Sodium Citrate Buffer(0.01mol/L, pH6.0, powder),1L/pack【保存条件】 室温保存,有效期 2 年 【概述】 柠檬酸-柠檬酸钠抗原修复液是一种最常用的抗原修复液,可以用于多聚甲醛、甲醛或 其它醛类试剂固定后的石蜡切片、冰冻切 片的抗原修复。 细胞或组织多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联,遮蔽了样 品的抗原位点,导致免疫染色时 染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果,这就需要 对组织进行抗原修复。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复 会大大改善石蜡切片的免疫染色 效果,对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显 著改善,特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进 行抗原修复。从原理上 来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品, 进行抗 原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色 效果。 本产品特别适用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片。 【使用建议】 实验前准备: 本产品为干粉,使用时用蒸馏水或去离子水溶解,定容至 1L,如需必要,可使用盐酸调 pH 值至 6.0。 抗原修复: 1. 高压蒸汽法 a. 抗原修复:压力锅中加入足以淹没切片的抗原修复液,加热至沸腾。 b. 将脱蜡至水的切片置染色架上,放入锅中,盖好锅盖,扣上压力阀加压,设置保压 4 min。 c. 压力下降后打开锅盖,放置室温冷却,待溶液冷却至室温后取出切片。 d. PBS 或 TBS 洗涤 3 次,每次 5 min,随后即可进行后续的免疫染色步骤。 2. 蒸煮锅法 a. 将置于染色架上的切片放于抗原修复液中,95~100°C 加热 10~20 min。 b. 冷却至室温后取出,PBS 或 TBS 洗涤 3 次,每次 5 min,随后即可进行后续的免疫染色 步骤。 3. 微波法 a. 向微波炉专用容器中加入抗原修复液,加热至沸腾。 b. 将脱蜡至水的切片置染色架上,放于容器中,煮沸 10~20 min。 c. 冷却至室温后取出,PBS 或 TBS 洗涤 3 次,每次 5 min,随后即可进行后续的免疫染色 步骤。 4. 对于其他切片 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 抗原修复的时间为建议时间,请根据不同的样品、抗体和抗原自行摸索。 2. 抗原修复后,待溶液冷却至室温后再取出切片,使抗原表位在经历高温后复原。 3. 抗原修复液的加入量要足以淹没切片几厘米,防止在煮沸过程中切片变干。 4. 抗原修复过程需使用耐热染色架进行操作。 5. 试剂有潮解性,若有潮解请放心使用。 6. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
EDTA Antigen Retrieval Solution,50×,pH8.0【保存条件】 4ºC 保存 【概述】 EDTA 抗原修复液是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或 其它醛类试剂固定后的抗原修复。 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的 抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。 本抗原修复液采用了广泛使用的 EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石 蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 【操作方法】 1. 对于石蜡切片: a. 脱蜡:二甲苯 3 次,每次 3-5min→ 无水乙醇 2 次,每次 3-5min→ 95%乙醇 1 次,3-5min→ 90%乙醇 1 次,3-5min→ 75%乙醇 1 次,3-5min→ 蒸馏水洗 2 次,每次 3-5min。 b. 抗原修复: ① 用去离子水稀释 EDTA 抗原修复液(50×,pH8.0)至 1×,例如 1ml 本抗原修复液(50×)加入 49ml 去离子水,混合均匀,即得 50ml 1×抗原修复液;② 将切片浸泡在抗原修复液(1×)中;95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在 10-20 min 内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需 预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉 加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。 随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。 ③ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 2. 对于冰冻切片: ① 用去离子水稀释 EDTA 抗原修复液(50×,pH8.0)至 1×,例如 1ml 本抗原修复液(50×)加入 49ml 去离子水,混合均匀,即得 50ml 1×抗原修复液; ② 用免疫染色洗涤液洗涤切片 5min; ③ 将切片浸泡在抗原修复液 (1×)中,95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在 10-20 min 内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需 预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉 加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。 ④ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 本品含 Tween-20,可提高细胞通透性,95-100℃加热时出现气泡属于正常现象。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 3. 用后请及时拧紧瓶盖,以防挥发。
Citrate Antigen Retrieval Solution,50× 【保存条件】 4℃保存,一年有效【概述】 1. 柠檬酸钠抗原修复液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一种最常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。2. 细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。本抗原修复液采用了广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0),可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。【操作方法】 1. 对于石蜡切片:2. a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡 5 分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡 3 次。无水乙醇 5分钟,两次。90%乙醇 5 分钟,两次,70%乙醇 5 分钟,一次。蒸馏水 5 分钟,两次。3. b. 抗原修复:用重蒸水或 Milli-Q 水将本抗原修复液(50×)稀释 50 倍,配制成抗原修复液(1×),例如 1ml 本抗原修复液(50X)加入 49ml 重蒸水或 Milli-Q 水,混合均匀,即得 50ml 抗原修复液(1×)。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 20 分钟(加热时间可以控制在 10-30 分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。4. 对于冰冻切片:5. 用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 20 分钟(加热时间可以控制在 10-30 分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。6. 对于其它样品的抗原修复:可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。【注意事项】 1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
DAPI Solution,1mg/ml【保存条件】 -20℃保存,有效期至少两年。 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与 DNA 中大部分 A、T 碱基相互结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为 DAPI 可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当 DAPI 与双链 DNA 结合时,最大吸收波长为 358nm,最大发射波长为 461nm。DAPI 的发射光为蓝色,且 DAPI 和绿色荧光蛋白 GFP 或 Texas Red 染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。 本产品为 DAPI 水溶液,纯度≥90%,浓度为 1mg/ml。使用时根据实验不同直接将本产品用相应溶液稀释到工作浓度。 【使用方法(仅供参考)】 取适量 1mg/ml DAPI 染色液加到 PBS 中,制备成 5-15μg/ml 的 DAPI 染色液。 对于培养细胞 1. 将 1/10 培养基体积的 5-15μg/ml DAPI 染色液加入到细胞培养基中。 2. 在 37℃培养细胞 10-20 分钟。 3. 用 PBS 或合适的缓冲液洗细胞两次。 4. 置于荧光显微镜下观察,激发波长 360-400nm。 对于组织切片 制好的玻片上滴加几滴 5-15μg/ml DAPI 染色液,染色 10 分钟,流水冲去染液,滤纸吸除多余水分,加一滴荧光封片液,置于荧光显微镜下观察。 【注意事项】 1. DAPI 被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。 2. 本产品需避光,并尽量避免反复冻融。
DAPI Solution,10μg/ml【保存条件】 -20℃避光保存,有效期 1 年。 【进口原料】 ROCHE REF10236276001, LOT35273022(不同批次产品原料批次会有更新) 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与 DNA 中大部分 A、T 碱基相互结 合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为 DAPI 可以透过完整的细胞膜,它可以用于活 细胞和固定细胞的染色。当 DAPI 与双链 DNA 结合时,最大吸收波长为 358nm,最大发射 波长为 461nm。DAPI 的发射光为蓝色,且 DAPI 和绿色荧光蛋白 GFP 或 Texas Red 染剂(红 色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光 染色。本产品母液为 DMF 溶解,后以 PBS 稀释为 DAPI-PBS 溶液,浓度为 10μg/ml。经过 滤处理,为即用型工作液,可直接用于固定细胞或组织样品的细胞核染色。 【使用方法(仅供参考)】 1. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色, 则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染 色,则直接进行后续的 DAPI 染色。 2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 DAPI 染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至 少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,混匀。 3. 室温放置 5-10 分钟。 4. 吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。 5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细 胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。 【注意事项】 1. DAPI 被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。 2. 本产品需避光,并尽量避免反复冻融。 3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
DAPI Solution,10μg/ml【保存条件】 -20℃避光保存,有效期 1 年。 【进口原料】 ROCHE REF10236276001, LOT35273022(不同批次产品原料批次会有更新) 【概述】 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐)是一种能够与 DNA 中大部分 A、T 碱基相互结 合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测。因为 DAPI 可以透过完整的细胞膜,它可以用于活 细胞和固定细胞的染色。当 DAPI 与双链 DNA 结合时,最大吸收波长为 358nm,最大发射 波长为 461nm。DAPI 的发射光为蓝色,且 DAPI 和绿色荧光蛋白 GFP 或 Texas Red 染剂(红 色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠,可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光 染色。本产品母液为 DMF 溶解,后以 PBS 稀释为 DAPI-PBS 溶液,浓度为 10μg/ml。经过 滤处理,为即用型工作液,可直接用于固定细胞或组织样品的细胞核染色。 【使用方法(仅供参考)】 1. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色, 则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染 色,则直接进行后续的 DAPI 染色。 2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 DAPI 染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至 少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,混匀。 3. 室温放置 5-10 分钟。 4. 吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。 5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细 胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。 【注意事项】 1. DAPI 被普遍认为具有致癌性,操作时应戴手套,并避免交叉污染。 2. 本产品需避光,并尽量避免反复冻融。 3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
1×Red Blood Cell Lysis Buffer (RBC Lysis Buffer), Sterile【保存条件】 4℃或室温避光保存 12 个月 【概述】 本裂解液经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它 有细胞核的细胞。本裂解液的主要有效成分为氯化铵。本裂解液经过无菌处理,处理过的血 液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的 分析和检测。 【使用建议(仅供参考)】 1. 使用前应将红细胞裂解液恢复至室温。1 倍体积的新鲜全血加入 3 倍体积的红细胞裂解 液。如 1ml 新鲜全血加入 3ml 红细胞裂解液,吹打混匀或颠倒混匀。 2. 冰上放置 15 分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。 3. 收集细胞:4℃,450×g 离心 10 分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。 4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液 为 1ml,则加入 2ml 的红细胞裂解液。 5. 4℃,450×g 离心 10 分钟沉淀白细胞,小心并彻底吸去上清液。 6. 重悬细胞,用于后续实验;如提取 RNA,最好于此步开始使用 DEPC 水配制的溶液进行 操作。(组织细胞处理:新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上 清液,其余同上。) 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本裂解液为无菌产品,分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作.
1×ACK Lysing Buffer,Sterile【保存条件】 室温避光保存 12 个月 【概述】 本裂解液经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它 有细胞核的细胞。本裂解液的主要有效成分为氯化铵。本裂解液经过无菌处理,处理过的血 液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的 分析和检测。 【使用建议(仅供参考)】 1. 1 倍体积的新鲜全血加入 3 倍体积的红细胞裂解液。如 1ml 新鲜全血加入 3ml 红细胞裂 解液,轻轻涡旋或颠倒混匀。 2. 冰上放置 15 分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。 3. 收集细胞:4℃,450×g 离心 10 分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。 4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液 为 1ml,则加入 2ml 的红细胞裂解液。 5. 4℃,450×g 离心 10 分钟沉淀白细胞,小心并彻底吸去上清液。 6. 重悬细胞,用于后续实验;如提取 RNA,最好于此步开始使用 DEPC 水配制的溶液进行 操作。(组织细胞处理:新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上 清液,其余同上。) 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2. 本裂解液为无菌产品,分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作.
RNAse A Solution(10mg/ml)【保存条件】 -20℃保存,有效期 1 年 【概述】 Ribonuclease A,简称 RNase A,中文名为核糖核酸酶 A。进口试剂配制,酶活力为60U/mg,不含 DNase,用于消化 RNA,可直接使用或使用去离子水稀释至所需浓度使用。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验。 【注意事项】 1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作.
Proteinase K Solution(10mg/ml)【保存条件】 -20℃储藏,有效期 1 年。 【概述】 Proteinase K,中文名为蛋白酶 K。进口产品配置,不含 DNase,不含 RNase,可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验,例如基因组 DNA 抽提、酶的消化去除等。 【酶活力】 >300U/ml 【使用建议】 蛋白酶 K 在很宽的 pH 范围内有效,有效的 pH 范围为 pH4.0-12.5,最佳 pH 范围为pH7.5-8.0。蛋白酶 K 的最佳反应温度为 65℃,但在 65℃或更高的温度蛋白酶 K 自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择 50-55℃。 在 0.2-1%SDS 或约 10mM 尿素存在的情况下,蛋白酶 K 显示更高的酶活性。蛋白酶 K的常用工作浓度为 0.05-1mg/ml,根据所用缓冲液是否含有 SDS、尿素、pH 是否适合、温度是否适合等因 素确定具体的工作浓度。常用浓度的 EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶 K 的活力影响不大。 【注意事项】 1. 如果每次使用量较小,推荐分装使用。 2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作