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柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×)
基本售价：100.00元
Citrate-EDTA Antigen Retrieval Solution,40× 【保存条件】 4℃或-20℃保存，一年有效【概述】 1. 柠檬酸钠-EDTA 抗原修复液(Citrate-EDTAAntigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液，结合了柠檬酸钠和 EDTA 进行抗原修复的优点，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。2. 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。抗原修复液采用了常用的柠檬酸钠缓冲液和 EDTA，结合了两者修复抗原的优点，并经过适当优化，可以更加有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。【操作方法】 1. 对于石蜡切片： a. 脱蜡：切片在二甲苯中脱蜡 5 分钟，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡 3 次。无水乙醇 5 分钟，两次。90%乙醇 5 分钟，两次，70%乙醇 5 分钟，一次。蒸馏水 5 分钟，两次。b. 抗原修复：用重蒸水或 Milli-Q 水将本抗原修复液(40×)稀释 40 倍，配制成抗原修复液(1×)，例如 1ml本抗原修复液(40X)加入 39ml 重蒸水或 Milli-Q 水，混合均匀，即得 40ml 抗原修复液(1×)。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约 20 分钟(加热时间可以控制在 10-30 分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次，每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。2. 对于冰冻切片： 3. 用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，95-100℃加热约 20 分钟(加热时间可以控制在 10-30 分钟内，最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次，每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。4. 对于其它样品的抗原修复：可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。【注意事项】 1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 冻存的本产品需适当加热后才能完全溶解。同时由于本产品含有少量的特殊去垢剂，加热后会产生非常细密的气泡而呈现非常均匀的类似浑浊状，属于正常现象，并非不溶解或产生了沉淀。室温放置较长时间后，例如 1-2 天，溶液会完全澄清。对于溶解后呈现非常均匀的类似浑浊状的本产品，此时即可取适量稀释后使用。抗原修复过程中加热时也会产生非常细密的气泡而呈现均匀的浑浊状，也属于正常现象，请放心使用。3. 本抗原修复液使用前必须用重蒸水或 Milli-Q 水稀释 40 倍，配制成抗原修复液(1X)。
多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml)
基本售价：258.00元
Poly-L-lysine Solution, 1mg/ml【保存条件】 -20℃保存，有效期 2 年。 【概述】 Poly-L-lysine 的中文名为多聚赖氨酸，简称 PLL。本 Poly-L-lysine 为 Poly-L-lysinehydrobromide，分子式为 L-Lys-(L-Lys)n-LLys· xHBr，分子量为 150,000-300,000，CAS Number25988-63-0。 多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂，该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要，细胞表面的糖蛋白（阴性）易于吸附在亲水性的表面上，因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性电荷更能促进细胞吸附，这正是运用多聚赖氨酸优化细胞培养表面的重要所在。 多聚赖氨酸溶液适用于组织学、免疫组织化、冰冻切片、细胞涂片、原位杂交等使用的玻片的防脱片处理，以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养，增加细胞贴壁能力。 本产品未经除菌处理，如若用于促进细胞贴壁生长，请自行用 0.22μm 滤膜过滤除菌或选择 ECOTOP 的多聚赖氨酸溶液(10×PLL,1mg/ml,无菌)（货号：ES-8309）。 【使用建议】 用作粘片剂时：通常宜把 Poly-D-lysine 配置成 0.1-1mg/ml 溶液（本产品推荐稀释成 1×使用，即 10ml 1mg/ml 多聚赖氨酸溶液加 90ml 无菌水稀释），随后根据需要把载玻片或盖玻片在多聚赖氨酸溶液中处理 1-10 分钟。随后室温晾干即可使用。 用于促进细胞的贴壁生长时：根据实验需要把多聚赖氨酸配制成适当浓度溶液后即可使用。不同的细胞，多聚赖氨酸铺被(Coating)的时间和浓度有所不同，请自行参考相关文献进行适当的铺被。配制成溶液后可-20℃保存。多聚赖氨酸用于细胞培养时，较为常用的铺被(Coating)浓度为 0.1mg/ml，铺被至少 5 分钟，有些实验需要铺被 1-2 小时，有些情况则需要铺被过夜。随后吸除多聚赖氨酸溶液，干燥培养器皿，至肉眼观察完全干燥。通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，对于有些实验则需要干燥 2 小时或更长时间。干燥时间较长通常会更加有利于后续的细胞粘附。随后即可直接进行细胞培养，也可以用水、PBS 或培养液等适当溶液润洗后再进行细胞培养。 【注意事项】 1. 第一次使用本试剂时建议先取 1～2 个样品做预实验。 2. Poly-L-lysine 和 Poly-D-lysine 都可以用于促进细胞的贴壁生长。Poly-L-lysine 可以被某些细胞所消化并吸收，摄入过多的 Poly-L-lysine 会产生一定的细胞毒性。如果遇到Poly-L-lysine 有细胞毒性的情况，可以考虑选购 Poly-D-lysine。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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