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5×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液粉末（5袋×1L）
基本售价：350.00元
5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液粉末使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-81625×Tris-Glycine-SDS Running Buffer,powder,1L/pack1/5/10/100包 使用说明书1份【保存条件】室温保存，有效期2年；配成溶液后不宜超过一个月。【概述】5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。【组分浓度】125mM Tris, 1.25M Glycine, 0.5%（W/V）SDS【使用建议】1. 取一包可以配制1升SDS-PAGE电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900毫升，溶解。然后在量筒中定容到1升。混匀后即为5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液。2. 使用前请取100ml 5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液加入400ml蒸馏水或去离子水（5倍稀释），混匀后即为1×工作液，可直接使用。【注意事项】1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。3. 本电泳液含有SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液。
5×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液粉末（1L）
基本售价：75.00元
5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液粉末使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-81625×Tris-Glycine-SDS Running Buffer,powder,1L/pack1/5/10/100包 使用说明书1份【保存条件】室温保存，有效期2年；配成溶液后不宜超过一个月。【概述】5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。【组分浓度】125mM Tris, 1.25M Glycine, 0.5%（W/V）SDS【使用建议】1. 取一包可以配制1升SDS-PAGE电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900毫升，溶解。然后在量筒中定容到1升。混匀后即为5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液。2. 使用前请取100ml 5×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液加入400ml蒸馏水或去离子水（5倍稀释），混匀后即为1×工作液，可直接使用。【注意事项】1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。3. 本电泳液含有SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液。
1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液粉末（100袋×1L）
基本售价：1400.00元
1×Tris-Glycine-SDS Running Buffer,powder,1L×1pack【保存条件】 室温保存，有效期 2 年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE） 中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 25mM Tris, 250mM Glycine, 0.1%（W/V）SDS 【使用建议】 取一包可以配制 1 升 SDS-PAGE 电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约 900 毫升，溶解。然后在量筒中定容到 1 升。混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用 1-2 次，但为了取得最佳的电泳效果，应使 用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有 SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性 PAGE 电泳液
1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液粉末（10袋×1L）
基本售价：150.00元
1×Tris-Glycine-SDS Running Buffer,powder,1L×1pack【保存条件】 室温保存，有效期 2 年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE） 中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 25mM Tris, 250mM Glycine, 0.1%（W/V）SDS 【使用建议】 取一包可以配制 1 升 SDS-PAGE 电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约 900 毫升，溶解。然后在量筒中定容到 1 升。混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用 1-2 次，但为了取得最佳的电泳效果，应使 用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有 SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性 PAGE 电泳液
1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液粉末（1L）
基本售价：18.00元
1×Tris-Glycine-SDS Running Buffer,powder,1L×1pack【保存条件】 室温保存，有效期 2 年；配成溶液后不宜超过一个月，如若污染，请重新配置新溶液。 【概述】 1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品为粉剂，请配成溶液使用。 【组分浓度】 25mM Tris, 250mM Glycine, 0.1%（W/V）SDS 【使用建议】 取一包可以配制 1 升 SDS-PAGE 电泳液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约900 毫升，溶解。然后在量筒中定容到 1 升。混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用 1-2 次，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。 3. 本电泳液含有 SDS，适用于变性胶蛋白电泳。对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE 电泳液
10×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液
基本售价：160.00元
10×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液使用说明书 【包装规格】 产品编号 产品名称 包装 ES-8160 Tris-Glycine-SDS Running Buffer,10× 500ml 使用说明书 1份 【保存条件】 室温保存，有效期1年；4℃保存可以延长有效期。 【概述】 10×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品按常规方法配制而成，为10×浓缩液，便于储存、操作简便。 【使用建议】 本产品为10×浓缩液，临用前按下述步骤稀释： 取100ml 10×Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液加入900ml蒸馏水或去离子水（10倍稀释），混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 本产品为高倍浓缩液，环境温度较低时可能会有结晶析出，可加热助溶，待溶解完全后再进行稀释使用；密封保存，防止污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液
基本售价：100.00元
Tris-Glycine-SDS Running Buffer,5×Concentrate【保存条件】 室温保存，有效期 1 年 【概述】 5×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液是用于蛋白变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDS-PAGE）中的缓冲试剂。本产品按常规方法配制而成，为 5×浓缩液，便于储存、操作简便。 【组分浓度】 125mM Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%（W/V）SDS 【使用建议】 本产品为 5×浓缩液，临用前按下述步骤稀释： 取 100ml 5×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液加入 400ml 蒸馏水或去离子水（5 倍稀释），混匀后即可使用。 【注意事项】 1. 本产品为高倍浓缩液，环境温度较低时可能会有结晶析出，可加热助溶，待溶解完全后再进行稀释使用；密封保存，防止污染。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4×非变性蛋白上样缓冲液
基本售价：160.00元
Native-PAGE loading buffer,4×【保存条件】 -20℃保存，有效期 1 年 【概述】 4×非变性蛋白上样缓冲液中不含 SDS 及 DTT 或者β-巯基乙醇，适合于常规的非变性PAGE 蛋白样品的电泳。内含溴酚蓝作为电泳进度追踪染料。 【使用建议】 1. 室温解冻 4×非变性蛋白上样缓冲液。 2. 请按每 10μl 蛋白样品加入 30μl 上样缓冲液的比例(4 倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 3. 混匀后直接上样电泳。 4. 通常电泳时蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH 值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
4×SDS-PAGE单色蛋白Loading buffer(含巯基还原剂）
基本售价：100.00元
SDS-PAGE Loading buffer,4×(with β-Mercaptoethanol)【保存条件】 建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期 1 年 【概述】 4×SDS-PAGE 单色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE 运行期间防止 pH 值变化。一些蛋白质对在 Tris 缓冲液中电泳期间温度波动引起的 pH 变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在 SDS-PAGE 电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS 还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。 溴酚蓝作为指示剂，用于追踪电泳进度。 【使用建议】 1. 室温解冻 4×SDS-PAGE 单色蛋白上样缓冲液。 2. 请按每 30μl 蛋白样品加入 10μl 上样缓冲液的比例(4 倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 3. 混匀后，100℃水浴加热 5-10 分钟，使蛋白变性。 4. 冷却至室温后，10000-14000rpm 离心 2-5 分钟，取上清直接上样电泳即可。【注意事项】 1. β-巯基乙醇对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右， 胶浓度为 12时，约在 20kd 左右，胶浓度为 15%时，大概在 10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。 4. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH 值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
2×SDS-PAGE单色蛋白Loading buffer（DTT）
基本售价：110.00元
2×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液（DTT）使用说明书 【包装规格】 产品编号 产品名称 包装 ES-8154 SDS-PAGE Loading buffer,2×(with DTT) 10ml/100ml 使用说明书 1份 【保存条件】 建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期1年 【概述】 2×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE运行期间防止pH值变化。一些蛋白质对在Tris缓冲液中电泳期间温度波动引起的pH变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在SDS-PAGE电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。 溴酚蓝作为指示剂，用于追踪电泳进度。 【使用建议】 1. 室温解冻2×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液。 2. 请按每10μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(两倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 3. 混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。 4. 冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。 【注意事项】 1. DTT对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。 4. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
4×SDS-PAGE双色蛋白Loading buffer（DTT）
基本售价：40.00元
4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液（DTT）使用说明书【包装规格】产品编号产品名称包装ES-8153SDS-PAGE Dual Color Protein Loading Buffer,4×(with DTT)1ml/10ml/100ml 使用说明书1份【保存条件】建议分装冻存，避免反复冻融，-20℃，有效期1年【概述】4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解，并在SDS-PAGE运行期间防止pH值变化。一些蛋白质对在Tris缓冲液中电泳期间温度波动引起的pH变化敏感，优化后的上样缓冲液组分可防止在SDS-PAGE电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。上样缓冲液包含两种跟踪染料：蓝色（溴酚蓝），用于跟踪电泳的进度；粉红色（pyronin Y），用于在Western印迹过程中监测蛋白质向膜的转移。【使用建议】1. 室温解冻4×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液。2. 请按每30μl蛋白样品加入10μl上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。3. 混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。4. 冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。【注意事项】1. DTT对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。3. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。4. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝、吡罗红指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。5. 一般而言，吡罗红的迁移速度快于溴酚蓝。在较高百分比的SDS聚丙烯酰胺凝胶（例如15%）中，吡罗红染料的迁移速度比溴酚蓝慢。
SDS细胞裂解液
基本售价：210.00元
SDS lysis buffer【保存条件】 4℃保存，有效期 1 年。 【概述】 SDS 裂解液是一种较为强烈的细胞组织裂解液，可用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。SDS 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和 ELISA 等。 【使用建议】 1.对于培养细胞样品： a.取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。 b.对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞 1-2 秒后，细胞就会被裂解。植物细胞宜在冰上裂解 2-10min。如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 对于悬浮细胞： 离心收集细胞，轻轻涡旋或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照 6 孔板每孔细胞加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 对于细菌或酵母： 对于 1ml 菌液或酵母液，离心去上清，如果有必要可以使用 PBS 洗涤一次，充分去除液体后，轻轻涡旋或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入 100-200μl 裂解液，轻轻涡旋或者弹击管底以混匀，冰上裂解 2-10min。如果希望获得更好的裂解效果，细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶(Lyticase)消化，然后再使用本裂解液进行裂解。 裂解液用量说明： 通常6孔板每孔细胞或者1ml的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到 200μl 或 250μl。每100 万动物细胞用 100μl 本产品裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为 2-4mg/ml，不同细胞所不同。c.充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、Western 和ChIP 等操作。2.对于组织样品： a.把组织剪切成细小的碎片。 b.融解 SDS 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。 c.按照每 20mg 组织加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。) d.用玻璃匀浆器匀浆，或使用组织研磨仪研磨，直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨，研磨充分后加入裂解液进行裂解。如果用于 ChIP，初步裂解后需在冰浴上继续裂解 10 分钟。 e.充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、Western 和ChIP 等操作。每 20mg 冻存的小鼠肝脏组织用 200μl 本裂解液裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为 15-25mg/ml，不同状态的不同组织有所不同。 f.如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈涡旋使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器或研磨设备，缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在 37ºC 水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解混匀后即可正常使用。 3. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。 4. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
RIPA裂解液 (中强度)
基本售价：180.00元
RIPA Lysis Buffer normal【保存条件】 -20℃保存，有效期 1 年，频繁使用可放置 4℃保存。 【概述】 RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 Western、IP 和 ELISA 等。 RIPA 的本意是 Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA 裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为高强度、中强度、低强度三类。请根据不同需求选择不同强度RIPA 裂解液。 【使用建议】 如发现 RIPA 有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。根据使用量，取每 1mlRIPA 加入 10ul PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。 1. 样品前处理： a) 对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。 b) 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。 c) 对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。 2. 后处理：将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本产品长时间低温存放可能会出现沉淀，可在 37ºC 水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。 3. 为保证最佳的使用效果，请尽量避免过多的反复冻融，可分装后使用。 4. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。 5. RIPA 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如 NF-kappaB、p53 等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。 6. 该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途
ChIP-Seq 核裂解液
基本售价：240.00元
ChIP-Seq Nuclear Lysis buffer【保存条件】 -20 ℃保存，有效期 12 个月 【概述】 本品适用于小片段（5-500bp）单链 DNA 的杂交反应，获得更优质的杂交双链 DNA 片段，如 shRNA、gRNA载体等构建。 【操作方法】 1. 收获细胞核后，将细胞核重悬于 3-5 倍体积的冰冷的 ChIP-Seq 核裂解缓冲液中（5 倍体积取决于细胞核提取过程中细胞裂解液用量，如细胞裂解液用量为 100µl 则加入 500µl ChIP-Seq 核裂解液） 2. 将试管在冰上孵育 20 分钟。 3．从每个样品中取 5 µL 等分试样，并用 15 µL TE 稀释以用于分析凝胶确认。（注：将剩余保存在冰上或冻-20 ℃，直到需要为止。该样品用于确认染色质在分离前是完整的。） 4. 将试管放入设定为 2°C 的超声浴中, 调节水位，使管子刚好接触杯垫的表面。。如用 Misonix 431A 对每个试管进行 300 µl 的超声处理非常稳定，因此我们建议将较大的样品分成多个试管进行超声处理。将至少两个和多达 8 个试管放入超声仪的试管支架中。 5. 用 10 秒的脉冲和 10 秒的静止时间以 20 的振幅对样品进行超声处理，总超声时间为 30 分钟。 6. 从超声仪中取出样品，并保存在冰上。 7. 取 5 µl 样品，并用 15 µl TE 稀释以用于分析凝胶。 8. 在 37°C 下，用 10 µg RNase A 样品 15 分钟。 9. 在 65°C 下用 20 µg 蛋白酶 K 样品 30 分钟。 10. 在 95°C 下反向交联 5 分钟，使样品缓慢冷却至室温。需要执行这些步骤以确保 DNA 在琼脂糖凝胶上的正确迁移。否则，将发生比预期高得多的分子量的涂污或迁移。 11. 将加样染料添加到每个样品中，并在 TAE 运行缓冲液中的 1％琼脂糖凝胶上分离样品。 12. 凝胶成像仪下观察琼脂糖凝胶上的 DNA 样品。剪切染色质的大小应在 200 至 500 bp 之间。 13. 若步骤 12 完成后鉴定可行，将步骤 6 中其余样品在 4°C 下以 16,000 g 的速度离心 10 分钟，以去除不溶物。 14. 将可溶的剪切染色质转移到新鲜的 1.5ml 离心管中。染色质可以在液氮中冷冻，并在-80°C 下保存直至需要。 15．按上述方法用 RNase A，蛋白酶 K 和交联逆转处理等分试样（步骤 8-10）。 16．使用 QIAquick PCR 纯化试剂盒纯化染色质，并使用 NanoDrop 等测量 DNA 浓度。 【注意事项】 1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，以免污染。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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