pH Buffer Solution(pH 4.00)【保存条件】 室温保存,有效期 1 年,4℃保存可延长有效期。 【概述】 pH 校准液的 pH 值是已知的,并达到规定的准确度,其 pH 值有良好的复现性和稳定性,具有较大的缓冲容量,较小的稀释值和较小的温度系数。该 pH 校准液常用于 pH 计的定位和斜率校准,其 pH 值准确度范围在±0.01。pH 4.00 校准液是特指在 25℃下,pH=4.00。 【注意事项】 1. 使用过程中应该避免污染。 2. 显示 pH 校准数值时,pH 值会随温度不同而不同,具体如参考附录。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 【附录】 不同温度下,pH 校准液对应的 pH 值:
1M Hepes (Acid Free,Sterile)【保存条件】 4℃保存,有效期 1 年 【概述】 HEPES 即羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N’-a-hydroxythylpiperazine-N’-ethanesulfanic acid )是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的 pH 范围。有效缓冲范围为 pH6.8-8.2。常用于配制蛋白提取缓冲液、细胞培养用缓冲液等。 HEPES 用于细胞培养时使用终浓度为 10-25mM, 在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的 pH 值。ECOTOP 生产的 HEPES 缓冲液均经过无菌处理,可直接用于细胞培养。4℃保存可延长产品保质期,长期不用建议低温保存。 【注意事项】 1. HEPES 溶液在使用过程中应该避免微生物污染。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
1M Hepes缓冲液(pH7.2-7.4)使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-81201M Hepes buffer(pH7.2-7.4,Sterile)100ml/500ml 使用说明书1份【保存条件】4℃保存,有效期1年【概述】HEPES 即羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N’-a-hydroxythylpiperazine-N’-ethanesulfanic acid )是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的 pH范围。有效缓冲范围为pH6.8-8.2。常用于配制蛋白提取缓冲液、细胞培养用缓冲液等。HEPES 用于细胞培养时使用终浓度为 10-25mM, 在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的 pH 值。ECOTOP生产的 HEPES 缓冲液均经过无菌处理,可直接用于细胞培养。4℃保存可延长产品保质期,长期不用建议低温保存。【注意事项】1. HEPES溶液在使用过程中应该避免微生物污染。2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Crystal Violet Staining solution,0.4%【保存条件】 4℃避光储存,有效期 12 个月 【概述】 结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分。革兰阳性菌染色中,细胞经结晶紫染色后再经 Gram 碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。 【使用建议】 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。 涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均匀,涂成薄层。 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动 3~5 次,每次 1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。 初染:滴加结晶紫染色液染色 1-2min,清水冲洗去染色液。 媒染:滴加 Gram 碘液,并覆盖载玻片室温放置 1-2min,水洗。 脱色:滴加脱色液摇动,摇动 10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。 复染:滴加沙黄染色液染色,30~60s,水洗,干燥。 镜检:置油镜观察。 染色结果:革兰氏阳性菌为蓝色至紫色;革兰氏阴性菌为红色。 【注意事项】 1. 涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。 2. 待检细菌培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解,常呈阴性。 3. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。4. 结晶紫对人体有害,请注意适当防护。
Trypan Blue Stain solution,1%【保存条件】 4℃避光储存,有效期 1 年 【概述】 台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝,是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率,是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不会被染成蓝色;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。 台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需 3-5 分钟,操作简单。 【使用建议】 台盼蓝染色常用浓度为 0.04%,该产品使用建议以台盼蓝染色液终浓度为 0.04%为例,如需使用其他终浓度,该使用建议仅供参考。 1. 收集细胞:用胰酶或 EDTA 消化贴壁细胞,悬浮细胞可直接收集。收集细胞时用1000-2000rpm 离心 1 分钟,弃上清,制备单细胞悬液,并做适当稀释。 2. 台盼蓝染色:细胞悬液与 1%台盼蓝溶液以 24:1 比例混匀(终浓度 0.04%),染色 3 分钟 (染色 3 分钟时间已经足够,但染色时间可以更长一些,但不宜超过 10 分钟)。 3. 细胞计数:吸取少量经过染色的细胞,用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。通常要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数 500 个细胞。 细胞存活率(%)=活细胞总数 /(活细胞总数+死细胞总数)×100% 【注意事项】 1. 染色时间不宜过长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。 2. 本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,可在 37℃水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 台盼蓝有潜在致癌风险,请注意适当防护。 4. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 5. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Trypan Blue Stain solution,0.4% 【保存条件】 4℃避光储存,有效期 1 年 【概述】 台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝,是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率,是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不会被染成蓝色;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。 台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需 3-5 分钟,操作简单。 【使用建议】 1. 收集细胞:用胰酶或 EDTA 消化贴壁细胞,悬浮细胞可直接收集。收集细胞时用1000-2000rpm 离心 1 分钟,弃上清,制备单细胞悬液,并做适当稀释。 2. 台盼蓝染色:细胞悬液与 0.4%台盼蓝溶液以 9:1 比例混匀(终浓度 0.04%),染色 3 分钟 (染色 3 分钟时间已经足够,但染色时间可以更长一些,但不宜超过 10 分钟)。 3. 细胞计数:吸取少量经过染色的细胞,用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。通常要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数 500 个细胞。 细胞存活率(%)=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100% 【注意事项】 1. 染色时间不宜过长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。 2. 本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,可在 37℃水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 台盼蓝有潜在致癌风险,请注意适当防护。 4. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 5. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
16% Tissue Fixer 16%PFA【保存条件】 -20℃避光保存,有效期 1 年;4℃避光储存,有效期 3 个月。 【概述】 固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或弥散。固定液种类很多,常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。 多聚甲醛固定液是一种广泛用于免疫组化(IHC)、免疫荧光( IF)、免疫细胞化学(IC)、流式分析(FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。 本产品为 16% 多聚甲醛 PBS 溶液(16% PFA),主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成,该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定,是免疫组织化学和培养细胞的固定液之一,它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。其固定效果好、应用广,适用于各种常见细胞或组织的固定,对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果,但主要作用于蛋白质,无法固定尿酸和糖类等。若需使用低浓度多聚甲醛,可使用 PBS 按比例稀释。 【使用建议】 4%多聚甲醛固定液为常用组织细胞固定液,该操作步骤以 4%多聚甲醛固定液为例。如需使用浓度为 16%的多聚甲醛固定液,该操作步骤仅供参考。 对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入 1 毫升固定液的比例,加入 4%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品,加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定 10-20 分钟即可,但固定较长时间,例如 1-2 小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织切片,加入 4% 多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准,或使用染色架进行固定。通常室温固定 10-20 分钟即可完成固定,但切片较厚时可以固定较长时间,例如 1-2小时。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织块样品,浸泡入 4% 多聚甲醛固定液中,室温或 4℃浸泡固定 2 到 24 小时。建议不超过 8 小时,除非组织块特别大,难以渗透。固定完成后,放入装有蒸馏水的离心管中清洗,每 15-30 分钟换一次水,共 6-8 次,建议在摇床进行,或用流水冲洗 1-2 小时。随后梯度脱水,进行包埋。如果暂时不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。 如将组织样品置于 16% 多聚甲醛固定液中浸泡储存,请避光放置。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液 pH 降低,从而影响染色。 4. 不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。 5. 多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。 6. 多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。 7. 多聚甲醛固定液固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。 8. 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
10% Tissue Fixer 10%PFA【保存条件】 -20℃避光保存,有效期 1 年;4℃避光储存,有效期 3 个月。 【概述】 固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或弥散。固定液种类很多,常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。 多聚甲醛固定液是一种广泛用于免疫组化(IHC)、免疫荧光( IF)、免疫细胞化学(IC)、流式分析(FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。 本产品为 10% 多聚甲醛 PBS 溶液(10% PFA),主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成,该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定,是免疫组织化学和培养细胞的固定液之一,它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。其固定效果好、应用广,适用于各种常见细胞或组织的固定,对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果,但主要作用于蛋白质,无法固定尿酸和糖类等。 若需使用低浓度多聚甲醛,可使用 PBS 按比例稀释。【使用建议】 4% 多聚甲醛固定液为常用组织细胞固定液,该操作步骤以 4% 多聚甲醛固定液为例。如需使用浓度为 10%的多聚甲醛固定液,该操作步骤仅供参考。 对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入 1 毫升固定液的比例,加入 4%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品,加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定 10-20 分钟即可,但固定较长时间,例如 1-2 小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织切片,加入 4% 多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准,或使用染色架进行固定。通常室温固定 10-20 分钟即可完成固定,但切片较厚时可以固定较长时间,例如 1-2 小时。 后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。对于组织块样品,浸泡入 4% 多聚甲醛固定液中,室温或 4℃浸泡固定 2 到 24 小时。建议不超过 8 小时,除非组织块特别大,难以渗透。固定完成后,放入装有蒸馏水的离心管中清洗,每 15-30 分钟换一次水,共 6-8 次,建议在摇床进行,或用流水冲洗 1-2 小时。随后梯度脱水,进行包埋。如果暂时不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。 如将组织样品置于 10% 多聚甲醛固定液中浸泡储存,请避光放置。【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液 pH 降低,从而影响染色。 4. 不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。 5. 多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。 6. 多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。 7. 多聚甲醛固定液固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。 8. 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
8% Tissue Fixer【保存条件】 -20℃避光保存,有效期 1 年;4℃避光储存,有效期 3 个月。 【概述】 固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或弥散。固定液种类很多,常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。 多聚甲醛固定液是一种广泛用于免疫组化(IHC)、免疫荧光( IF)、免疫细胞化学(IC)、流式分析(FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。 本产品为 8% 多聚甲醛 PBS 溶液(8% PFA),主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成,该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定,是免疫组织化学和培养细胞的固定液之一,它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。其固定效果好、应用广,适用于各种常见细胞或组织的固定,对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果,但主要作用于蛋白质,无法固定尿酸和糖类等。若需使用低浓度多聚甲醛,可使用 PBS 按比例稀释。 【使用建议】 4% 多聚甲醛固定液为常用组织细胞固定液,该操作步骤以 4% 多聚甲醛固定液为例。如需使用浓度为 8%的多聚甲醛固定液,该操作步骤仅供参考。 对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入 1 毫升固定液的比例,加入 4%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品,加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定 10-20 分钟即可,但固定较长时间,例如 1-2 小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织切片,加入 4% 多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准,或使用染色架进行固定。通常室温固定 10-20 分钟即可完成固定,但切片较厚时可以固定较长时间,例如 1-2 小时。 后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织块样品,浸泡入 4% 多聚甲醛固定液中,室温或 4℃浸泡固定 2 到 24 小时。建议不超过 8 小时,除非组织块特别大,难以渗透。固定完成后,放入装有蒸馏水的离心管中清洗,每 15-30 分钟换一次水,共 6-8 次,建议在摇床进行,或用流水冲洗 1-2 小时。随后梯度脱水,进行包埋。如果暂时不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。 如将组织样品置于 8% 多聚甲醛固定液中浸泡储存,请避光放置。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液 pH 降低,从而影响染色。 4. 不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。 5. 多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。 6. 多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。 7. 多聚甲醛固定液固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。 8. 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作
3% Tissue Fixer 3%PFA【保存条件】 -20℃避光保存,有效期 1 年;4℃避光储存,有效期 3 个月。 【概述】 固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或弥散。固定液种类很多,常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。多聚甲醛固定液是一种广泛用于免疫组化(IHC)、免疫荧光( IF)、免疫细胞化学(IC)、流式分析(FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。本产品为 3% 多聚甲醛 PBS 溶液(3% PFA),主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成,该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定,是免疫组织化学和培养细胞的固定液之一,它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。其固定效果好、应用广,适用于各种常见细胞或组织的固定,对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果,但主要作用于蛋白质,无法固定尿酸和糖类等。若需使用低浓度多聚甲醛,可使用 PBS 按比例稀释。 【使用建议】 对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入 1 毫升固定液的比例,加入 3%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品,加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定 10-20 分钟即可,但固定较长时间,例如 1-2 小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织切片,加入 3% 多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准,或使用染色架进行固定。通常室温固定 10-20 分钟即可完成固定,但切片较厚时可以固定较长时间,例如 1-2 小时。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织块样品,浸泡入 3% 多聚甲醛固定液中,室温或 4℃浸泡固定 2 到 24 小时。建议不超过 8 小时,除非组织块特别大,难以渗透。固定完成后,放入装有蒸馏水的离心管中清洗,每 15-30 分钟换一次水,共 6-8 次,建议在摇床进行,或用流水冲洗 1-2 小时。随后梯度脱水,进行包埋。如果暂时不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。如将组织样品置于 3% 多聚甲醛固定液中浸泡储存,请避光放置。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液 pH 降低,从而影响染色。 4. 不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。 5. 多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。 6. 多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。 7. 多聚甲醛固定液固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。 8. 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
1% Tissue Fixer 1%PFA【保存条件】 -20℃避光保存,有效期 1 年;4℃避光储存,有效期 3 个月。 【概述】 固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或弥散。固定液种类很多,常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。 多聚甲醛固定液是一种广泛用于免疫组化(IHC)、免疫荧光( IF)、免疫细胞化学(IC)、流式分析(FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。 本产品为 1% 多聚甲醛 PBS 溶液(1% PFA),主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成,该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定,是免疫组织化学和培养细胞的固定液之一,它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。其固定效果好、应用广,适用于各种常见细胞或组织的固定,对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果,但主要作用于蛋白质,无法固定尿酸和糖类等。 【使用建议】 对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入 1 毫升固定液的比例,加入 1%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品,加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定 10-20 分钟即可,但固定较长时间,例如 1-2 小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织切片,加入 1% 多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准,或使用染色架进行固定。通常室温固定 10-20 分钟即可完成固定,但切片较厚时可以固定较长时间,例如 1-2 小时。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 对于组织块样品,浸泡入 1% 多聚甲醛固定液中,室温或 4℃浸泡固定 2 到 24 小时。建议不超过 8 小时,除非组织块特别大,难以渗透。固定完成后,放入装有蒸馏水的离心管中清洗,每 15-30 分钟换一次水,共 6-8 次,建议在摇床进行,或用流水冲洗 1-2 小时。随后梯度脱水,进行包埋。如果暂时不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。 如将组织样品置于 1% 多聚甲醛固定液中浸泡储存,请避光放置。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液 pH 降低,从而影响染色。 4. 不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。 5. 多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。 6. 多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。 7. 多聚甲醛固定液固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。 8. 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
Triton X-100 Solution(20%)【保存条件】 室温密封阴凉干燥保存,有效期 1 年 【概述】 曲拉通 X-100 为无色或几乎无色透明粘稠液体。能溶于水、甲苯、二甲苯和乙醇,不溶于石油醚。用于气相色谱固定液(最高使用温度 190℃,溶剂为丙酮、氯仿、二氯甲烷、甲醇)分离分析烃类化合物、含氧化合物(醇、酯、酮)、碱性和中性。用途广泛的非离子表面活性剂,在温和的变性条件下用于恢复膜组分。 本产品为 20%(V/V) Triton X-100 溶液,请根据需要选择合适的浓度。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 有刺激性。若吸入、摄入或者皮肤吸收,对人体有害。使用时注意防护