FasRun Acrylamide Kit(12%) 产品介绍 FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒对传统 SDS-PAGE 凝胶制备配方进行了优化,相对于传统 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒,FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒具有以下特点:1.可同时制备浓缩胶与分离胶,在开始铸胶到准备上样电泳之间时间不超过 30 分钟。2.最快能在 20 分钟内完成电泳(300V 电压的条件下)而不损伤凝胶。3.相对于 Tris-HCl 凝胶有更高的转膜效率。4.在正确的保存条件下,铸好的凝胶可在 4℃保存长达 4 周时间。存储条件 该试剂盒于 4℃条件下可保存 12 个月。需要额外准备的材料 □ 制胶器具□ 去离子水□ 1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液□ 新鲜的 10% APS 溶液□ TEMED开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒(10%)所铸的 SDS-PAGE 分离胶浓度为 10%,对蛋白质大小的最佳分离范围为 20-80kD,如需铸造其他浓度的 SDS-PAGE 分离胶,可购买其他相关试剂盒或联系销售人员。 收到试剂盒时可将试剂盒放于 4℃中保存,但使用前请保证试剂温度回至室温。 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。开始前试剂准备 使用前应配制新鲜的 10% APS 溶液,且在-20℃条件下至多储存 2 个星期。安(使用过程与货号EK-6240相同,更多细节可在赛国官网搜索EK-6240并下载相应说明书作参考)
FasRun Acrylamide Kit(12%) 产品介绍 FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒对传统 SDS-PAGE 凝胶制备配方进行了优化,相对于传统 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒,FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒具有以下特点:1.可同时制备浓缩胶与分离胶,在开始铸胶到准备上样电泳之间时间不超过 30 分钟。2.最快能在 20 分钟内完成电泳(300V 电压的条件下)而不损伤凝胶。3.相对于 Tris-HCl 凝胶有更高的转膜效率。4.在正确的保存条件下,铸好的凝胶可在 4℃保存长达 4 周时间。存储条件 该试剂盒于 4℃条件下可保存 12 个月。需要额外准备的材料 □ 制胶器具□ 去离子水□ 1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液□ 新鲜的 10% APS 溶液□ TEMED开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒(10%)所铸的 SDS-PAGE 分离胶浓度为 10%,对蛋白质大小的最佳分离范围为 20-80kD,如需铸造其他浓度的 SDS-PAGE 分离胶,可购买其他相关试剂盒或联系销售人员。 收到试剂盒时可将试剂盒放于 4℃中保存,但使用前请保证试剂温度回至室温。 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。开始前试剂准备 使用前应配制新鲜的 10% APS 溶液,且在-20℃条件下至多储存 2 个星期。安(使用过程与货号EK-6240相同,更多细节可在赛国官网搜索EK-6240并下载相应说明书作参考)
FasRun Acrylamide Kit(10%)产品介绍FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒对传统 SDS-PAGE 凝胶制备配方进行了优化,相对于传统 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒,FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒具有以下特点:1.可同时制备浓缩胶与分离胶,在开始铸胶到准备上样电泳之间时间不超过 30 分钟。2.最快能在 20 分钟内完成电泳(300V 电压的条件下)而不损伤凝胶。3.相对于 Tris-HCl 凝胶有更高的转膜效率。4.在正确的保存条件下,铸好的凝胶可在 4℃保存长达 4 周时间。存储条件该试剂盒于 4℃条件下可保存 12 个月。需要额外准备的材料□ 制胶器具□ 去离子水□ 1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液□ 新鲜的 10% APS 溶液□ TEMED开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒(10%)所铸的 SDS-PAGE 分离胶浓度为 10%,对蛋白质大小的最佳分离范围为 20-80kD,如需铸造其他浓度的 SDS-PAGE 分离胶,可购买其他相关试剂盒或联系销售人员。 收到试剂盒时可将试剂盒放于 4℃中保存,但使用前请保证试剂温度回至室温。 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。开始前试剂准备 使用前应配制新鲜的 10% APS 溶液,且在-20℃条件下至多储存 2 个星期。(更多细节请在产品说明书下下载查阅)
FasRun Acrylamide Kit(10%) 产品介绍 FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒对传统 SDS-PAGE 凝胶制备配方进行了优化,相对于传统 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒,FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒具有以下特点:1.可同时制备浓缩胶与分离胶,在开始铸胶到准备上样电泳之间时间不超过 30 分钟。2.最快能在 20 分钟内完成电泳(300V 电压的条件下)而不损伤凝胶。3.相对于 Tris-HCl 凝胶有更高的转膜效率。4.在正确的保存条件下,铸好的凝胶可在 4℃保存长达 4 周时间。存储条件 该试剂盒于 4℃条件下可保存 12 个月。需要额外准备的材料 □ 制胶器具□ 去离子水□ 1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液□ 新鲜的 10% APS 溶液□ TEMED开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒(10%)所铸的 SDS-PAGE 分离胶浓度为 10%,对蛋白质大小的最佳分离范围为 20-80kD,如需铸造其他浓度的 SDS-PAGE 分离胶,可购买其他相关试剂盒或联系销售人员。 收到试剂盒时可将试剂盒放于 4℃中保存,但使用前请保证试剂温度回至室温。 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。开始前试剂准备 使用前应配制新鲜的 10% APS 溶液,且在-20℃条件下至多储存 2 个星期。(更多细节请在产品说明书下下载查阅)
FasRun Acrylamide Kit(8%)产品介绍FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒对传统 SDS-PAGE 凝胶制备配方进行了优化,相对于传统 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒,FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒具有以下特点:1.可同时制备浓缩胶与分离胶,在开始铸胶到准备上样电泳之间时间不超过 30 分钟。2.最快能在 20 分钟内完成电泳(300V 电压的条件下)而不损伤凝胶。3.相对于 Tris-HCl 凝胶有更高的转膜效率。4.在正确的保存条件下,铸好的凝胶可在 4℃保存长达 4 周时间。存储条件该试剂盒于 4℃条件下可保存 12 个月。需要额外准备的材料□ 制胶器具□ 去离子水□ 1×Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液□ 新鲜的 10% APS 溶液□ TEMED开始前注意事项 请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。 FastRun 快速电泳 SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒(10%)所铸的 SDS-PAGE 分离胶浓度为 10%,对蛋白质大小的最佳分离范围为 20-80kD,如需铸造其他浓度的 SDS-PAGE 分离胶,可购买其他相关试剂盒或联系销售人员。 收到试剂盒时可将试剂盒放于 4℃中保存,但使用前请保证试剂温度回至室温。 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。开始前试剂准备 使用前应配制新鲜的 10% APS 溶液,且在-20℃条件下至多储存 2 个星期。安(使用过程与货号EK-6240相同,更多细节可在赛国官网搜索EK-6240并下载相应说明书作参考)
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit【保存条件】 -20℃保存一年 【使用建议(仅供参考)】 1. 准备溶液:室温融解试剂盒中的三种试剂,溶解后立即放置在冰上,混匀。取适当量的细 胞浆蛋白抽提试剂 CE I/II 及细胞核蛋白抽提试剂 NE 备用,在使用前数分钟内加入蛋白酶 抑制剂混合物及 PMSF,使 PMSF 的最终浓度为 1mM(现配现用)。 A: 对于贴壁细胞:用 PBS 洗一遍,用细胞刮子刮下细胞,或用 EDTA 溶液处理细胞使细胞 不再贴壁很紧,并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞,尽最大努力吸尽上清,留下细胞沉 淀备用。(注:尽量避免用胰酶消化细胞,以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。) B: 对于悬浮细胞:用预冷的 PBS 清洗一遍,离心收集细胞,尽最大努力吸尽上清,留下细 胞沉淀备用。 2. 每 20 微升细胞沉淀加入 100 微升添加了 PMSF 和蛋白酶抑制剂的细胞浆蛋白抽提试剂 CE I。(对于 200 万 HeLa 细胞,其细胞沉淀的体积大约为 20 微升或 40 毫克。) 2. 每 20 微升细胞沉淀加入 100 微升添加了 PMSF 和蛋白酶抑制剂的细胞浆蛋白抽提试剂 CE I。(对于 200 万 HeLa 细胞,其细胞沉淀的体积大约为 20 微升或 40 毫克。)3. 最高速剧烈涡旋 5-10 秒,把细胞沉淀完全悬浮并分散开。(如果细胞沉淀没有完全悬浮并分散开,可以适当延长 vortex 时间。)4. 冰浴 10-15 分钟。(过程中可适当涡旋 2-3 次)5. 4℃下 3000rpm 转速下离心 5 分钟。6. 收集上清液(上清为细胞质提取物,储存在-80℃或准备加入 Western Blot 实验中。注意此时沉淀并不致密)7. 将步骤 6 中沉淀重悬于 100 微升细胞浆蛋白抽提试剂 CE II 中。8. 4℃下 3000rpm 转速下离心 5 分钟,除去上清液(剩余沉淀为细胞核)。若想更好的清洗细胞核,可重复步骤 7 和步骤 8 一次。9. 向此沉淀物中添加等体积的细胞核蛋白抽提试剂 NE(即,如果沉淀为 40 µL,则添加 40µL NE)10. 将沉淀重悬并在冰上孵育 10 分钟(过程中可适当涡旋 3-5 次)。11. 在 4℃下以 14,000 rpm 离心 5 分钟。12. 收获上清液(这是核提取物)。13. 将提取物储存在-80℃或准备加入 Western Blot 实验中。【注意事项】1. 尽量减少反复冻融的次数,以免效率下降。2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
RNA Holder Stabilization Solution【保存条件】 室温(15-30℃)保存一年 【概述】 RNA holder 是一种无毒的可直接使用的样品储存液,能迅速稳定组织,保护非冷冻细 胞 RNA 于原位。可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的 RNA。组织获取后立即浸入 RNA holder 保存液中,在室温可以保存 7 天,4℃可以保存 4 周,-20℃、-80℃标本可以长期保存, RNA 稳定存在不降解,取出后用各类方法抽提可以获得高质量的 RNA。 【操作方法】 1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需 RNA holder 用量。RNA holder 的用量应当是组 织体积的 10 倍(如 100mg 组织约用 1ml RNA holder);离心收集 2×106 细胞 RNA holder 的用量是 1ml。 2. 将 RNA holder 按需要量分装入自备保存管中; 3. 快速将较大的组织切成任何一边最大厚度不大于 0.5cm 大小,然后将组织碎块放入到 10 倍体积的 RNA holder 中保存。注:组织过厚则 RNA holder 不能有效渗入,组织中间部位的 RNA 不能受到保护。 4. 保存时先将样本浸入 RNA holder 后置 4℃冰箱过夜(使 RNA holder 完全渗入到组织中), 然后转移至-20℃冰箱(RNA holder 在-20℃仍为液态,有结晶析出为正常情况),或者过夜 取出后直接转移至-80℃,可反复冻融 20 次不影响 RNA 质量。 【注意事项】 1. 组织和细胞取材要快速,防止 RNA 降解。冰冻组织不能用 RNA holder 保存,因其不能 有效渗入冰冻组织中。 2. 保存样品的提取:组织样本从-20℃或-80℃取出后,复苏到室温后,取出组织块置于 RNA 提取液(如 Trizol)中再行提取。细胞样本复温后低速离心收集细胞,去除 RNA holder
Total Exosome Isolation Reagent(from cell culture media) 【保存条件】 4ºC 保存,有效期一年 【概述】 外泌体是含有复杂 RNA 和蛋白质的小囊泡(30-120 nm),所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。外泌体被认为是细胞间的信使,在特定细胞之间传递其效应物或向大分子发出信号,然而它们的形成、组成以及涉及它们的生物学途径仍未完全了解。 外泌体功能和运输的生物学研究要求完整的外泌体的分离,但是目前使用的方法繁琐,非特异性且困难。ECOTOP 细胞培养基上清外泌体提取试剂为从细胞培养基样品中浓缩完整外泌体提供了一种简单而可靠的方法。通过束缚水分子,从细胞培养基中分离总外泌体试剂可将溶解度较低的组分(即外泌体)从溶液中挤出,从而允许它们在短暂,低速离心后收集。ECOTOP 细胞培养基上清外泌体提取试剂可以从细胞培养基样品中快速高效地富集完整的外泌体。 •为任何类型的下游应用最大限度地大大提高完整外泌体的回收率 • 使用简单可靠的实验方案轻松分离外泌体 • 避免耗时的超速离心 • 灵活性极佳—可以根据样品量按比例增加或减少 【操作方法】 样品处理: 1. 收集细胞培养基。 2. 以 2000×g 离心细胞培养基 30 分钟使细胞和碎屑沉淀。 3. 将不含细胞的上清液转移至新管中,注意不要吸到管底的细胞及碎屑。 外泌体分离: 1. 从上一步分离的不含细胞的上清液中取所需体积至新管中,并加入 0.5 倍体积的ECOTOP 细胞培养基上清外泌体提取试剂。如 1ml 上清液加入 0.5ml 提取试剂,或10ml 上清液加入 5ml 提取试剂。 2. 将上清液与提取试剂吹打混匀或涡旋混匀。 3. 将混匀好的样品 2-8℃过夜孵育。 4. 孵育完成后,在 2-8℃条件下 10000×g 离心 1 小时。 5. 完成离心后,吸走并丢弃上清液,外泌体即包含在试管底部的沉淀中(大多数情况 下是不可见的)。 6. 加入合适体积的 1×PBS 或其他类似缓冲液重悬沉淀。具体见下表: 7. 当沉淀重新悬浮之后,所得的外泌体即可进行下游分析或通过亲和层析进一步纯化。提纯后的外泌体可在 2-8℃中保存 1 周或在小于-20℃中长期保存。 【注意事项】 1. 本试剂可室温保存,4℃保存也可。 2. 取上清注意避免吸入细胞或细胞碎片(重要!),合并相同的细胞培养液上清样品,装入无菌的玻璃瓶,可在 4℃短期保存(1-2 天),长期保存可冻存于-80℃。 3. 细胞上清分离后尽快进行外泌体分离,保存在 4℃和-80℃,都会对产量有一定的影响。 4. 做少量 WB 实验一般 1ml 细胞培养上清液或尿液样本基本足够,但为了足量分离 外泌体做 RNA 或蛋白质分析,我们推荐使用大于 10ml 样本量来分离 外泌体。 5. 分离外泌体可用于细胞功能研究或根据后续研究加入相应 Trizol 或蛋白裂解液抽提RNA 或蛋白质或 1:100 PBS 稀释行粒径检测; 6. 本品仅限用于科研实验。
Total Exosome Isolation Reagent(from cell culture media) 【保存条件】 4ºC 保存,有效期一年 【概述】 外泌体是含有复杂 RNA 和蛋白质的小囊泡(30-120 nm),所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。外泌体被认为是细胞间的信使,在特定细胞之间传递其效应物或向大分子发出信号,然而它们的形成、组成以及涉及它们的生物学途径仍未完全了解。 外泌体功能和运输的生物学研究要求完整的外泌体的分离,但是目前使用的方法繁琐,非特异性且困难。ECOTOP 细胞培养基上清外泌体提取试剂为从细胞培养基样品中浓缩完整外泌体提供了一种简单而可靠的方法。通过束缚水分子,从细胞培养基中分离总外泌体试剂可将溶解度较低的组分(即外泌体)从溶液中挤出,从而允许它们在短暂,低速离心后收集。ECOTOP 细胞培养基上清外泌体提取试剂可以从细胞培养基样品中快速高效地富集完整的外泌体。 •为任何类型的下游应用最大限度地大大提高完整外泌体的回收率 • 使用简单可靠的实验方案轻松分离外泌体 • 避免耗时的超速离心 • 灵活性极佳—可以根据样品量按比例增加或减少 【操作方法】 样品处理: 1. 收集细胞培养基。 2. 以 2000×g 离心细胞培养基 30 分钟使细胞和碎屑沉淀。 3. 将不含细胞的上清液转移至新管中,注意不要吸到管底的细胞及碎屑。 外泌体分离: 1. 从上一步分离的不含细胞的上清液中取所需体积至新管中,并加入 0.5 倍体积的ECOTOP 细胞培养基上清外泌体提取试剂。如 1ml 上清液加入 0.5ml 提取试剂,或10ml 上清液加入 5ml 提取试剂。 2. 将上清液与提取试剂吹打混匀或涡旋混匀。 3. 将混匀好的样品 2-8℃过夜孵育。 4. 孵育完成后,在 2-8℃条件下 10000×g 离心 1 小时。 5. 完成离心后,吸走并丢弃上清液,外泌体即包含在试管底部的沉淀中(大多数情况 下是不可见的)。 6. 加入合适体积的 1×PBS 或其他类似缓冲液重悬沉淀。具体见下表: 7. 当沉淀重新悬浮之后,所得的外泌体即可进行下游分析或通过亲和层析进一步纯化。提纯后的外泌体可在 2-8℃中保存 1 周或在小于-20℃中长期保存。 【注意事项】 1. 本试剂可室温保存,4℃保存也可。 2. 取上清注意避免吸入细胞或细胞碎片(重要!),合并相同的细胞培养液上清样品,装入无菌的玻璃瓶,可在 4℃短期保存(1-2 天),长期保存可冻存于-80℃。 3. 细胞上清分离后尽快进行外泌体分离,保存在 4℃和-80℃,都会对产量有一定的影响。 4. 做少量 WB 实验一般 1ml 细胞培养上清液或尿液样本基本足够,但为了足量分离 外泌体做 RNA 或蛋白质分析,我们推荐使用大于 10ml 样本量来分离 外泌体。 5. 分离外泌体可用于细胞功能研究或根据后续研究加入相应 Trizol 或蛋白裂解液抽提RNA 或蛋白质或 1:100 PBS 稀释行粒径检测; 6. 本品仅限用于科研实验。
Cell Counting Kit-8 【保存条件】4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存两年有效。【概述】Cell Counting Kit-8 试剂盒简称 CCK-8 试剂盒,可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。该试剂主要用途有:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。【使用方法(仅供参考)】1. 用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量。通常细胞增殖实验每孔加入 100μl 2×103个细胞,细胞毒性实验每孔加入 100μl 5×103个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定,推荐进行预实验选择合适的细胞数量)。按照实验需要,进行培养并给予 0-10μl 特定的药物刺激。2. 每孔加入 10μl CCK-8 溶液(如果起始的培养体积为 200μl,则需加入 20μl CCK-8 溶液,其它情况以此类推)。可以用加了相应体积细胞培养液和 CCK-8 溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测,需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8 溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。3. 在细胞培养箱内(37°C)继续孵育 0.5-4 小时,对于大多数情况孵育 1 小时即可。时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,初次实验时可以在 0.5、1、2 和 4 小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的时间点用于后续实验。4. 在 450nm 测定吸光度。可以使用吸光度在 430-490nm 之间的滤光片,但是 450 nm 滤光片的检测灵敏度最高。5. 计算方法细胞存活率 = [(As-Ab) / (Ac-Ab)]×100%抑制率 = [(Ac-As) / (Ac-Ab)]×100% As:实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质)Ac:对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8、没有待测物质)Ab:空白孔(不含细胞和待测物质的培养基、CCK-8)【注意事项】1. 初次实验可选择 3-5 个孔进行预实验选择合适的细胞数量。2. 由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发问题。一方面,由于 96 孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加相同量的 PBS、水或培养液;另一方面,可以把 96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。3. 当有还原性物质存在时会影响 CCK- 8 的测定,增加 OD 值;在有氧化性物质存在时会抑制测定反应的发生,减小 OD 值;在有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可。4. 在做加药实验时,如果药物具有还原性,就会和 CCK- 8 试剂发生显色反应,增加吸光度。解决办法:首先要确认药物是否有吸收,在含有药物的培养基中加入 CCK- 8,测定 450 nm 的吸光度,如果它的吸光度比不含药物的培养基 (只加 CCK-8) 的吸光度高,则证明药物有影响,可在加 CCK- 8 之前更换培养基,去掉药物的影响。5. 如果测定的 OD 值太低可适当增加细胞数量或延长加入 CCK-8 溶液后的染色时间。6. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。7. 仅用于实验室,不适合农业/家庭/临床用途使用。8. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
开学季活动,买二赠一,数量有限,送完即止,先到先得 【保存条件】 4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存两年有效。 【概述】 Cell Counting Kit-8 试剂盒简称 CCK-8 试剂盒,可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。该试剂主要用途有:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。 【使用方法(仅供参考)】 1. 用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量。通常细胞增殖实验每孔加入 100μl 2×103个细胞,细胞毒性实验每孔加入 100μl 5×103个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定,推荐进行预实验选择合适的细胞数量)。按照实验需要,进行培养并给予 0-10μl 特定的药物刺激。 2. 每孔加入 10μl CCK-8 溶液(如果起始的培养体积为 200μl,则需加入 20μl CCK-8 溶液,其它情况以此类推)。可以用加了相应体积细胞培养液和 CCK-8 溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。如果担心所使用的药物会干扰检测,需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8 溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。 3. 在细胞培养箱内(37°C)继续孵育 0.5-4 小时,对于大多数情况孵育 1 小时即可。时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,初次实验时可以在 0.5、1、2 和 4 小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的时间点用于后续实验。 4. 在 450nm 测定吸光度。可以使用吸光度在 430-490nm 之间的滤光片,但是 450 nm 滤光片的检测灵敏度最高。 5. 计算方法 细胞存活率 = [(As-Ab) / (Ac-Ab)]×100% 抑制率 = [(Ac-As) / (Ac-Ab)]×100% As:实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) Ac:对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8、没有待测物质) Ab:空白孔(不含细胞和待测物质的培养基、CCK-8) 【注意事项】 1. 初次实验可选择 3-5 个孔进行预实验选择合适的细胞数量。 2. 由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发问题。一方面,由于 96 孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加相同量的 PBS、水或培养液;另一方面,可以把 96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。 3. 当有还原性物质存在时会影响 CCK- 8 的测定,增加 OD 值;在有氧化性物质存在时会抑制测定反应的发生,减小 OD 值;在有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可。 4. 在做加药实验时,如果药物具有还原性,就会和 CCK- 8 试剂发生显色反应,增加吸光度。解决办法:首先要确认药物是否有吸收,在含有药物的培养基中加入 CCK- 8,测定 450 nm 的吸光度,如果它的吸光度比不含药物的培养基 (只加 CCK-8) 的吸光度高,则证明药物有影响,可在加 CCK- 8 之前更换培养基,去掉药物的影响。 5. 如果测定的 OD 值太低可适当增加细胞数量或延长加入 CCK-8 溶液后的染色时间。 6. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。 7. 仅用于实验室,不适合农业/家庭/临床用途使用。 8. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit【保存条件】2-8℃保存,有效期 1 年【概述】台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒(Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit),是利用正常的健康细胞能够排斥台盼蓝,而丧失细胞膜完整性的细胞可以被台盼蓝染色研制而成。严格来说,台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性,通常认为细胞膜丧失完整性,即可认为细胞已死亡。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。台盼蓝染色只需 3-5 分钟即可完成,并且操作非常简单。本试剂盒足够检测 100 个细胞样品。【使用建议(仅供参考)】1. 收集细胞:对于贴壁细胞先用胰酶和/或 EDTA 消化下细胞。对于悬浮细胞,则可以直接收集细胞。把收集的细胞在 1000-2000g 离心 1 分钟,弃上清,用 1 毫升或根据细胞的量用适当细胞重悬液重新悬起细胞。2.台盼蓝染色:吸取 100 微升重悬的细胞到一塑料离心管内,加入 100 微升台盼蓝染色液(2X),轻轻混匀,染色 3 分钟(染色 3 分钟时间已经足够,染色时间可以更长一些,但不宜超过 10分钟)。注:对于重悬于细胞培养液中的细胞,也可以直接加入等体积的台盼蓝染色液(2X)进行染色。3.计数:吸取少量经过染色的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数 500 个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100%【注意事项】1. 本试剂盒提供的两种溶液都是无菌的,使用时最好在超净台内进行,避免细菌污染。2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。3. 本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,可在 37ºC 水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀。沉淀完全溶解后即可正常使用。4. 台盼蓝对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。5. 该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
FFPE Tissue Total Protein Extraction Kit (Western Blot & RPA)
FFPE Tissue Total Protein Extraction Kit (Western Blot & RPA)
FFPE Tissue Total Protein Extraction Kit (Western Blot & RPA)
SDS-PAGE Gel Preparation Kit产品介绍SDS-PAGE 蛋白电泳制胶试剂盒提供了配制 SDS-PAGE 凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制 PAGE 胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒不仅可用于配制 SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE 凝胶。本试剂盒约可配制 30-50 块常规大小的 PAGE 胶存储条件1M Tris-HCl pH8.8、10% SDS、凝胶聚合催化剂(粉末状态)和 1M Tris-HCl pH6.8 室温保存。30% Acr-Bis(29:1)和 TEMED 4℃避光保存。凝胶聚合催化剂加水配制成 10%溶液后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效(建议分次称量配制)。需要额外准备的材料□ 制胶器具□ 去离子水开始前试剂准备 使用前应配制新鲜的 10%凝胶聚合催化剂溶液,且在-20℃分装冻存。最优是分批使用前配制,尽量不要一次全部配制使用。