HP Electroporation Solution【保存条件】 4℃保存 6 个月 【概述】 本品是通用型电转染过程中的缓冲液,可用于 DNA、siRNA 及蛋白等细胞转染,可显 著提高细胞转染效率及细胞存活率,适用于常见各种细胞类型,与所有电转仪器兼容。 【使用建议(仅供参考)】 1. 收集细胞(细胞应处于对数生长期):用胰酶消化细胞,将细胞培养液吸入到 15ml 离 心管中,1000rpm 离心约 5min,弃上清。 2. 用不含血清的培养液洗涤一次,弃上清。 3. 取 2-10μg 质粒加入到 100μl 电转缓冲液中,充分混匀。 4. 用 100μl 混有质粒的电转缓冲液充分溶解细胞,转入 0.2cm 电转导入杯中。(每 5×105 个细胞使用约 20μl 电转缓冲液) 5. 将电转导入杯放入样品槽中,释放电脉冲,电击参数按电容 1000µF,电压 150-500 V, 间隔 20V 取值,取得最佳效果。(具体方案依照使用仪器设备的要求为准) 6. 立即取出电击杯,分别用一次性吸管将混和液转移至加有完全培养基的一次性细胞培 养瓶中,放入细胞培养箱中培养。 【注意事项】 1. 注意无菌操作,尽量避免污染。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
HP Electroporation Solution【保存条件】 4℃保存 6 个月 【概述】 本品是通用型电转染过程中的缓冲液,可用于 DNA、siRNA 及蛋白等细胞转染,可显著提高细胞转染效率及细胞存活率,适用于常见各种细胞类型,与所有电转仪器兼容。 【使用建议(仅供参考)】 1. 收集细胞(细胞应处于对数生长期):用胰酶消化细胞,将细胞培养液吸入到 15ml 离心管中,1000rpm 离心约 5min,弃上清。 2. 用不含血清的培养液洗涤一次,弃上清。 3. 取 2-10μg 质粒加入到 100μl 电转缓冲液中,充分混匀。 4. 用 100μl 混有质粒的电转缓冲液充分溶解细胞,转入 0.2cm 电转导入杯中。(每 5×105个细胞使用约 20μl 电转缓冲液) 5. 将电转导入杯放入样品槽中,释放电脉冲,电击参数按电容 1000µF,电压 150-500 V, 间隔 20V 取值,取得最佳效果。(具体方案依照使用仪器设备的要求为准) 6. 立即取出电击杯,分别用一次性吸管将混和液转移至加有完全培养基的一次性细胞培养瓶中,放入细胞培养箱中培养。 【注意事项】 1. 注意无菌操作,尽量避免污染。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Bis-Tris Sample buffer,2×(with DTT)【保存条件】 -20℃避光保存,有效期 1 年。建议分装冻存,避免反复冻融。 【概述】 2×NeoPAGE 蛋白电泳上样缓冲液可保护蛋白质在样品制备步骤中免受热降解,并在NeoPAGE 凝胶电泳运行期间防止 pH 值变化。一些蛋白质对在电泳期间温度波动引起的 pH变化敏感,优化后的上样缓冲液组分可防止在电泳之前的样品加热过程中以及电泳过程中蛋白质降解。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS 还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT 可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。上样缓冲液的跟踪染料为考马斯亮蓝 G-250(蓝色),用于跟踪电泳的进度。 【使用建议】 1. 使用前请室温完全解冻上样缓冲液并摇匀。 2. 请按每 10μl 蛋白样品加入 10μl 上样缓冲液的比例(两倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。 3. 混匀后,90-100℃水浴加热 5-10 分钟,使蛋白变性。 4. 冷却至室温后,10000-14000rpm 离心 2-5 分钟,取上清直接上样电泳即可。 【注意事项】 1. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
RNA Chill【保存条件】 -20℃保存一年 【概述】 RNA Chill RNase 灭活试剂(25×)设计用于代替 DEPC 用于分子生物学试剂,可用于与 DEPC 不兼容的溶液(例如 Tris 或 MOPS 缓冲液)、不能高压灭菌的溶液以及酶促反应中的 无酶处理。 当酶学实验中试剂用 RNA Chill RNase 灭活试剂(25×)处理时,未观察到以下各类酶促反 应受到抑制(包括但不限于):T7、T3 和 SP6 RNA 聚合酶,体外转录; MMLV 和 AMV, 逆转录(42°C);PCR 实验的 Taq 酶。 【操作方法】 1. 在待处理的缓冲液或溶液中将 RNA Chill RNase 灭活试剂(25×)稀释至终浓度 1×(如 10ml 待处理溶液中加入 RNA Chill(25×) 0.4ml),并充分混合。 2. 将混合物在 60°C 下孵育 10-20 分钟,然后冷却至室温。然后缓冲液/溶液即可用于 RNA 分离和分析。处理过的溶液可以在室温、4°C 或–20°C 下储存直至使用。 3. 为消除初始处理后可能出现的任何 RNase 污染,可将重复使用后的处理过的溶液重新加 热至 60°C 10-20 分钟。 【注意事项】 1. RNA Chill RNase 灭活试剂(25×)在高于 45°C 时具有活性,但高于此温度孵育的反应中可能会使某些酶 失活。 因此,在加入某些酶之前用 RNA Chill(25×)试剂处理反应缓冲液(Taq 酶等耐高温酶除外)。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
RNA Chill【保存条件】-20℃保存一年 【概述】RNA Chill RNase 灭活试剂(25×)设计用于代替 DEPC 用于分子生物学试剂,可用于与DEPC 不兼容的溶液(例如 Tris 或 MOPS 缓冲液)、不能高压灭菌的溶液以及酶促反应中的无酶处理。当酶学实验中试剂用 RNA Chill RNase 灭活试剂(25×)处理时,未观察到以下各类酶促反应受到抑制(包括但不限于):T7、T3 和 SP6 RNA 聚合酶,体外转录; MMLV 和 AMV,逆转录(42°C);PCR 实验的 Taq 酶。 【操作方法】1. 在待处理的缓冲液或溶液中将 RNA Chill RNase 灭活试剂(25×)稀释至终浓度 1×(如 10ml待处理溶液中加入 RNA Chill(25×) 0.4ml),并充分混合。2. 将混合物在 60°C 下孵育 10-20 分钟,然后冷却至室温。然后缓冲液/溶液即可用于 RNA分离和分析。处理过的溶液可以在室温、4°C 或–20°C 下储存直至使用。3. 为消除初始处理后可能出现的任何 RNase 污染,可将重复使用后的处理过的溶液重新加热至 60°C 10-20 分钟。 【注意事项】1. RNA Chill RNase 灭活试剂(25×)在高于 45°C 时具有活性,但高于此温度孵育的反应中可能会使某些酶失活。 因此,在加入某些酶之前用 RNA Chill(25×)试剂处理反应缓冲液(Taq 酶等耐高温酶除外)。2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品中文名称:氯化钠溶液(5mol/L,无菌)产品英文名称:Sodium Chloride Solution, 5mol/L,Sterilize运输条件:常温运输
产品中文名称:氯化钾溶液(3mol/L)产品英文名称:Potassium Chloride Solution, 3mol/L运输条件:常温运输
Sodium Citrate Buffer(0.01mol/L, pH6.0, powder),1L/pack【保存条件】 室温保存,有效期 2 年 【概述】 柠檬酸-柠檬酸钠抗原修复液是一种最常用的抗原修复液,可以用于多聚甲醛、甲醛或 其它醛类试剂固定后的石蜡切片、冰冻切 片的抗原修复。 细胞或组织多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联,遮蔽了样 品的抗原位点,导致免疫染色时 染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果,这就需要 对组织进行抗原修复。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复 会大大改善石蜡切片的免疫染色 效果,对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显 著改善,特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进 行抗原修复。从原理上 来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品, 进行抗 原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色 效果。 本产品特别适用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片。 【使用建议】 实验前准备: 本产品为干粉,使用时用蒸馏水或去离子水溶解,定容至 1L,如需必要,可使用盐酸调 pH 值至 6.0。 抗原修复: 1. 高压蒸汽法 a. 抗原修复:压力锅中加入足以淹没切片的抗原修复液,加热至沸腾。 b. 将脱蜡至水的切片置染色架上,放入锅中,盖好锅盖,扣上压力阀加压,设置保压 4 min。 c. 压力下降后打开锅盖,放置室温冷却,待溶液冷却至室温后取出切片。 d. PBS 或 TBS 洗涤 3 次,每次 5 min,随后即可进行后续的免疫染色步骤。 2. 蒸煮锅法 a. 将置于染色架上的切片放于抗原修复液中,95~100°C 加热 10~20 min。 b. 冷却至室温后取出,PBS 或 TBS 洗涤 3 次,每次 5 min,随后即可进行后续的免疫染色 步骤。 3. 微波法 a. 向微波炉专用容器中加入抗原修复液,加热至沸腾。 b. 将脱蜡至水的切片置染色架上,放于容器中,煮沸 10~20 min。 c. 冷却至室温后取出,PBS 或 TBS 洗涤 3 次,每次 5 min,随后即可进行后续的免疫染色 步骤。 4. 对于其他切片 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片的步骤进行。 【注意事项】 1. 抗原修复的时间为建议时间,请根据不同的样品、抗体和抗原自行摸索。 2. 抗原修复后,待溶液冷却至室温后再取出切片,使抗原表位在经历高温后复原。 3. 抗原修复液的加入量要足以淹没切片几厘米,防止在煮沸过程中切片变干。 4. 抗原修复过程需使用耐热染色架进行操作。 5. 试剂有潮解性,若有潮解请放心使用。 6. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。