经过后续提取与PCR 扩增后,得到直接用于测序的文库。CUT&Tag®与传统的ChIP-Seq 技术相比较,实验不需要超声打断,也不需要传统的连接法添加测序接头,操作简单、周期短、信噪比高、重复性好、细胞用量少,为极低起始细胞量和单细胞测序研究提供了可能性。自 2019 年 CUT&Tag 技术诞生以来,经过大量的实践,发现该技术在组蛋白修饰及部分转录因子与 DNA 互作研究中可以获得高信噪比的结果,但是针对一些与 DNA 结合力较弱或者结合具有高度动态性的 DNA 结合蛋白,较难得到理想的实验结果。针对此问题,近岸蛋白开发了可对细胞进行高浓度甲醛交联的CUT&Tag实验流程。为转录因子 -DNA 互作研究提供一种新的思路,这种需要甲醛交联的CUT&Tag实验被称为fcCUT&Tag(formaldehyde crosslinking CUT&Tag)。NovoNGS® CUT&Tag® 4.0 High-Sensitivity Kit (for Illumina)试剂盒包含常规非交联细胞CUT&Tag及甲醛交联细胞fcCUT&Tag实验中所需的各种缓冲液、ConA磁珠、DNA纯化磁珠、引物等全套建库试剂,可以用于组蛋白修饰和转录因子的染色质结合状态研究。与传统的CUT&Tag试剂盒相比,该试剂盒既可以对自然状态的细胞进行蛋白质-DNA互作研究,也可以对高浓度甲醛交联的细胞进行蛋白质-DNA互作研究,一盒两用。试剂盒包含CUT&Tag® 实验中孵育抗体、转座体、构建文库的相关试剂,可以用于组蛋白修饰和转录因子的染色质结合状态研究。本试剂盒包含高活性的ChiTag® pAG-Tn5, 相较于最初版本的pA-Tn5 转座酶,pAG结构域对兔、鼠等多种来源抗体具有广谱的强亲和性,在实验抗体的选择上具有更大的空间。针对CUT&Tag®打断产物DNA 提取过程中小片段丢失的问题,本试剂盒提供优化的Tagment DNA Extract Beads, 相较于常规的片段分选磁珠可以完整的回收CUT&Tag® 产物中的小片段DNA, 大大简化了酚氯仿-乙醇沉淀法的繁琐操作。此外,本试剂盒还提供了阳性抗体H3K4me3(兔抗)以及相应的二抗(羊抗兔IgG) ,用于阳性对照实验(仅B 包装提供阳性抗体)。图1: DNA-Target Protein-Antibody-ChiTag®结合示意图图2: CUT&Tag 实验流程简图产品用途DNA-蛋白质互作研究。在常见的哺乳动物细胞上用于替代传统的ChIP-Seq 技术,特别适用于细胞数量较少的样本,也可应用于经过处理的植物和酵母样本上。保存条件详见说明书仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。Novoprotein是苏州近岸蛋白质科技股份有限公司的注册商标。请访问我们的注册商标页面。其他商标是其他所有者的财产。
产品介绍 EasyFusion Assembly Master Mix 是一种快速、简单且高效的定向同源重组克隆试剂盒,可将目的片段一个或多个 (PCR 产物)定向克隆到任意载体的任意位置。该技术不依赖于 T4 连接酶、不受载体和目的片段的酶切位点限制, 仅需 15-30 分钟实现高效无缝连接。 操作步骤 1.线性化载体准备 可以通过以下两种方法获得线性化载体,最终载体的浓度需>10 ng/μl。(高浓度的载体有利于提高效率)。 (1)选择合适的酶切位点线性化载体。(单酶切或双酶切均可, 5´端突出、3´端突出或平末端均适用) (2)以载体为模板,设计引物,通过 PCR 的方式扩增出需要的线性化载体 2.扩增插入片段引物设计 通常通过 PCR 获得目的片段,引物设计要保证目的片段两端有至少 15bp-20bp 序列与线性化载体的两端一致的 同源序列。PCR 每条引物长度至少在 35-40bp 之间,包括 5´ 端和 3´端与线性载体同源的 15bp-20bp(不包括酶 切位点)以及目的片段特异性序列 20-25bp。 (1)单个片段的引物设计: 引物包含目的基因特异性序列和重叠序列 插入片段正向扩增引物设计方式为: 5´-上游载体末端 15-20bp 同源序列+目的基因特异性正向扩增引物序列(20-25bp)-3´ 插入片段反向扩增引物设计方式为: 5´-下游载体末端 15-20bp 同源序列+目的基因特异性正向扩增引物序列(20-25bp)-3´ 设计引物时,可以参考以下实例(以 pUC19 线性化载体为例): 3.PCR 扩增插入片段 推荐使用高保真聚合酶进行 PCR 扩增插入片段,以减少扩增突变的产生,选择聚合酶时无需考虑末端有无 A 加尾 发生(重组过程中将会被去除,在最终载体中不会出现)。PCR 扩增结束后,对目的 PCR 产物进行纯化:若是扩增模 板与克隆载体抗性不同,且 PCR 产物条带电泳单一,产物可以无需纯化直接用于重组反应,或者对 PCR 产物进行脱盐 等简单纯化;否则,需要进行琼脂糖凝胶电泳回收特异性的目的 PCR 片段。 4.重组反应进行 取出 EasyFusion Assembly Master mix, 置于冰浴中,配制下图应体系(如果不慎将液体粘在管壁,可通过短暂离心沉降) 注意:10 ul 反应体系中,载体和各插入片段建议量在 20-50ng 之间,载体与各插入片段的最佳摩尔比为 1:2-1:3 轻轻混匀反应体系,50℃反应 15-30 分钟(对于多片段重组或大片段重组,建议反应时间 30 分钟,可延长反应时 间至 1 小时);待反应结束后,将离心管置于冰上冷却数秒,之后将重组产物保存于-20℃或用于转化。 5. 反应产物转化、涂板及克隆鉴定 建议所使用的感受态细胞效率要达到> 5X 107 cfu/ug。转化步骤按照不同菌种的要求进行或者按标准转化操作 进行即可。菌落长出之后,建议采用菌落 PCR 进行阳性克隆鉴定,或者对样品进行测序确保正确。 保存条件及组成成分 -20℃保存及冰袋运输 组成成分:2X EasyFusion Assembly Master Mix , 125ul; Linearized pUC19 Vector (10ng/ul),5ul;Control Insert(0.5kb, 20ng/ul),5ul 注意事项 1. 线性化载体或目的片段的纯化的品质及浓度等较差会显著降低克隆阳性率及克隆数。 2. 重组质粒大小的增加(>12kb),克隆效率会显著降低,选择稳定性更好的感受态及转化效率更高效的感受态细胞。 3. 菌落较少时,建议适当增加重组反应产物的体积量,或者提高转化产物量等。 4. 随着重组片段数目的增加,克隆效率降低,建议增加引物重叠序列长度或适当延长反应时间。
产品介绍 本试剂盒可以快速从细胞、细菌和动物组织中提取总RNA。本产品中裂解液(RLT Lysis Bufer)可以快速裂解细胞和灭活RNA酶,通过DNA清除/RNA吸附通用柱吸附技术,去除基因组DNA残留,同时在乙醇辅助结合条件下,高效地结合在吸附柱的硅胶膜上,再经过多次的洗涤离心后,去除细胞代谢物和蛋白质等杂质,获得纯净的总RNA。纯化的RNA可用于RT-PCR,NorthernBlotPoly(A)+筛选等多种实验。 产品亮点 安全性高:无需使用苯酚,氯仿等试剂,无需乙醇沉淀 使用范围广:对细胞、细菌、动物组织提取均适用 操作简单快速:全程室温操作,10-20分钟可完成纯化步骤 提取纯度高:经多次柱吸附和洗涤,基因组DNA和蛋白质污染低 首次使用前,在漂洗液 RWB Wash Buffer 中加入标签指定量的无水乙醇(5 preps/50 preps分别加入 4.8 ml/48 ml 无水乙醇),充分混匀后使用,并做好标记。 *注意观察各溶液是否有析出或浑浊(尤其冬季低温环境时),可 37℃温浴复溶至溶液澄清,避免影响使用效果。 运输和保存方式 常温运输,室温避光保存,有效期 12 个月。2-4°C 可保存更长时间
产品介绍 TRnaZol Reagent 适用于快速、直接从多种组织和细胞中提取总 RNA 的一种广谱型试剂。TRnaZol Reagent 内含优化的异硫氰酸胍、酸性酚等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶,最大 限度地裂解样品且同时保证 RNA 的完整性。加入 RNA Extraction Buffer 离心后,溶液会分成三层:上 层无色水相、中间层和下层红色有机相,其中 RNA 分布在上清无色水相中。本试剂操作快速方便,颜 色分明,提取的总 RNA 完整性好,纯度高,无蛋白和 DNA 的污染,可用于各种分子生物学实验,如 RT-PCR、Real-time PCR、Dot Blot、Northern 等。 产品特色 ✔ 安全性高:使用 RNA Extraction Buffer 替代氯仿 ✔ 使用范围广:对人、动物、植物和细菌组织提取均适用 ✔ 颜色分明:溶液呈粉红色,便于分离水相和有机相 ✔ 提取纯度高:DNA 和蛋白质污染最低,可用于多种下游实验 产品介绍 TRnaZol Reagent 适用于快速、直接从多种组织和细胞中提取总 RNA 的一种广谱型试剂。TRnaZol Reagent 内含优化的异硫氰酸胍、酸性酚等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶,最大 限度地裂解样品且同时保证 RNA 的完整性。加入 RNA Extraction Buffer 离心后,溶液会分成三层:上 层无色水相、中间层和下层红色有机相,其中 RNA 分布在上清无色水相中。本试剂操作快速方便,颜 色分明,提取的总 RNA 完整性好,纯度高,无蛋白和 DNA 的污染,可用于各种分子生物学实验,如 RT-PCR、Real-time PCR、Dot Blot、Northern 等。 产品特色 ✔ 安全性高:使用 RNA Extraction Buffer 替代氯仿 ✔ 使用范围广:对人、动物、植物和细菌组织提取均适用 ✔ 颜色分明:溶液呈粉红色,便于分离水相和有机相 ✔ 提取纯度高:DNA 和蛋白质污染最低,可用于多种下游实验 组成成分及保存条件
产品介绍 NCM Western Blot Stripping Buffer(蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液)是新赛美生物生产的用于去除结合在印迹膜(PVDF膜或NC膜)上的一抗和二抗的洗涤液。该产品作用温和,不含有毒有味的巯基乙醇,在不影响目的蛋白的情况下,可使同一张印迹膜进行多次抗体检测。省去反复电泳和转膜等步骤,节省样品及时间,加快Western Blot检测实验。 产品特色 Ø 独有的配方,去除抗体效力强 Ø 对蛋白作用温和,不影响目的蛋白 Ø 不含有巯基乙醇,无毒无味,室温条件下使用保存 Ø 适用PVDF膜和NC膜,加速抗体检测 操作步骤 1. 将曝光结束的蛋白印迹膜充分浸入适当体积的NCM Western BlotStripping Buffer(蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液)中,抗体剥离液要充分覆盖膜的表面,在脱色摇床上,室温中速震荡孵育10分钟,弃去剥离液。 2. (可选)重复步骤1。(对于信号正常或较弱的印迹膜也可以不必重复步骤1,如果是内参等表达量高的蛋白,可以重复步骤1三次,以保证彻底去除了抗体。) 3. 每用镊子取出印迹膜,加入洗涤缓冲液TBST或PBST,在脱色摇床上中速震荡洗涤3次,每次5分钟。 4. (可选)通过显色曝光等方法检测抗体是否去除,如检测到信号,需重复步骤1,确保抗体被除尽。 5. 对印迹膜重新进行封闭,进入下一轮Western Blot 实验。 保存条件 室温保存,运输,一年有效 注意事项 1. 建议先检查表达量低的蛋白,再用NCM Western Blot Stripping Buffer处理印迹膜后,检测表达量高的蛋白; 2. 本品适用于NC膜和PVDF膜,推荐使用PVDF膜,效果更佳; 3. 为了安全和健康,请穿实验服,戴手套操作
产品介绍 NCM Western Blot Stripping Buffer(蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液)是新赛美生物生产的用于去除结合在印迹膜(PVDF膜或NC膜)上的一抗和二抗的洗涤液。该产品作用温和,不含有毒有味的巯基乙醇,在不影响目的蛋白的情况下,可使同一张印迹膜进行多次抗体检测。省去反复电泳和转膜等步骤,节省样品及时间,加快Western Blot检测实验。 产品特色 Ø 独有的配方,去除抗体效力强 Ø 对蛋白作用温和,不影响目的蛋白 Ø 不含有巯基乙醇,无毒无味,室温条件下使用保存 Ø 适用PVDF膜和NC膜,加速抗体检测 操作步骤 1. 将曝光结束的蛋白印迹膜充分浸入适当体积的NCM Western BlotStripping Buffer(蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液)中,抗体剥离液要充分覆盖膜的表面,在脱色摇床上,室温中速震荡孵育10分钟,弃去剥离液。 2. (可选)重复步骤1。(对于信号正常或较弱的印迹膜也可以不必重复步骤1,如果是内参等表达量高的蛋白,可以重复步骤1三次,以保证彻底去除了抗体。) 3. 每用镊子取出印迹膜,加入洗涤缓冲液TBST或PBST,在脱色摇床上中速震荡洗涤3次,每次5分钟。 4. (可选)通过显色曝光等方法检测抗体是否去除,如检测到信号,需重复步骤1,确保抗体被除尽。 5. 对印迹膜重新进行封闭,进入下一轮Western Blot 实验。 保存条件 室温保存,运输,一年有效 注意事项 1. 建议先检查表达量低的蛋白,再用NCM Western Blot Stripping Buffer处理印迹膜后,检测表达量高的蛋白; 2. 本品适用于NC膜和PVDF膜,推荐使用PVDF膜,效果更佳; 3. 为了安全和健康,请穿实验服,戴手套操作
产品介绍 新赛美生物的磷酸酶抑制剂混合液(ProtLytic Phosphatase Inhibitor Cocktail)是经优化好的多种 磷酸酶抑制剂的混合物组成的,是一种广谱的抑制剂混合物,在抽提和纯化蛋白时能够 有效防止蛋白被内源性的磷酸酶降解。成分主要含有 sodium fluoride,sodium orthovanadate,Sodium Pyrophosphate,β-glycerophosphate,Imidazole 等多种抑制剂, 主要抑制酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、ATP 酶等,用于蛋白纯化,蛋白免疫印迹, 免疫共 沉淀,免疫荧光,免疫组织化学,激酶测定等研究。 操作步骤 将磷酸酶抑制剂混合液,根据实验体系的需求,按照 1:100 的比率将其加入到样品 溶液中(如组织抽提物或细胞裂解物)。 保存条件 4 ℃保存,冰袋运输,至少 1 年有效; 注意事项 1. 磷酸酶抑制剂会损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危 险 2. 不同样品中含有的磷酸酶量及种类不同,可根据具体实验调整加入磷酸酶抑制剂混合液 的量,如加入 2 倍,3 倍等量,才能有效抑制内源性磷酸酶的作用 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴防护手套操作
产品介绍 新赛美生物的蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合液(Protease and PhosphataseInhibitor Cocktail) 是经优化好的多种蛋白酶和磷酸酶抑制剂的混合物组成的,仅用一种溶液即可方便地完 成在抽提和纯化蛋白时,能够有效防止蛋白被内源性的蛋白酶和磷酸酶的降解。成分含 有 Aprotinin,Bestatin,Leupetin,Pepstatin,PMSF,NaF,Sodium Orthovanadate,Sodium Pyrophosphate 等多种蛋白酶和磷酸酶家族的抑制剂,主要抑制氨基肽酶、半胱氨酸和 丝氨酸蛋白酶、丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸蛋白酶和磷酸酶、蛋白酪氨酸磷酸酶、碱性磷 酸酶、酸性磷酸酶等,用于蛋白纯化,蛋白免疫印迹, 免疫共沉淀,免疫荧光,免疫组 织化学,激酶测定等研究。 操作步骤 在室温下溶解含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合液,混匀之后,根据实验体系的需求, 按照 1:100 的比率将抑制剂混合液加入到样品溶液中(如组织抽提物或细胞裂解物)。 保存条件 -20 ℃保存,冰袋运输,至少 1 年有效; 注意事项 1. 蛋白酶和磷酸酶抑制剂严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收 后有致命危险; 2. 不同样品中含有的蛋白酶和磷酸酶的量及种类不同,可根据具体实验调整加入抑制剂混 合液的量,如加入 2 倍,3 倍等量,才能有效抑制内源性蛋白酶和磷酸酶的作用 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴防护手套操作
产品介绍 RIPA 即 Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液。新赛美生物的 RIPA 裂解液裂解所得的蛋白样品可以用于常规的 Western、IP 等。主要成分是:50mMTris(pH 7.6),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodiumdeoxycholate,0.1% SDS 等多种裂解剂和抑制剂,能有效地抑制蛋白 降解。 操作步骤 对于培养细胞样品: 1. 取适当量的NCM RIPA Buffer 裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。 注意:NCM RIPA Buffer 不含蛋白酶等抑制剂,根据需要在使用前添加蛋白酶,磷酸酶等抑制剂。 2. a.对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有 干扰,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使 裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞 1-2 秒后,细胞就会被裂解。 b. 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。 如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。 对于组织样品: 1. 把组织剪切成细小的碎片。 2. 融解 RIPA 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入 PMSF,使 PMSF 的最终浓 度为 1mM。 3. 按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加 更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量) 4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。 5. 充分裂解后,10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、Western 和免疫沉淀 等操作。 6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈涡旋使样品裂解 充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点 是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。 保存条件 4℃保存,室温运输,1 年有效; 注意事项: 1.RIPA 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因 组 DNA 等的复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清 用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明 胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如 NFκB、p53 等时,通 常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。 2.为获得最佳的实验效果,可适当分装使用,以尽量避免反复冻融。 3.PMSF 应现用现加,需自备 PMSF。 4.裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。 5.蛋白酶抑制剂均有较高的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦 直接接触,请立即用流水冲洗,再向医疗保健结构咨询。